一、增殖性玻璃体视网膜病变实验和临床研究（论文文献综述）
林艾迪[1]（2021）在《增殖性糖尿病视网膜病变中玻璃体黄斑界面疾病的患病率》文中认为背景 玻璃体黄斑界面在增殖性糖尿病视网膜病变（proliferative diabetic retinopathy,PDR）的疾病的发生和发展中发挥着重要作用。光学相干断层成像（optical coherence tomography,OCT）是一种无创的先进技术,能够用于玻璃体黄斑界面疾病（vitreomacular interface disorders,VMID）的检测。已有不少文献报道了PDR合并VMID中一种或两种类型的临床特征和治疗效果,但目前关于VMID在PDR中的总体患病情况却仍未有研究。目的 探究PDR病人中VMID的患病率及其影响因素,评估VMID对PDR患者视网膜内形态结构和视力的影响。方法 采用回顾性研究。以2014年1月至2019年8月于汕头国际眼科中心就诊的PDR患者作为研究对象,收集其临床病历资料和黄斑OCT图像。通过分析黄斑OCT图像评估其是否伴有VMID,包括玻璃体黄斑粘连（vitreomacular adhesion,VMA）,玻璃体黄斑牵拉（vitreomacular traction,VMT）,视网膜前膜（epiretinal membrane,ERM）,板层黄斑裂孔相关视网膜前增生膜（lamellar hole-associated epiretinal proliferation,LHEP）和黄斑裂孔（macular hole,MH）,并计算出其患病率。采用单、多因素分析方法对PDR合并VMID的影响因素进行分析,用广义估计方程模型控制来自同一患者双眼数据的相关性。同时也评估了VMID对PDR患者视网膜内形态结构和视力的影响。结果 本研究共纳入493例PDR患眼,检出VMID401例,患病率为81.3%,其中ERM、VMT、MH、LHEP和VMA的患病率分别是78.9%、13.4%、4.8%、2.2%和2.0%。多因素Logistic回归分析结果显示,纤维血管增殖膜均为MH（OR=8.029,p=0.005）、VMT（OR=3.774,p<0.001）和ERM（OR=2.305,p<0.001）的影响因素。高危型PDR是ERM的另一危险因素（OR=1.846,p=0.020）。女性患者为PDR患者患MH的危险因素（OR=3.836,p=0.031）,而玻璃体积血是其保护因素（OR=0.344,p=0.028）。与不伴VMID的患者相比,PDR合并VMID的患者出现黄斑囊腔、视网膜劈裂和牵拉性视网膜脱离的频率更高（p≤0.014）,其视力也更差（p=0.001）。结论 PDR患者中的VMID患病率很高,纤维血管增殖膜为PDR合并VMID的影响因素（包括VMT,ERM和MH）。VMID对PDR患者的视网膜内形态结构和视力均有影响,在临床工作中,对PDR患者应该仔细评价其玻璃体黄斑界面情况,才能更好地制定治疗策略和评估预后。
张阳[2]（2021）在《姜黄素、白花丹醌、藏红花酸对增殖性玻璃体视网膜病变抗增殖的效果比较及机制研究》文中提出增殖性玻璃体视网膜病变（PVR）是一种严重威胁视力的常见眼病,发生在5-10%的孔源性视网膜脱离患者中。该疾病的特征是视网膜前膜和/或视网膜下膜的形成,这可能会扭曲视网膜组织结构并导致再脱离。视网膜色素上皮（RPE）细胞的增殖是PVR发生的始动环节。视网膜前膜形成过程类似于RPE细胞增殖的伤口愈合反应,该细胞经历上皮-间质转化并进行迁移。PVR增殖膜形成的触发因素被认为与损伤导致的血视网膜屏障紧密连接的损害和生长因子、趋化介质和炎症细胞因子的释放有关。视网膜裂孔和脱离区域可能导致液体从玻璃体渗漏到视网膜下间隙,并为RPE细胞迁移到视网膜内表面创造了条件。在众多生长因子中,成纤维细胞生长因子2（FGF-2）在玻璃体视网膜界面的增殖过程中起重要作用,刺激RPE细胞、成纤维细胞和血管内皮细胞的迁移和增殖,并可诱导实验性PVR。因此,我们使用FGF-2来诱导ARPE-19细胞和体内造模,更接近PVR的病理环境。目前,临床上尚无批准的药物治疗PVR,主要治疗方法仍是手术。手术治疗包括去除纤维膜,在某些病例中切除部分视网膜。治疗或预防PVR形成的药物可能会提高视网膜脱离后的手术成功率和保护视力。某些药物作用于PVR病理过程中的不同过程（包括细胞增殖、迁移和收缩）,将成为治疗或预防PVR形成的有潜力的治疗方法。我们团队曾对姜黄素、白花丹醌和藏红花酸分别进行了体内和体外实验研究,研究显示这三种药物对PVR均有抑制作用,且副作用小。为了找到高效安全的药物,本课题比较了这三种药物的作用效果并对最佳药物的作用机制进行研究,为防治PVR提供了新思路。第一部分姜黄素、白花丹醌、藏红花酸对FGF-2诱导的体外人视网膜色素上皮细胞增殖抑制的实验研究目的:本研究采用不同浓度的FGF-2作用于人视网膜色素上皮细胞（ARPE-19）,观察其促增殖作用强弱,选择最佳FGF-2浓度诱导ARPE-19细胞。研究姜黄素、白花丹醌和藏红花酸对FGF-2诱导的ARPE-19细胞增殖的抑制作用,评估最佳的抗增殖药物。方法:1.体外培养ARPE-19细胞,采用CCK-8法检测不同浓度FGF-2（1、5、10、20、40 ng/ml）在不同作用时间（24 h、48 h、72 h）对ARPE-19细胞增殖的影响。2.采用CCK-8法检测不同浓度的姜黄素（0、1、3、10、20、30、40、50、100μM）、白花丹醌（0、0.3、0.9、2.7、5、8、10μM）、藏红花酸（0、30、50、100、200、300、400、500μM）对FGF-2诱导的ARPE-19细胞作用24h后的增殖抑制影响,并比较药物作用效果强弱。结果:1.在24 h、48 h、72 h三个时间点中,各浓度FGF-2（1、5、10、20、40 ng/ml）均能诱导各组细胞增殖（P<0.05）,OD值均随孵育细胞时间的延长逐渐增高。在各时间点各浓度组中,10 ng/ml的FGF-2促增殖作用最强。2.比较各浓度的姜黄素、白花丹醌和藏红花酸对FGF-2诱导的ARPE-19细胞增殖抑制作用,CCK-8结果显示三种药物均能抑制细胞增殖（P<0.05）。其中,白花丹醌IC50值在三种药物中最小,提示其疗效最好,在低浓度时即显示出对细胞明显的抑制作用。结论:1.FGF-2作用于ARPE-19细胞的最佳浓度为10 ng/ml。2.不同浓度的姜黄素、白花丹醌、藏红花酸对FGF-2诱导的ARPE-19细胞均有抑制增殖作用。抑制细胞增殖效果最好的药物是白花丹醌。第二部分白花丹醌对FGF-2诱导的体外人视网膜色素上皮细胞增殖、迁移和侵袭抑制的实验研究目的:在第一部分发现白花丹醌抑制细胞增殖作用最强的基础上,进一步探讨白花丹醌对FGF-2诱导的ARPE-19细胞增殖、迁移、侵袭的影响及调控机制。方法:1.采用CCK-8法、EdU法检测ARPE-19细胞增殖。采用western blot检测不同浓度白花丹醌作用下ARPE-19细胞中PCNA蛋白含量变化情况。2.采用划痕实验和Transwell小室检测ARPE-19细胞迁移和侵袭。3.采用RT-PCR和western blot检测ARPE-19细胞MMP-2、MMP-9、Ⅰ型、Ⅳ型和Ⅵ型胶原的mRNA和蛋白的表达。4.采用western blot检测ARPE-19细胞FGFR-1/-2、ERK、p38和JNK的磷酸化情况。结果:1.采用CCK-8和EdU法检测了细胞的增殖情况。结果发现1.25和2.5μM白花丹醌对细胞活力没有显着影响,5和7.5μM白花丹醌则显着降低了细胞活力。EdU实验的结果显示FGF-2能促进ARPE-19细胞的增殖。采用western blot检测细胞PCNA蛋白的表达水平发现随着白花丹醌浓度的增加,PCNA蛋白表达水平逐渐减少（P<0.05）,呈剂量依赖性。因此,我们证明了白花丹醌能抑制FGF-2诱导的ARPE-19细胞增殖。2.采用细胞划痕实验和Transwell实验检测ARPE-19细胞迁移和侵袭。白花丹醌在细胞划痕实验中显着抑制了细胞迁移（P<0.05）。白花丹醌在Transwell实验中显着抑制了细胞侵袭（P<0.05）。3.采用RT-PCR和western blot检测了ARPE-19细胞中MMP-2和MMP-9的表达水平。结果显示白花丹醌显着抑制了MMP-2和MMP-9的mRNA和蛋白的表达（P<0.05）,呈剂量依赖性。采用RT-PCR和Western blotting评估FGF-2诱导的ARPE-19细胞中Ⅰ型、Ⅳ型和Ⅵ型胶原的表达水平。