牛磺酸对培养心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用

一、牛磺酸对培养的心肌细胞缺氧再给氧损伤的保护作用（论文文献综述）

杨晓旭^[1]（2018）在《制备牛磺酸镁的改进方法及牛磺酸镁对大鼠心室肌细胞钠离子通道影响的研究》文中研究指明目的:改进牛磺酸镁的制备方法,从所尝试的各方法中选出最佳者。利用该方法所制备的牛磺酸镁开展大鼠心室肌细胞钠离子通道影响的实验,探究牛磺酸镁在抗心律失常中的作用机制,以及牛磺酸镁可否“致心律失常”。方法:通过文献方法实验、镁氧化物酸性环境反应法、硫酸镁合成法和镁甲醇合成法,开展合成牛磺酸镁的系列实验。实验结果表明镁甲醇合成法为合成牛磺酸镁的最佳方法。即以甲醇镁和牛磺酸为原料,100oC下搅拌加热回流1.5小时,所得产物采用加入甲醇、8 oC冷藏静置48 h等促结晶技术,获得二水合牛磺酸镁晶体。采取逆行主动脉灌注酶溶液消化法即Langendorff氏法对大鼠的单个心室肌细胞进行急性分离;于电压钳模式下,采取全细胞膜片钳技术,分别记录牛磺酸镁不同浓度下对正常大鼠心室肌细胞和缺氧/复氧大鼠心室肌细胞INa的影响,其主要分为三个浓度为低(100μmol·L-1)、中(200μmol·L-1)以及高(400μmol·L-1)。1.合成方法方面:（1）文献方法重现性实验产物一IR图谱与原料氢氧化镁接近;产物二IR特征峰与牛磺酸红外图谱相近;产物三IR特征峰与牛磺酸红外图谱相近。产物一熔点384℃,无法检测镁含量;产物二熔程311328℃,镁含量3.50%;产物三熔程314329℃,镁含量5.61%。（2）镁氧化物酸性环境反应法产物IR的特征峰牛磺酸图谱相近。产物熔程290297℃,镁含量为1.37%。（3）硫酸镁合成法产物IR图谱与牛磺酸标准红外图谱相近,与MgSO4红外光谱图比较,无相似特征峰。产物熔程292297℃,镁含量2.89%。（4）镁甲醇合成法产物一IR图谱与Mg（OH）2图谱相近。产物二IR图谱与牛磺酸红外图谱相近。产物一熔程297311℃,镁含量4.62%;产物二熔点300℃,镁含量7.78%。2.牛磺酸镁对大鼠心室肌细胞钠离子通道影响的研究TMCC使INa中的I-V曲线发生上移,其内向电流降低,并且在不同的测试电压下,其电流全部减小。曲线尚未发生平行移动,其形状基本未发生变化。TMCC在对正常INa抑制时特征为浓度依赖性抑制,其中于-45 mV除极电压下,分别下降为6.89%,12.84%及17.49%。TMCC对正常钠电流成浓度依赖性抑制,使I-V曲线上移,牛磺酸镁对钠通道具备抑制作用,但其效果较弱。3.牛磺酸镁对大鼠心室肌细胞在缺氧/复氧损伤模型钠离子通道影响的研究结果显示,当大鼠的心室肌细胞处于缺氧或者复氧状态下时,将导致INa峰值下降,而I-V曲线发生上移,TMCC能通过其浓度依赖性将下降的INa恢复正常,进而使I-V曲线下移,并且不发生平行移动,曲线的形状不发生变化,依然处在原来的电流-压依赖关系,这意味着在不同的膜电位水平下,TMCC对INa作用具备一致性。胺碘酮也存在部分这样的作用机制。依据INa动力学研究的结果表明,在缺氧/复氧状态下将导致激活的曲线发生右移,失活曲线发生左移,进而引起激活的速率下降,失活的速率上升,而TMCC(200,400μmol·L-1)以及24.24μmol·L-1的胺碘酮能够将发生左移的失活曲线恢复正常,降低失活的速率,但其对激活状态尚无明显的影响。结论:合成方法1的结果表明,该方法存在着缺陷和不足,仍需开展实验做进一步的探讨。方法2和方法3的结果表明,存在原料反应不充分和产物中存在大量难以分离的杂质成分等问题。方法4的实验结果表明,该方法为最佳方法,反应条件为100℃下搅拌加热,反应时间1.5 h。析出结晶的条件为:甲醇环境中,8℃下静置48小时。选用最优选合成方法所合成的牛磺酸镁(100,200,400μmol·L-1)开展对大鼠心室肌细胞钠离子通道的影响的实验。研究表明,牛磺酸镁对正常钠电流成浓度依赖性抑制,使I-V曲线上移,说明牛磺酸镁具有阻滞钠通道的作用。牛磺酸镁对钠通道的抑制作用较弱,表明牛磺酸镁是一种对钠通道作用温和的化合物。缺氧/复氧能够将INa峰值降低,I-V曲线的上移,表明此模型制备成功。TMCC恢复上述模型中的钠电流减小且I-V曲线下移的作用机制为对钠通道的失活过程所具备的浓度依赖性特征进行抑制,而胺碘酮的作用强度相当于TMCC的低浓度(100μmol·L-1)及中等浓度(200μmol·L-1)之间的作用强度。TMCC既能对正常的心机细胞的INa起到作用,并且能够使得处于病理状态下的细胞INa再次获得离子的平衡点,因此,TMCC不仅能够治疗心律失常,还能够降低伴发心律失常的风险度。