结果显示FGF-2可促进Ⅰ型、Ⅳ型、Ⅵ型胶原的mRNA和蛋白表达（P<0.05）。白花丹醌对Ⅰ型、Ⅳ型、Ⅵ型胶原mRNA和蛋白表达有剂量依赖性的抑制作用。4.采用RT-PCR和western blot检测了FGFR-1/-2、ERK、p38和JNK的磷酸化情况。结果表明FGFR-1和FGFR-2在FGF-2处理后细胞内磷酸化水平显着增加,而白花丹醌显着降低FGFR-1和FGFR-2磷酸化。FGF-2诱导ERK,p38和JNK的磷酸化水平显着提高。但是随着白花丹醌浓度的逐渐增加,ERK、p38和JNK的磷酸化水平显着下降（P<0.05）。结论:1.白花丹醌能抑制FGF-2诱导的ARPE-19细胞的增殖、迁移和侵袭。2.白花丹醌抑制ARPE-19细胞的增殖、迁移、侵袭的作用可能与抑制MMP-2/-9、Ⅰ型、Ⅳ型、Ⅵ型胶原mRNA和蛋白表达有关。3.白花丹醌抑制ARPE-19细胞的增殖、迁移、侵袭的作用可能是通过抑制FGFR-1/-2、ERK、p38和JNK的磷酸化实现的。第三部分白花丹醌防治兔眼增殖性玻璃体视网膜病变的在体实验研究目的:本研究第二部分发现白花丹醌能抑制体外ARPE-19细胞的增殖迁移和侵袭。本部分实验我们采用FGF-2联合ARPE-19细胞对兔眼造模,进一步探讨白花丹醌对兔眼PVR发展是否有抑制作用。方法:1.将有色兔随机分成2组,各组5只。对照组兔眼玻璃体腔注射FGF-2（50 ng）、ARPE-19细胞和磷酸盐缓冲液（PBS）。实验组兔眼玻璃体腔注射FGF-2（50 ng）、ARPE-19细胞和白花丹醌。应用眼底照相、B超和OCT对造模前及造模后3、7、14、21、28天的兔眼进行检查。根据检查结果,依据Fastenberg分级划分各组兔眼PVR级别。2.在造模后的第28天,检查完毕后,取下兔眼组织,应用HE染色观察各组视网膜组织病理变化。应用免疫组织化学观察各组视网膜α-SMA的表达情况。结果:1.造模后第3天:对照组1只眼PVRⅠ级。实验组全部PVR 0级。造模后第7天:对照组1只眼PVRⅡ级,2只眼PVRⅠ级。实验组1只眼PVRⅠ级。造模后第14天:对照组2只眼PVRⅢ级,2只眼PVRⅡ级,1只眼PVRⅠ级。实验组1只眼PVRⅡ级,3只眼PVRⅠ级。造模后第21天:对照组2只眼PVRⅣ级,3只眼PVRⅢ级。实验组2只眼PVRⅡ级,2只眼PVRⅠ级。造模后第28天:对照组2只眼PVRⅤ级,3只眼PVRⅣ级。实验组2只眼PVRⅢ级,2只眼PVRⅡ级。对照组在造模后的第14天视网膜脱离的发生率为60%,第21天后视网膜脱离发生率为100%。实验组在造模后的第28天视网膜脱离的发生率为40%。2.HE染色见正常视网膜各层结构清晰,对照组视网膜神经节细胞层水肿,内外核层细胞排列紊乱,光感受器细胞外节丢失,实验组视网膜结构整齐,光感受器细胞外节也丢失。免疫组织化学染色中,α-SMA在正常组色素兔视网膜未见阳性染色,对照组视网膜可见强染的棕黄色,实验组视网膜可见弱染的浅棕色。结论:白花丹醌能抑制兔视网膜前膜的形成,延缓PVR的进展。
张宇婷[3]（2020）在《影响增殖性糖尿病视网膜病变玻切术后视力恢复的相关因素研究》文中进行了进一步梳理目的:分析玻璃体切割手术治疗增殖性糖尿病性视网膜病变（proliferative diabetic retinopathy,PDR）术后短期视力恢复的影响因素。方法:收集2018年1月份至2018年12月份在我院确诊为增殖性糖尿病性视网膜病变并行玻璃体切割（pars plana vitrectomy,PPV）手术治疗的连续患者资料进行回顾性研究,随访时间≥3个月。所有研究眼均行23G玻璃体切割术,排除标准:既往术眼眼外伤史、青光眼病史、先天性眼疾病、遗传性眼病、黄斑病变及随访缺失。纳入分析研究的风险因素包括患者性别、年龄、居住地（城市/农村）、糖尿病病程、是否注射胰岛素治疗、是否口服降糖药物、糖化血红蛋白值、是否合并高血压、术前是否行过眼底激光治疗、自觉视力下降时间、术前视力、术前眼压、是否伴有玻璃体后脱离、是否伴有牵拉性视网膜脱离、是否伴有虹膜红变、是否伴有房角新生血管、术后晶状体状态（保留晶体/晶状体摘除/晶状体摘除联合人工晶状体植入）、手术操作时间、玻璃体腔状态（灌注液/硅油/惰性气体）、是否联合抗血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）治疗（否/术前/术中）。采用SPSS25.0（statistic package social science,SPSS）统计学软件以多重线性回归方法与将上述多个因素与术后3个月的Log MAR最佳矫正视力（best corrected visual acuity,BCVA）做相关性分析。结果:共收集246例患者246只眼,其中男性120例,女性126例。平均年龄54.23±10.9岁。术后3个月的平均BCVA（Snellen视力）0.2969±0.25363。0.3以上（包括0.3）共111例,0.02-0.3（包括0.02）共95例,0.02以下共40例。统计分析结果表明术前Log MAR BCVA（β=0.314 P<0.001）、手术操作时间（β=0.005 P=0.009）、糖尿病病程（β=0.011 P=0.048）,与术后3个月的Log MAR BCVA呈正相关;而术中保留晶状体（β=-0.690 P<0.001）/同期联合白内障摘除并植入人工晶状体（β=-0.742 P<0.001）相比与无晶状体眼与术后3个月的Log MAR BCVA呈负相关。患者性别、年龄、居住地、是否胰岛素治疗、是否口服降糖药物、是否合并高血压、是否伴有玻璃体后脱离、是否伴有牵拉性视网脱离、自觉视力下降时间、前/术中是否抗VEGF治疗与术后3个月的Log MAR BCVA无显着相关性。结论:玻璃体切割手术治疗PDR,较好的术前BCVA、较短的手术操作时间和较短的糖尿病病程短预示着较好的术后短期视力恢复。
韩昊特[4]（2021）在《PI3Kδ在PVR中的作用机制及视网膜病变治疗新途径研究》文中提出增殖性玻璃体视网膜病变（PVR）是与视网膜牵拉和脱离相关的临床综合征。视网膜和玻璃体腔表面具有增殖潜能的细胞增殖和收缩是其形成的主要原因。目前多数情况下,可以实现与PVR相关的视网膜的外科手术复位,但视觉恢复效果仍较差。在多达10%的视网膜脱离患者中发现,一定程度的PVR尽管进行了复杂的手术,但大多数病人仍会视力低下。糖尿病性视网膜病变,特别是其增生阶段（增殖性糖尿病性视网膜病变,proliferative diabetic retinopathy,PDR）,与病理性血管生成有关,是导致失明的第二大原因。当前,PDR治疗方法通常使用VEGF抗体（兰尼单抗或贝伐单抗）或由融合至VEGF受体胞外域的抗体Fc片段组成的重组蛋白来中和玻璃体中的血管内皮生长因子。但在许多PDR患者中都观察到了耐药性,迫切需要新的治疗方法。本论文基于CRISPR-Cas9基因编辑技术研究PI3Kδ在PVR形成中的作用机制,探索PVR基因治疗新途径;并从天然单体化合物中筛选潜在的治疗视网膜病变（如PVR和PDR）的先导化合物或药物,为视网膜疾病的治疗提供新的治疗方法。本论文的主要研究内容和结果如下:（1）应用CRISPR-Cas9基因编辑技术研究磷酸肌醇3激酶δ（PI3Kδ）在玻璃体诱导的Akt/Mdm2/p53激活和视网膜色素上皮细胞迁移中的作用磷酸肌醇3激酶（PI3K）是脂质家族蛋白激酶,其在信号传递方面起关键作用。PI3Ks包括PI3Kα,PI3Kβ,P13Kγ和PI3Kδ。PI3K在实验性增殖性玻璃体视网膜病变中起重要作用,但是,PVR涉及何种PI3K亚型尚不清楚。本章研究表明,p110δ在视网膜色素上皮RPEs细胞中特异性高表达,为了阐明PI3K亚型在PVR形成中的分子机制,利用CRISPR-Cas9基因编辑技术构建p110δ敲减细胞系,并采用p110δ特异抑制剂Idelalisib用分子和药理学方法灭活p110δ,证明p110δ灭活可阻止玻璃体诱导的Akt/Mdm2/p53通路的激活以及在PVR形成中细胞固有的细胞应答,进而阐明了PI3K亚型在PVR形成中的分子机制。这些研究为RPE（如PVR）相关疾病的治疗提供了新的技术手段。（2）TGF-β2诱导的PI3Kδ信号转导环在PVR疾病中的作用在PVR的发展过程中,上皮间质转化（EMT）是细胞主要的应答反应,而转化生长因子（TGF）-β2是诱导EMT的关键因素。PI3K/Akt信号通路是实验性PVR的重要调节通路,而在玻璃体诱导的Akt激活中,PI3Kδ亚型起主要作用。本章研究表明,通过CRISPR/Cas9或药理学（Idelalisib抑制剂）方式使PI3Kδ失活,可有效阻断TGF-β2诱导的Akt激活以及EMT。Idelalisib对PI3Kδ的抑制作用还可以防止在小鼠中实验性诱导的PVR形成。进一步研究发现TGF-β2诱导PI3Kδ/Akt/Mdm2/NF-κB途径控制PI3K的催化亚基p110δ的表达,并产生正反馈回路,这一通路的发现为阐明PVR的发病机理奠定了基础。（3）Chalcomoracin预防玻璃体诱导的Akt活化和视网膜色素上皮细胞迁移为了寻找治疗视网膜病变新的药物或先导化合物,本章选用实验室从真菌感染的桑叶分离得到的天然单体化合物Chalcomoracin（CMR）,研究其抑制玻璃体诱导的信号转导通路和PVR固有的细胞反应。研究表明,CMR对ARPE-19细胞IC50在72小时为35.5μM,而5μM的CMR则可显着抑制玻璃体诱导的Akt激活和p53抑制。此外,还发现CMR能有效地阻断玻璃体刺激的ARPE-19细胞的增殖,迁移和收缩,表明CMR是一种潜在的PVR预防剂。（4）Capilliposide B在人原代视网膜微血管内皮细胞中阻断VEGF诱导的体外血管生成异常的血管生成与PDR的形成有关。本章探讨天然产物对PDR的治疗的可行性。Capilliposide B（CPS-B）是一种来源于细梗香草（Lysimachia capillipes Hemsl）的齐墩果三萜皂苷,可以抑制血管内皮生长因子诱导的血管生成信号通路和人视网膜微血管内皮细胞（HREC）在PDR中的细胞响应。研究表明,CPS-B对HREC细胞IC50在72小时为8.5μM,而1μM CPS-B则可特异性抑制VEGF诱导的VEGFR2及其下游信号转导酶Akt和Erk的活化。发现CPS-B有效地阻断了VEGF刺激的HREC增殖,迁移和管形成,表明CPS-B是一种潜在的血管新生相关疾病（如增殖性糖尿病性视网膜病）的预防剂。
刘晓清[5]（2019）在《散血明目片对兔PVR中MAPK及PI3K/Akt信号通路的影响》文中研究指明目的:通过建立兔外伤性增殖性玻璃体视网膜病变模型,观察散血明目片对其视网膜增殖膜中PI3K、AKT、MEK、P38MAPK蛋白的表达影响。方法:将42只新西兰大白兔随机分为A、B、C、D、E、F、G组,共7组每组6只。分别为:A组:空白组（正常组）;B组:模型组;C组:散血明目片组;D组:PD98059组;E组:LY294002组;F:MK-2206组;G组:抑制剂混合组。造模后30min,向D组、E组、F组、G组分别向玻璃体腔注射0.1ml的PD98059、LY294002、MK-2206及三种混合抑制剂。B、C组则予以玻璃体腔内注射0.1ml生理盐水。术后第一天散血明目片组予以散血明目片10mg/kg溶液灌胃,除A组其余组以生理盐水10mL/kg灌胃,连续灌胃28天。造模后第1、3、7、14、21、28天分别用手持裂隙灯、直接眼底镜观察眼前节、眼底情况,眼底照相、眼部B超、三面镜记录眼底情况。28天后处死,取材将视网膜增殖膜送检,分别在光镜下观察视网膜各层的形态结构,免疫组化法检测各组视网膜增殖膜中PI3K、AKT、MEK、P38MAPK在视网膜各层的表达情况,qPCR法、Western Blot法检测各组视网膜增殖膜的PI3K、AKT、MEK、P38MAPK表达情况。结果:1.眼前节情况:术后各造模兔眼结膜不同程度出现充血,个别角膜出现水肿、前房有少量浮游物,个别兔眼出现晶状体混浊。术后第7天,各症状得以改善,眼前节炎症消除。2.眼底情况:成模后28天,造模组中玻璃体有不同程度混浊,明显可见增殖膜、增殖条索的形成,对局部视网膜有牵拉作用,并造成视网膜脱离。散血明目片组中玻璃体腔内可见少量的增生痕迹,未见明显的增殖条索,未有视网膜脱离。3.光镜下观察视网膜组织结构:模型组中视网膜水肿、各层结构紊乱,可见增生组织、大量的炎性细胞浸润以及胶原纤维的形成。散血明目片组中视网膜结构大致正常,可见少量炎性细胞,未见明显的增生。4.免疫组化法观察各指标在组织中的表达情况:模型组各层大都可见有棕黄色颗粒,以视网膜色素上皮层、视神经纤维层、节细胞以及增生组织中表达增多。散血明目片组表达较弱,以视网膜色素上皮层以及节细胞层表达居多。5.Western blot法检测指标蛋白在组织中的表达情况:用药28天后,可见各治疗组蛋白含量与模型组相比均有所降低。PI3K蛋白表达中:空白组与抑制剂混合组相比不具有统计学意义（P>0.05）,与其他比较有差异（P<0.05或P<0.01）。PI3K蛋白在模型组中大量表达,散血明目片组以及四组抑制剂组与模型组比较,可见表达量明显弱于模型组,差异具有统计学意义（P<0.01）。药物干预组中,散血明目片组与抑制剂混合组相不具有统计学意义（P>0.05）。散血明目片与其他三组抑制剂相比表达量低,差异具有统计学意义（P<0.01）。AKT蛋白表达中:散血明目片组分别与抑制剂混合组、空白组比较表达相似,无统计学意义（P>0.05）。造模组中,各用药干预组蛋白表达量与模型组相比均低,有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。散血明目片组与抑制剂混合组比较无统计学意义（P>0.05）。散血明目片组与其余三组抑制剂组相比,表达量明显低于三组,差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。MEK蛋白表达中:各造模组中MEK蛋白含量均明显提高,模型组表达含量最高,与空白组比较差异均具有统计学意义（P<0.01）。造模各组中,与模型组比较均有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。在药物干预组中,散血明目片与抑制剂混合组、PD98059组比较表达量高,差异具有统计学意义（P<0.05）,散血明目片组表达量明显低于LY294002组、MK2206组,较差异均有统计学意义（P<0.01）。P38MAPK蛋白表达中:各造模组与空白组比较,统计均有意义（P<0.01或P<0.05）。造模组中各组与模型组相比,表达量均比模型组低,差异有统计学意义（P<0.01或P<0.05）,各用药干预组中,四组抑制剂组与散血明目片组相比表达量均高于散血明目片组,具有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。6.qPCR检测各指标在组织中的表达情况:PI3K mRNA表达情况:抑制剂混合组与空白组比较无统计学意义（P>0.05）,其余六组与空白组比较有差异,具有统计学意义（P<0.01）。造模组中,药物干预组与模型组相比其表达量均有不同程度的降低,相比均有差异具有统计学意义（P<0.01）。各药物干预组中,散血明目片组与抑制剂混合组相比,表达相似,无统计学意义（P>0.05）。余组与散血明目片组比较差异具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。AKT mRNA表达情况:各造模组的AKT mRNA表达均有不同程度的提高,其中散血明目片组、抑制剂混合组与空白组比较无统计学意义（P>0.05）。造模组中,各药物干预组与模型组比较,表达量均比模型组低具有显着统计学意义（P<0.01或P<0.05）。各用药物干预组中,散血明目片组与抑制剂混合组比较无统计学意义（P>0.05）。散血明目片组与其它组相比表达量低,有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。MEK mRNA表达情况:造模组与空白组相比,均有差异具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）,各造模组中,模型组表达MEK mRNA显着,其余干预组与模型组相比,均具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。各用药干预组中,散血明目片组与抑制剂混合组、PD98059组比表达量高（P<0.05）,与余干预组比较表达量低（P<0.01）。P38MAPK mRNA表达情况:各造模组均有不同程度的表达,模型组表达量最多。与空白组比较均有差异,具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。造模组中各组表达量均比模型组低,与模型组相比有差异,有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。各药物干预组中,散血明目片组与四组抑制剂相比表达量低,差异具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。结论:1.散血明目片能改善兔PVR中视网膜的各层结构,减少炎性细胞浸润、减轻组织水肿、抑制增生组织的产生。2.散血明目片能够有效降低兔视网膜增殖膜中PI3K、AKT、MEK、P38MAPK的表达,但对其中MEK作用弱。3.散血明目片对PVR的防治可能与MAPK、PI3K/Akt信号通路有关。