冯幼,许合金,刘定,陈子腾,许进奉,黎相广,张百赟,郭发祥^[2]（2014）在《牛磺酸在水产动物生产中的应用》文中提出牛磺酸作为非营养性饲料添加剂,具有改善饲料适口性、增强食欲、改善免疫机能和提高生产性能等作用。文章就牛磺酸的理化性质及其在水产动物生产中的应用作以简述。

杨艳梅,史红宁^[3]（2009）在《牛磺酸在水产养殖中的研究与应用》文中认为综述了牛磺酸的生理功能和其作为饲料添加剂在水产养殖生产中的研究与应用,并对牛磺酸对水产动物的促生长机理、抗逆功能,及在应用中存在的问题作一探讨。

魏丽娜,刘志新^[4]（2008）在《中药对心肌细胞损伤的保护分析》文中进行了进一步梳理中药的保护作用有多方面,这里主要对缺糖缺氧损伤、对缺氧再给氧损伤和对病毒、化疗药物损伤的保护作用做以简要分析。

唐禾^[5]（2008）在《NaCN中毒对缺氧大鼠心脏损伤作用及干预措施研究》文中研究表明氢氰酸（HCN）和氯化氰（CNCl）是外军重点装备的全身中毒性毒剂,因分子中都含有氰根,故又称之为氰类毒剂。它们的毒性大、吸收迅速、防护困难,是典型的速杀性战剂。除HCN和CNCl外,属于氰类的还有无机的氰化钠、氰化钾等,都是剧毒的化工原料,平时的工农业生产中也可能由于泄露而引起人畜中毒。有机氰和植物中存在的氰类化合物也能对机体产生毒害作用。因此,氰类毒物中毒的防治是军事预防医学的重要任务。氰化物中毒后迅速出现缺氧、窒息、惊厥等中毒症状,来势凶猛、发展迅速,可在数分钟至数十分钟内死于呼吸、循环衰竭。氰化物进入机体后能迅速离解出氰根离子（CN-）,能阻断细胞呼吸和氧化磷酸化,对细胞线粒体呼吸链末端氧化酶产生抑制作用,引起组织中毒性缺氧,进而细胞内生物氧化发生一系列变化,造成“内呼吸”障碍。一般将海拔高度大于3 000m的地区成为高原。低压低氧（习惯上称作高原缺氧）是高原地区的主要环境特征。部分人在这种环境下会出现明显的症状和体征。而超过这个高度时,其生理、生化和解剖等方面的改变就会变得越来越明显[1]。我国是一个高原地区面积广阔的国家,仅青藏高原的面积就达到250万平方公里。高原地区多与他国相邻,边境漫长,有重要的军事战略地位。当高原缺氧复合NaCN中毒时,缺氧和NaCN中毒这“内”、“外”两种缺氧因素同时作用机体,将对机体产生双重缺氧的联合打击。因此,对缺氧复合氰化物（NaCN）中毒的研究对我国的国防保障和未来的战争胜负都会产生极其重要的影响。急性缺氧对机体的血压（SP）、心率（HR）的影响已有相关报道。有多篇文献提出,急性低压缺氧大鼠心室收缩功能指标如左室收缩压（LVSP）,左室压力最大上升速率（+dP/dtmax）等均显着降低。心肌细胞缺氧不仅是严重创伤后心功能衰竭的重要原因,也是启动和诱发其它脏器损伤形成多脏器功能不全/衰竭的重要始动因素[2]。有研究发现,在高原缺氧条件下化学战剂毒性增强,对心功能损害效应加重,引起心率失常、心肌收缩力减弱等心脏功能异常变化[3]。目前,国内外对缺氧复合NaCN中毒所产生的联合效应对大鼠心脏结构和功能影响研究甚少,对药物预防救治效果亦未见有关评价方面的报道。心脏是对缺氧极为敏感的器官。有研究表明,单纯缺氧和单纯NaCN中毒均可明显导致心肌细胞凋亡（Apoptosis）,缺氧导致细胞死亡的主要方式是通过诱导细胞凋亡而产生的。在采用大鼠离体心肌细胞培养后、给予缺氧/复氧处理的实验研究中,发现了心肌细胞在持续较长时间的缺氧而再复氧时,细胞损伤现象严重,与曾经研究过的在体动物心肌细胞缺血/再灌注损伤情况一致。在缺氧/复氧损伤组中,流式细胞仪PI染色法的DNA分析直方图上,低于G1期的细胞数增多,明显高于其他各组,说明凋亡的细胞存在较多。