任新军[6]（2019）在《Healaflow在孔源性视网膜脱离中的应用研究及其他眼底疾病中的应用探索》文中进行了进一步梳理目的:观察Healaflow覆盖封闭视网膜裂孔联合27G微创玻璃体切除和空气填充治疗原发性孔源性视网膜脱离的安全性和有效性;基于巩膜外垫压原理和微创观念,本研究采用特制微导管系统将Healaflow作为一种新型内垫压材料注射于脉络膜上腔,引起脉络膜上腔内垫压效应,观察研究其治疗原发性孔源性视网膜脱离的安全性、有效性及手术操作的可重复性,为推广临床采用脉络膜上腔内垫压术提供依据;以此为契机,基于Healaflow特性,将其应用于其他眼科疾病,开发新的、更符合临床述求的粘滞性材料,尤其是玻璃体腔填充物,提供理论依据和积累经验,拓展其眼科应用。方法:（1）体外实验:空气状态下,将0.05ml的Healaflow和普通粘弹剂透明质酸钠（爱尔康,美国）分别注射于培养瓶内的上壁、侧壁和下壁,遂将培养瓶内充满平衡液,置于37℃温箱中,定期观察和对比两种不同类型粘弹剂溶解和移位情况。（2）设计前瞻性研究,收集原发性孔源性视网膜脱离（PVR A、B级）患者入组,所有患者均采用27G玻璃体切除联合Healaflow覆盖视网膜裂孔和无菌空气填充,术后无体位限制。观察首次和最终视网膜复位率,术后最佳矫正视力,记录术中、术后并发症,视网膜脱离复发情况等。（3）收集就诊于我院并临床确诊为原发性孔源性视网膜脱离患者（PVR C1级以下）纳入第二部分研究。所有患者术前行常规裂隙灯检查、间接检眼镜眼底检查和眼B超检查等。患眼行27G套管穿刺巩膜制作光纤切口,全视网膜镜下定位视网膜裂孔位置,冷冻裂孔和变性区,必要时引流视网膜下液。角膜缘后3.5-4.0mm制作平行角膜缘长度约2mm全层巩膜切口,用15度刀平行于角膜缘垂直切开全层巩膜,暴露睫状体平坦部。将特制钝性针头经巩膜切口插入脉络膜上腔,全视网膜镜下于靶点位置注射0.1-0.4ml Healaflow。拔出导管,缝合巩膜和结膜切口。术中主要观察指标包括手术时间、并发症发生情况等。术后常规光谱抗生素点眼,详细记录术后1周、1月、3月、6月视网膜脱离复位情况,最佳矫正视力（BCVA）、眼压、手术后并发症的发生情况及病情进展情况。（4）Healaflow用于其他眼部疾病:1)Healaflow用于治疗难治性黄斑裂孔,玻璃体切除术后,气液交换,彻底吸除视网膜下液后Healaflow覆盖黄斑裂孔,术毕空气填充,术后无体位限制;2)Healaflow用于治疗严重PDR,气液交换后将Healaflow覆盖于视网膜裂孔上,空气填充,术后自由体位;3)前房注入Healaflow,用于治疗低眼压患者。结果:（1）体外实验:不同时间点（包括1天、3天、1周和2周）,Healaflow组始终保持贴壁黏附无溶解,直径和大小无改变。然而,普通粘弹剂透明质酸钠3天后全部溶于平衡液中。（2）37例38眼入组患者中,女性16例（43.2%）,男性21例（56.8%）,平均年龄为59.5±9.5岁,平均随访时间8.9±3.8个月,单一视网膜裂孔患者21例（55.3%）,介于2-5个视网膜裂孔患者17例（44.8%）,黄斑受累及患者25眼（65.8%）,13眼（34.2）黄斑未受累及。37眼首次视网膜成功复位（97.4%）,最终复位率为100%。仅一例首次视网膜未复位,与术前接受大量视网膜光凝后,裂孔周围视网膜僵硬、瘢痕形成有关,二次手术时,将裂孔周围视网膜放射状切开后仍使用Healaflow覆盖裂孔,最终成功复位视网膜。术前和术后3个月最佳矫正视力分别为1.02±0.82和0.23±0.17（LogMAR视力）,一过性眼压升高28眼（73.7%）,随访期间,无视网膜脱离复发及其他并发症发生。（3）7例7眼原发性孔源性视网膜脱离患者入组,男性3人（42.9%）,女性4人（57.1%）,右眼3眼（42.9%）,左眼4眼（57.1%）,平均年龄33.7±10.0岁（19-43岁）,平均随访时间7.6±3.4个月,黄斑受累及患者5眼（71.4%）,2眼（28.6%）黄斑未受累及。7例入组患者首次视网膜成功复位（100%）,术前和术后3个月最佳矫正视力分别为0.4±0.5和0.1±0.1（LogMAR视力,P=0.093）,术后一过性眼压升高1例（14.3%）,随访期间,无视网膜脱离复发及其他并发症发生。（4）Healaflow在其他眼部疾病中的应用:成功用于治疗难治性黄斑裂孔和严重PDR各一例,术后空气填充,无体位限制,裂孔闭合良好,术后视功能恢复快,减少了术后并发症的发生。Healaflow用于治疗低眼压患者3例,眼压维持在6-11mmHg之间。维持时间6个月以上,减少了重复注射次数。结论:（1）通过体外实验证实了Healaflow在培养瓶中不同位置贴壁后,水浴下持续存留时间至少两周。（2）27G微创玻璃体切除联合Healaflow覆盖视网膜裂孔和空气填充治疗原发性孔源性视网膜脱离,成功率高,视功能恢复快,术后不需限制体位,是一种安全、有效、便捷、持久的手术方式。（3）Healaflow半衰期长,粘滞性和内聚性高,良好的生物相容性,是目前较为理想的脉络膜上腔内填充材料,在保障视网膜复位高成功率和微创前提下,大大缩短了外路治疗孔源性视网膜脱离的手术时间。特制脉络膜上腔导管系统为微创手术治疗其他视网膜和脉络膜疾病提供了入路和可行性,为开发新的脉络膜上腔治疗途径提供了理论依据和经验积累。（4）基于Healaflow特性,拓展其应用于眼科其他疾病,如高度近视黄斑裂孔,糖尿病性视网膜病变及低眼压综合征等。
李宇博,苏颖[7]（2018）在《增殖性玻璃体视网膜病变发病机制及研究进展》文中研究说明增殖性玻璃体视网膜病变主要是孔源性视网膜脱离后长时间未得到复位,在玻璃体腔及视网膜内外表面未有纤维细胞性膜（无血管）形成和收缩的病变类型;增殖性玻璃体视网膜病变是导致孔源性视网膜脱离复位手术的失败主要原因,与此同时,增殖性玻璃体视网膜病变也是导致视网膜脱离的重要因素,其成因与玻璃体病理性纤维化相关。当前主要采取的治疗手段为手术治疗,但效果并不十分理想。为了进一步提高治疗效果,本文主要就增殖性玻璃体视网膜病变发病机制及研究现状进行相关探讨,以期为增殖性玻璃体视网膜病变的临床治疗提供更为可靠的理论依据。
余丰[8]（2018）在《三七防治兔外伤性增殖性玻璃体视网膜病变的实验研究》文中研究说明目的:本实验通过制作兔外伤性增殖性玻璃体视网膜病变（traumatic proliferative vitreoretinopathy,t PVR）模型,观察中药三七对外伤性增殖性玻璃体视网膜病变兔视网膜中转化生长因子-β（TGF-β）及肝细胞生长因子（HGF）表达的影响,探讨中药三七对兔外伤性增殖性玻璃体视网膜病变的防治作用。方法:采用巩膜穿通伤联合富含血小板的血浆玻璃体腔注入的方法制成外伤性PVR兔模型,将动物分成空白组、模型组、阳性对照组、三七低剂量组及三七高剂量组,三七治疗组给予不同剂量的三七粉混悬液进行灌胃,连续28天,阳性对照组一次性给予道诺霉素玻璃体腔注射,采用免疫组织化学分析的方法对兔视网膜中转化生长因子-β（TGF-β）及肝细胞生长因子（HGF）的表达进行检测和分析。结果:（1）各组眼底增生级数:给药后第1天,各组间的比较不具有统计学意义（P=0.296）;给药第7天后各组间的比较具有统计学意义（P<0.01）,且模型组与空白组的比较具有显着统计学意义（P<0.01）,阳性对照组及三七高剂量组的PVR分级低于模型组（P<0.01）,三七低剂量组与模型组的比较没有统计学意义（P>0.05）,三七高剂量组与阳性对照组间的比较没有统计学意义（P>0.05）。（2）各组的眼底增殖膜截面积:模型组兔眼底增殖膜截面积明显高于正常组,具有显着统计学意义（P<0.01）;阳性对照组、三七高剂量与模型组的比较具有显着统计学意义（P<0.01）,而三七低剂量组与模型组的比较不具统计学意义（P>0.05）。（3）各组视网膜中转化生长因子-β（TGF-β）表达情况:与空白组相比,模型组视网膜中TGF-β蛋白含量明显升高,具有显着统计学意义（P<0.01）。与模型组相比,阳性对照组及三七高剂量组中TGF-β蛋白含量降低,具有显着统计学意义（P<0.01）,三七低剂量组中TGF-β蛋白含量亦降低,具有统计学意义（P<0.05）。（4）各组视网膜中肝细胞生长因子（HGF）表达情况:与空白组相比,模型组兔视网膜中HGF蛋白含量明显升高,具有显着统计学意义（P<0.01）。与模型组相比,三七低剂量组HGF蛋白含量无明显差异（P>0.05）,阳性对照组、三七高剂量组HGF蛋白含量明显降低,具有显着统计学意义（P<0.01）。结论:本研究通过巩膜穿通伤联合富含血小板的血浆玻璃体腔注入的方法成功制成了兔外伤性PVR模型。研究发现中药三七可减轻外伤性PVR兔眼底的增生程度及抑制眼底增殖膜的形成,同时可降低TGF-β、HGF在视网膜上的表达,从而起到防治外伤性PVR的作用。
任彦新[9]（2016）在《姜黄素在增殖性玻璃体视网膜病变中对表皮生长因子的作用》文中认为增殖性玻璃体视网膜病变（proliferative vitreoretinopathy,PVR）是1983年由美国视网膜专家协会提出用来描述孔源性视网膜脱离（rhegmatogenous retinal detachment,RRD）等疾病后玻璃体和/或视网膜前后面特异细胞增殖形成可以收缩的细胞性膜,进而引起视网膜牵拉、脱离与固定的一种病变,是一种常见的难治性致盲性眼病。据报道,5%10%的RRD可继发PVR,而在复发性视网膜脱离（retinal detachment,RD）中,PVR的发生率增至75%。近年来,随着对PVR病理机制研究的逐渐深入,越来越多的研究发现表皮生长因子（epidermal growth factor,EGF）在RPE细胞的迁移、增生中起重要作用,是促进RPE细胞发生迁移进而发生PVR过程的关键因素之一。目前,临床上治疗PVR的主要方法就是玻璃体视网膜手术,但手术治疗效果并不理想,术后PVR的复发率较高。因此,随着对各种细胞和生长因子在PVR致病过程中作用机制了解的加深,针对PVR发展的不同阶段和相关因子采取不同药物来预防和治疗PVR成为目前进行研究的热点,并成为主流趋势。到现阶段为止,药物研究主要集中在西药领域,主要包括以下几类:皮质类固醇、维生素及其衍生物、抗代谢药、细胞外基质合成抑制剂和细胞信号转导抑制剂等。虽然应用西药来防治PVR的研究已有数年之久,但是由于其在眼内有较大的毒副作用、较单一的药理作用、较昂贵的价格等诸多的局限性致使迄今仍无一种特效的药物能够成功的在临床上得到广泛的应用。目前在西药上的研究难以取得突破性进展,那么应用我国传统中药来防治PVR的研究成为了充满希望的突破方向。中药具有药源丰富、作用广泛且毒副作用小等诸多优点,姜黄素是存在于姜科姜黄属植物根茎中的一种天然的中药单体成分,具有多种药理作用,例如抗炎症、抗细胞增生、抗微生物等。姜黄素的药理作用可以满足PVR防治药物的条件,并且安全性高、毒性低、药源广泛、价格低廉。我们的前期研究发现姜黄素具有抑制视网膜色素上皮细胞增殖的作用,那么姜黄素对在PVR形成过程中起重要作用的表皮生长因子是否有作用,本课题分别通过体外细胞实验和体内玻璃体腔注射姜黄素的动物实验研究姜黄素在pvr防治过程中对egf的作用和相关机制,为pvr的防治提供依据。第一部分表皮生长因子对体外培养的rpe细胞的作用及其在rpe细胞内的表达目的:研究egf对体外培养的兔rpe细胞的作用,探讨egf促进rpe细胞增殖的最佳质量浓度;观察egf在rpe细胞内的表达情况。方法:提取、培养青紫蓝兔rpe细胞,传至第三代并鉴定后,选取生长状态良好的第3代rpe细胞进行实验。将rpe细胞种植在载玻片上制备成细胞爬片,做免疫细胞化学染色进行rpe细胞鉴定和观察rpe细胞内egf的表达情况;将egf分为3、6、9、12ng/ml不同浓度组及空白对照组（10%fbs.dmem）4组;每组各设6个复孔,共接种3块培养板,加药后于24、48、72h随机抽取1块培养板采用四甲基偶氮唑盐（mtt）比色法检测不同浓度的egf在不同作用时间对rpe细胞增殖的影响。结果:rpe细胞培养早期生长活跃、胞核透明、胞浆含有丰富黑色素颗粒,免疫细胞化学染色提示角蛋白表达强阳性。egf在兔rpe细胞的细胞质中表达阳性,呈棕黄色。在相同时间点、不同浓度egf作用下,rpe细胞的吸光度（od值）随egf的浓度增加而增加,且与对照组比较差异均有统计学意义（p<0.05）。egf浓度≥9ng/ml的相邻浓度实验组两组间比较差异无统计学意义（p>0.05）。在相同浓度的egf作用下,rpe细胞吸光值（od值）随时间的增加而增加,且与相邻组比较差异均有统计学意义（p<0.05）。结论:体外培养可以获得大量rpe细胞并可用于体外实验研究;egf在兔rpe细胞的细胞质中表达;egf对体外培养兔rpe细胞增生的调控存在一定的剂量-效应关系、时间-效应关系。egf对rpe细胞的促生长作用在9ng/ml以上逐渐达到饱和。研究结果提示:促体外培养的兔rpe细胞增殖的egf的最佳浓度为9ng/m1。第二部分姜黄素对体外培养的rpe细胞中egf表达的抑制作用目的:研究不同浓度的姜黄素对体外培养的rpe细胞中egf表达的影响,应用免疫细胞化学染色方法检测兔rpe细胞中egf的表达情况,寻找姜黄素抑制egf表达的最佳浓度;应用rt-pcr法、westernblot法检测姜黄素对兔rpe细胞中egfmrna和蛋白表达的影响,探讨姜黄素抑制egf的作用机制。方法:选取生长状态良好的兔第3代rpe细胞在盖玻片上制备成细胞爬片进行实验。分为空白对照组（含0.5‰dmso的10%fbs.dmem）和10、15、20ug/ml姜黄素4组;每组各设6个复孔,共接种3块培养板,加药后24、48、72h时随机抽取1块培养板行免疫组织化学染色,观察rpe细胞内egf的表达情况。rt-pcr、westernblot分别检测空白对照组（含0.5‰dmso的10%fbs.dmem）、姜黄素（15ug/ml）、egf（9ng/ml含0.5‰dmso）、egf（9ng/ml）+姜黄素（15ug/ml）作用24、48、72h后rpe细胞中egfmrna和蛋白表达的影响。结果:1不同浓度姜黄素对rpe内egf表达的抑制作用:时间依赖性:姜黄素各浓度组对rpe细胞内egf表达的抑制作用均随作用时间的延长而增强,各时间点之间差异均有统计学意义（p<0.05）,姜黄素对rpe细胞内egf表达的抑制作用具有时间依赖性。剂量依赖性:姜黄素各时间点对rpe细胞内egf表达的抑制均随药物质量浓度的增高而增强,除姜黄素15ug/ml和20ug/ml组之间差异无统计学意义（p>0.05）外,其余各质量浓度之间差异均有统计学意义（p<0.05）。2姜黄素对rpe细胞内egfmrna转录的影响:向培养液中加入姜黄素使其浓度为15ug/ml,在24h、48h、及72h检测egf的mrna含量,可见随时间延长细胞内egf的mrna表达量下降,和对照组相比较,差异有统计学意义（p<0.05）;不同时间点间做比较,相邻时间点组间相比差异均有统计学意义（p<0.05）。姜黄素对egf作用下rpe细胞中egfmrna表达量在各时间点和对照组比较差异有统计学意义（p<0.05）,不同时间点间,相邻的时间组相比较差异均有统计学意义（p<0.05）。3姜黄素对rpe细胞内egf蛋白表达的影响:向培养液中加入姜黄素使其浓度为15ug/ml,作用24h、48h、及72h,随着时间的延长细胞内egf蛋白表达量逐渐下降,与对照组相比较差异有统计学意义（p<0.05）;不同时间点间,相邻的时间组间相比较差异均有统计学意义（p<0.05）。姜黄素对egf作用下rpe细胞中egf蛋白表达量在各时间点和对照组比较差异有统计学意义（p<0.05）,不同时间点间,相邻的时间组相比差异均有统计学意义（p<0.05）。结论:姜黄素在体外抑制兔rpe细胞内egf的表达,最佳抑制浓度是15ug/ml,姜黄素在体外可显着抑制兔rpe细胞内egfmrna和蛋白的表达。第三部分姜黄素在兔眼增殖性玻璃体视网膜病变中对egf作用的实验研究目的:研究姜黄素在体内兔眼增殖性玻璃体视网膜病变形成过程中对egf的作用及对pvr的防治作用。方法:选择正常青紫蓝兔30只,所有兔在玻璃体注射前均抽出0.2ml玻璃体,随机选取一眼纳入对照组:共30眼,玻璃体腔注射0.1ml（2×106）培养的生长状态良好的第三代同种rpe细胞和含0.5‰dmso的生理盐水0.1ml;另一眼纳入实验组:共30眼,玻璃体腔注射0.1ml（2×106）培养的生长状态良好的同种第三代rpe细胞和质量浓度为1mg/ml的姜黄素0.1ml。注射后3、7、14、21、28天进行裂隙灯显微镜检查观察眼前节和前部玻璃体情况,间接眼底镜检查观察眼底情况,眼底彩色照相,眼部b超检查观察玻璃体浑浊情况和视网膜有无脱离及脱离的程度,检查完毕后,在每个时间点随机抽取6只兔,12只眼,对照组6只眼,实验组6只眼,分别抽取玻璃体,采用兔表皮生长因子elisa试剂盒检测玻璃体液中egf的含量。结果:1前房反应:玻璃体腔注射后第3天对照组和实验组兔眼前房内均可见少量浮游物,第7天时均消退。2玻璃体和视网膜情况:第3天两组玻璃体均有浑浊,实验组玻璃体混浊轻,第7天时玻璃体内有增殖膜形成,对照组增殖膜多且厚,实验组增殖膜局限且薄;第14天时对照组视网膜脱离发生率（11/18）61%,实验组玻璃体内增殖膜较薄,视网膜脱离发生率（2/18）11%;第21天时对照组视网膜脱离发生率（8/12）67%,增殖膜上可见新生血管,实验组视网膜脱离发生率（2/12）16%,视网膜脱离范围小,第28天对照组视网膜脱离渐加重,并有新生血管生长,视网膜脱离发生率（5/6）83%,实验组视网膜脱离局限,发生率（1/6）16%;视网膜脱离发生率实验组和对照组比较差异显着,有统计学意义（p<0.05）。3玻璃体中egf含量测定（elisa结果）:玻璃体液中egf含量对照组较高,实验组较少,各时间点实验组和对照组比较差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论:玻璃体腔内注射姜黄素可以有效抑制RPE细胞诱导的兔眼实验性PVR形成过程中表皮生长因子的水平,进而抑制PVR的发生和发展。
徐洋,周荣奎,崔海滨,韩昉昉,王东霞[10]（2015）在《曲安奈德预防术后增殖性玻璃体视网膜病变患者的临床分析》文中进行了进一步梳理目的探讨曲安奈德预防术后增殖性玻璃体视网膜病变的临床效果。方法选取2013年6月2014年6月视网膜脱离患者60例（均为单眼患病）,按随机数字表法将其分成实验组30例和对照组30例,两组病例均行玻璃体切除术。实验组患者术中预防性应用曲安奈德,对照组患者不应用曲安奈德,比较两组增殖性玻璃体视网膜病变发生情况。结果实验组增殖性玻璃体视网膜病变发生率为10.0%,术后视网膜脱离复发率为6.7%,术后2mo眼压≥21 mm Hg例数为9例（占30.0%）,与对照组相比差异有统计学意义（P<0.05）。结论曲安奈德可有效预防术后增殖性玻璃体视网膜病变,值得在玻璃体切除术患者中进一步应用推广。
二、增殖性玻璃体视网膜病变实验和临床研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、增殖性玻璃体视网膜病变实验和临床研究（论文提纲范文）
（1）增殖性糖尿病视网膜病变中玻璃体黄斑界面疾病的患病率（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 前言 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 本研究的目的、意义和课题来源 |
| 第二章 方法 |
| 2.1 研究设计 |
| 2.2 研究对象 |
| 2.3 研究方法 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 一般情况 |
| 3.2 OCT判读结果的一致性 |
| 3.3 PDR中VMID的患病率 |
| 3.4 PDR合并VMID的影响因素分析 |
| 3.5 PDR中伴和不伴有VMID的视网膜内形态和视力比较 |
| 3.6 MH中伴和不伴有LHEP的比较 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 ERM在PDR中的患病情况 |
| 4.2 VMT在PDR中的患病情况 |
| 4.3 MH在PDR中的患病情况 |
| 4.4 LHEP在PDR中的患病情况 |
| 4.5 VMID对PDR视网膜内形态结构的影响 |
| 4.6 研究PDR中玻璃体黄斑界面的意义 |
| 第五章 结论 |
| 第六章 创新性和局限性 |
| 6.1 创新性 |
| 6.2 局限性 |
| 参考文献 |
| 附录 符号表(缩略语) |
| 综述 增殖性糖尿病视网膜病变中玻璃体黄斑界面的改变及手术治疗的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（2）姜黄素、白花丹醌、藏红花酸对增殖性玻璃体视网膜病变抗增殖的效果比较及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 第一部分 姜黄素、白花丹醌、藏红花酸对FGF-2 诱导的体外人视网膜色素上皮细胞增殖抑制的实验研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 白花丹醌对FGF-2 诱导的体外人视网膜色素上皮细胞增殖、迁移和侵袭抑制的实验研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 白花丹醌防治兔眼增殖性玻璃体视网膜病变的在体实验研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 综述 增殖性玻璃体视网膜病变的治疗进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（3）影响增殖性糖尿病视网膜病变玻切术后视力恢复的相关因素研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英汉缩略词对照表 |
| 前言 |
| 资料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 糖尿病性视网膜病变治疗进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（4）PI3Kδ在PVR中的作用机制及视网膜病变治疗新途径研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩写表 |
| 1 绪论 |
| 1.1 PVR和 PDR简介 |
| 1.1.1 增殖性玻璃体视网膜病变(PVR) |
| 1.1.2 增殖性糖尿病型视网膜病变(PDR) |
| 1.1.3 PVR和 PDR临床治疗策略 |
| 1.2 CRISPR-Cas9 基因编辑技术 |
| 1.2.1 CRISPR-Cas9 作用原理 |
| 1.2.2 CRISPR-Cas9 在基因治疗中的应用 |
| 1.3 上皮间充质转化(EMT) |
| 1.3.1 EMT发生过程 |
| 1.3.2 EMT调控网络 |
| 1.3.3 EMT在眼科疾病中的信号调控 |
| 1.4 Capilliposide B和 Chalcomoracin天然化合物简介 |
| 1.5 本文的研究内容与意义 |
| 2 磷酸肌醇3 激酶δ在PVR模型中调控视网膜色素上皮细胞增殖迁移的作用机制研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料与方法 |
| 2.2.1 材料和实验试剂 |
| 2.2.2 实验仪器 |
| 2.2.3 细胞培养 |
| 2.2.4 SgRNA设计与目标基因载体克隆 |
| 2.2.5 慢病毒的包装 |
| 2.2.6 p110δ的重新表达 |
| 2.2.7 Western Blotting |
| 2.2.8 免疫荧光 |
| 2.2.9 MTT法 |
| 2.2.10 细胞增殖试验 |
| 2.2.11 细胞迁移试验 |
| 2.2.12 胶原收缩试验 |
| 2.2.13 统计分析 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 PI3Kδ在 RPE中高度表达 |
| 2.3.2 CRIS PR/Cas9 建立p110δ敲减细胞系 |
| 2.3.3 P110δ敲减可减轻玻璃体诱导的AKT和 MDM2 的激活以及p53 的抑制 |
| 2.3.4 P110δ的再表达恢复了玻璃体诱导的AKT和 MDM2 的激活和p53 的减少 |
| 2.3.5 PI3Kδ的化学抑制有效地阻止了玻璃体诱导的Akt和 Mdm2 的激活和 p53 的减少 |
| 2.3.6 PI3Kδ失活可防止玻璃体刺激的RPEs增殖 |
| 2.3.7 PI3Kδ的失活阻碍了玻璃体诱导的RPEs的迁移 |
| 2.3.8 PI3Kδ失活可消除玻璃体引起的RPE收缩 |
| 2.4 小结与讨论 |
| 3 基于CRISPR-Cas9基因编辑技术研究PI3Kδ信号转导环在PVR疾病中的关键作用 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料与方法 |
| 3.2.1 材料和实验试剂 |
| 3.2.2 实验仪器 |
| 3.2.3 细胞培养 |
| 3.2.4 DNA的构建 |
| 3.2.5 慢病毒包装 |
| 3.2.6 Western blotting |
| 3.2.7 免疫荧光检测 |
| 3.2.8 细胞迁移实验 |
| 3.2.9 荧光素酶测定-PI3Kδ报告基因 |
| 3.2.10 实验性PVR模型建立 |
| 3.2.11 统计分析 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 PI3Kδ失活阻止TGF-β2 诱导的Akt激活和 Mdm2和NF-κB/p65 的蛋白表达 |
| 3.3.2 PI3Kδ失活可防止TGF-β2诱导的EMT |
| 3.3.3 阻断Mdm2 可抑制TGF-β2 诱导的Akt激活,p110δ和NF-κB/p65 的表达和细胞EMT |
| 3.3.4 NF-κB/p65 的消耗减弱了TGF-β2 诱导的Akt激活,p110δ和 Mdm2 的表达以及抑制EMT |
| 3.3.5 PI3Kδ的失活阻止了TGF-β2 诱导的ARPE-19 细胞迁移 |
| 3.3.6 抑制PI3Kδ可防止实验性PVR |
| 3.4 小结与讨论 |
| 4 Chalcomoracin在预防治疗PVR疾病中的作用 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料与方法 |
| 4.2.1 材料与实验试剂 |
| 4.2.2 实验仪器 |
| 4.2.3 细胞培养 |
| 4.2.4 Western blotting |
| 4.2.5 细胞活力测定 |
| 4.2.6 形态学观察 |
| 4.2.7 细胞增殖测定 |
| 4.2.8 细胞迁移测定 |
| 4.2.9 胶原蛋白收缩测定 |
| 4.2.10 统计分析 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 玻璃体诱导ARPE-19 细胞中AKT的活化并抑制p53 的表达 |
| 4.3.2 CMR可阻止玻璃体诱导的AKT激活和p53 的降低 |
| 4.3.3 CMR预防玻璃体引起的ARPE-19 增殖 |
| 4.3.4 CMR阻断玻璃体诱导的ARPE-19 迁移 |
| 4.3.5 CMR阻滞玻璃体引起的ARPE-19 收缩 |
| 4.4 小结与讨论 |
| 5 Capilliposide B在预防治疗PDR疾病中的作用 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验材料与方法 |
| 5.2.1 材料与实验试剂 |
| 5.2.2 实验仪器 |
| 5.2.3 细胞培养 |
| 5.2.4 免疫荧光 |
| 5.2.5 Western blot |
| 5.2.6 细胞活力测定 |
| 5.2.7 形态学观察 |
| 5.2.8 细胞迁移测定 |
| 5.2.9 Tube formation实验 |
| 5.2.10 统计分析 |
| 5.3 实验结果 |
| 5.3.1 CPS-B阻止VEGF诱导的VEGFR2 信号转导 |
| 5.3.2 CPS-B可阻止VEGF诱导的HREC增殖 |
| 5.3.3 CPS-B阻断VEGF诱导的HREC迁移 |
| 5.3.4 CPS-B阻断VEGF诱导的HRECs管形成 |
| 5.4 小结与讨论 |
| 6 全文总结 |
| 6.1 总结 |
| 6.2 创新点 |
| 6.3 不足之处与展望 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（5）散血明目片对兔PVR中MAPK及PI3K/Akt信号通路的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 引言 |
| 第一部分 材料与方法 |
| 1.实验材料 |
| 2.实验方法 |
| 3.指标检测 |
| 4.统计学处理 |
| 第二部分 结果及分析 |
| 1.观察各组兔眼前节、玻璃体及眼底情况 |
| 2.光镜下观察各组视网膜情况 |
| 3.免疫组化法检测视网膜增殖膜组织PI3K、Akt、MEK、P38MAPK表达情况 |
| 4.Western blot 法检测视网膜增殖膜组织中 PI3K、Akt、MEK、P38MAPK 蛋白的相对表达量 |
| 5.Western blot 检测各组增殖膜中 PI3K、AKT、MEK、P38MAPK蛋白表达图谱 |
| 6.qPCR 检测视网膜增殖膜中 PI3K、AKT、MEK、P38MAPK mRNA 的表达 |
| 第三部分 讨论 |
| 1.中医对PVR的认识及其研究 |
| 2.PVR模型的建立 |
| 3.PVR中 MAPK及 PI3K/Akt信号通路的影响 |
| 4.散血明目片防治PVR的可能机制 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间科研奖励、发表论文及着作情况 |
| 致谢 |
（6）Healaflow在孔源性视网膜脱离中的应用研究及其他眼底疾病中的应用探索（论文提纲范文）
| 中文摘要 Abstract 缩略语/符号说明 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 一、Healaflow覆盖视网膜裂孔联合27G微创玻璃体切除术治疗孔源性视网膜脱离 |
| 1.1 对象和方法 |
| 1.1.1 研究对象 |
| 1.1.2 纳入和排除标准及退出标准 |
| 1.1.3 手术材料 |
| 1.1.4体外实验 |
| 1.1.5 手术步骤 |
| 1.1.6 研究指标 |
| 1.1.7 统计学分析 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 Healaflow体外实验结果 |
| 1.2.2 患者一般情况 |
| 1.2.3 术中情况 |
| 1.2.4 术后视网膜解剖复位情况 |
| 1.2.5 术后视功能恢复情况 |
| 1.2.6 术中及术后并发症 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 小结 二、脉络膜上腔填充Healaflow内垫压治疗孔源性视网膜脱离 |
| 2.1 对象和方法 |
| 2.1.1 研究对象 |
| 2.1.2 方法 |
| 2.1.3 术后观察和随访 |
| 2.1.4 统计学分析 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 眼部情况 |
| 2.2.2 术后主要观察指标 |
| 2.2.3 并发症 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 评估Healaflow脉络膜上腔内垫压效应的安全性、有效性和持久性 |
| 2.3.2 在巩膜外垫压基础上改进为脉络膜上腔垫压的优势体现 |
| 2.3.3 评估脉络膜上腔注射Healaflow对术后视功能的影响 |
| 2.3.4 对比分析本研究与传统外路手术成功率 |
| 2.3.5 脉络膜上腔注射Healaflow手术时间和术后眼压变化 |
| 2.3.6 临床应用前景,展望 |
| 2.3.7 脉络膜上腔内垫压术潜在并发症 |
| 2.4 小结 三、Healaflow在眼科其他疾病中的应用 |
| 3.1 Healaflow应用于高度近视黄斑病变 |
| 3.1.1 病例基本情况 |
| 3.1.2 治疗过程及预后 |
| 3.2 Healaflow应用于严重PDR治疗 |
| 3.2.1 病例基本情况 |
| 3.2.2 治疗过程及预后 |
| 3.3 Healaflow应用治疗低眼压 |
| 3.3.1 病例基本情况 |
| 3.3.2 治疗过程及预后 |
| 3.4 病例总结与讨论 |
| 3.4.1 Healaflow应用于高度近视黄斑病变的安全性和有效性 |
| 3.4.2 Healaflow应用于严重增值性糖尿病视网膜病变的安全性和有效性 |
| 3.4.3 Healaflow应用于低眼压综合征的安全性和有效性 |
| 小结 全文结论 论文创新点 参考文献 发表论文和参加科研情况说明 综述 微创玻璃体切除术临床应用进展 |
| 综述参考文献 致谢 个人简历 |
（7）增殖性玻璃体视网膜病变发病机制及研究进展（论文提纲范文）
| 1 增殖性玻璃体视网膜病变的细胞学研究 |
| 1.1 视网膜色素上皮细胞 |
| 1.2 成纤维母细胞 |
| 1.3 巨噬细胞 |
| 2 增殖性玻璃体视网膜病变的细胞因子研究 |
| 2.1 碱性成纤维细胞生长因子 |
| 2.2 血小板源性生长因子 |
| 2.3 转化生长因子 |
| 2.4 胰岛素样生长因子 |
| 3 增殖性玻璃体视网膜病变的蛋白组学方面研究 |
| 3.1 增殖细胞核抗原 |
| 3.2 Bcl-2蛋白 |
| 4 增殖性玻璃体视网膜病变的病理分期 |
| 4.1 牵引期 |
| 4.2 混合期 |
| 4.3 增殖期 |
| 5 增殖性玻璃体视网膜病变的相关治疗方式研究进展 |
（8）三七防治兔外伤性增殖性玻璃体视网膜病变的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 中英文缩写词对照表 |
| 引言 |
| 第一部分 |
| 1.外伤性PVR动物模型的建立 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.1.1 实验动物 |
| 1.1.2 主要实验药品及试剂 |
| 1.1.3 主要试剂配制方法 |
| 1.1.4 主要实验仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 动物分组 |
| 1.2.2 富含血小板的血浆(PRP)制备 |
| 1.2.3 造模方法 |
| 1.2.4 观察指标及方法 |
| 1.3 统计学处理 |
| 1.4 实验结果与分析 |
| 1.4.1 一般情况 |
| 1.4.2 眼底观察情况 |
| 1.4.3 兔眼球常规组织病理学检测结果 |
| 1.4.4 兔眼底增殖膜截面积检测结果 |
| 第二部分 |
| 2.三七对外伤性PVR兔视网膜中TGF-β及HGF表达的影响 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 主要实验药品及相关试剂 |
| 2.1.3 主要试剂配制方法 |
| 2.1.4 主要实验仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 动物分组方法 |
| 2.2.2 富含血小板的血浆制备方法 |
| 2.2.3 兔外伤性PVR模型制作 |
| 2.2.4 给药方式 |
| 2.2.5 标本的采集 |
| 2.2.6 观察指标及方法 |
| 2.2.6.1 眼底观察 |
| 2.2.6.2 兔视网膜常规组织病理学观察 |
| 2.2.6.3 兔视网膜中转化生长因子(TGF-β)表达的观察检测 |
| 2.2.6.4 兔视网膜中肝细胞生长因子(HGF)表达的观察检测 |
| 2.3 统计方法 |
| 2.4 实验结果与分析 |
| 2.4.1 一般情况 |
| 2.4.2 眼底观察情况 |
| 2.4.3 兔眼视网膜常规组织病理学检测结果 |
| 2.4.4 兔眼底增殖膜截面积检测结果 |
| 2.4.5 TGF-β的观察测定结果 |
| 2.4.6 HGF的观察测定结果 |
| 3.讨论 |
| 3.1 PVR模型建立方法的研究 |
| 3.1.1 玻璃体腔内注入细胞成分诱发PVR的动物模型 |
| 3.1.2 外伤制成的PVR模型 |
| 3.1.3 眼内植入铁质异物建立外伤性PVR动物模型 |
| 3.1.4 利用眼外伤联合玻璃体腔内注入血液成分建立PVR动物模型 |
| 3.2 阳性药物对照组的选择 |
| 3.3 阳性指标的选择 |
| 3.4 PVR的发病机制研究 |
| 3.4.1 PVR相关细胞学研究 |
| 3.4.2 PVR相关细胞因子研究 |
| 3.4.3 PVR与细胞外基质(ECM) |
| 3.4.4 PVR与基质金属蛋白酶(MMPs)的研究 |
| 3.4.5 PVR的蛋白组学研究 |
| 3.5 中医学对PVR及其治疗的认识 |
| 3.6 三七的药理作用研究及实验用药选择依据 |
| 3.6.1 止血作用 |
| 3.6.2 活血化瘀作用 |
| 3.6.3 抗炎作用 |
| 3.6.4 抗纤维化作用 |
| 3.7 三七对兔外伤性PVR的防治作用及机理 |
| 3.7.1 减轻外伤性PVR兔眼底增生情况 |
| 3.7.2 抑制外伤性PVR兔眼底增殖膜的形成 |
| 3.7.3 抑制外伤性PVR兔视网膜中TGF-β的表达水平 |
| 3.7.4 抑制外伤性PVR兔视网膜中HGF的表达水平 |
| 结论 |
| 问题与展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 在读期间公开发表的学术论文、专着及科研成果 |
（9）姜黄素在增殖性玻璃体视网膜病变中对表皮生长因子的作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 第一部分 表皮生长因子对体外培养的RPE细胞的作用及其在RPE细胞内的表达 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 姜黄素对体外培养的RPE细胞中EGF表达的抑制作用 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 姜黄素在防治兔眼增殖性玻璃体视网膜病变中对EGF作用的实验研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 增殖性玻璃体视网膜病变的治疗进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（10）曲安奈德预防术后增殖性玻璃体视网膜病变患者的临床分析（论文提纲范文）
| 1资料与方法 |
| 1.1一般资料 |
| 1.2方法 |
| 1.3疗效评定[2] |
| 1.4统计学处理 |
| 2结果 |
| 2.1两组患者视力分布情况统计 |
| 2.2两组术后2mo眼压≥21mmHg例数、增殖性玻璃体视网膜病变、视网膜脱离复发率比较 |
| 3讨论 |
四、增殖性玻璃体视网膜病变实验和临床研究（论文参考文献）
- [1]增殖性糖尿病视网膜病变中玻璃体黄斑界面疾病的患病率[D]. 林艾迪. 汕头大学, 2021(02)
- [2]姜黄素、白花丹醌、藏红花酸对增殖性玻璃体视网膜病变抗增殖的效果比较及机制研究[D]. 张阳. 河北医科大学, 2021(02)
- [3]影响增殖性糖尿病视网膜病变玻切术后视力恢复的相关因素研究[D]. 张宇婷. 大连医科大学, 2020(03)
- [4]PI3Kδ在PVR中的作用机制及视网膜病变治疗新途径研究[D]. 韩昊特. 浙江大学, 2021(01)
- [5]散血明目片对兔PVR中MAPK及PI3K/Akt信号通路的影响[D]. 刘晓清. 湖南中医药大学, 2019(02)
- [6]Healaflow在孔源性视网膜脱离中的应用研究及其他眼底疾病中的应用探索[D]. 任新军. 天津医科大学, 2019(02)
- [7]增殖性玻璃体视网膜病变发病机制及研究进展[J]. 李宇博,苏颖. 中国现代医生, 2018(11)
- [8]三七防治兔外伤性增殖性玻璃体视网膜病变的实验研究[D]. 余丰. 成都中医药大学, 2018(02)
- [9]姜黄素在增殖性玻璃体视网膜病变中对表皮生长因子的作用[D]. 任彦新. 河北医科大学, 2016(08)
- [10]曲安奈德预防术后增殖性玻璃体视网膜病变患者的临床分析[J]. 徐洋,周荣奎,崔海滨,韩昉昉,王东霞. 中国现代医生, 2015(09)