透射电镜可见缺氧/复氧损伤组心肌细胞损伤严重,可有明显的凋亡前期、凋亡阶段或凋亡后期的改变,同时心肌细胞凋亡数目也明显增加,支持复氧（再灌注）损伤是心肌细胞凋亡的重要诱发因素。认为缺氧/复氧可加重心肌细胞损伤,伴着心肌细胞凋亡的增加;细胞内钙离子过多可能是触发心肌细胞凋亡的因素;超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）可减少自由基的生成、降低心肌细胞凋亡的发生和缺氧预处理具有抗心肌细胞损伤和减轻心肌细胞凋亡的作用,均有可能是通过降低细胞内钙离子浓度而起作用的[4-6]。Fliss[7]等在在体动物模型研究中也发现了细胞凋亡是心肌再灌注损伤的特征之一,再灌注损伤可加速不可逆转的细胞凋亡。Musat-Marcu等[8]在体外灌注大鼠心脏发现其早期即可发生心肌细胞凋亡,且在抑制凋亡后伴随着心功能的恢复,提示心肌细胞凋亡参与了心功能的衰减。细胞色素C（Cytochrome C, Cyt C）及细胞凋亡诱导因子（apoptosis-inducing factor, AIF）正常时分别位于线粒体内膜和线粒体膜间隙。缺血/再灌注（MI/R）时,PT孔受损而开放,Cyt C及AIF被释放入胞浆。Cyt C与胞浆中的凋亡激活因子-1（apoptosis- activating factor-1, Apaf-1）结合,依次激活半胱酸蛋白酶家族中的Caspase-9、Caspase-3而启动凋亡通路,活化的Caspase-3可以作用于胞质中的细胞骨架蛋白,或作用于细胞核中的DNA,引发细胞凋亡,这是线粒体caspase依赖性凋亡途径。而AIF经PT孔被释放入胞浆,其将易位入核,激活内源性核酸内切酶将染色体切割为180-200bp整数倍的DNA片断,同时加速Cyt C的释放,进一步促进细胞凋亡,这是线粒体caspase非依赖性凋亡途径。可见,线粒体caspase依赖性和caspase非依赖性这两条凋亡途径在心肌细胞凋亡中发挥重要作用。缺氧预适应（ hypoxic preconditioning, HPC）,并可将其界定为“预先短时间非致死性重复缺血/缺氧后,机体组织细胞获得对随后长时间致死性缺血/缺氧损伤的高度耐受性”。缺氧预处理对心肌细胞可以产生预适应现象,缺氧预适应迄今为止被认为是最强有力的一种心肌内源性保护措施[9,10]。人参皂苷（saponins of panax ginseng, SPG）能对抗氧自由基对心脏的损伤,保持心肌细胞膜的完整性,改善急性心肌缺血时心肌舒张功能,还能对抗心肌缺血所致心肌不可逆坏死,使SOD活性升高,心肌释放磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（phosphoenolpy- ruvate carboxykinase, PCK）减少。人参总皂苷（total saponins of Panax Ginseng, TSPG）对缺血再灌注损伤中的细胞坏死和细胞凋亡均有显着的保护作用[11-14]。人参皂苷尤其是Re可能具有阻滞K+通道的作用,可使离体豚鼠乳头状肌细胞动作电位时程和有效不应期均延长,人参皂苷抗心律失常的作用[15]。人参皂苷抗心肌缺血等作用研究表明,人参皂苷能对抗氧自由基对心脏的损伤,保持心肌细胞膜的完整性,改善急性心肌缺血时心肌舒张功能,还能对抗心肌缺血所致心肌不可逆坏死,使SOD活性升高,心肌释放PCK减少。侯明晓等利用体外培养的心肌细胞缺血再灌注损伤的模型的结果表明:TSPG对缺血再灌注损伤中的细胞坏死和细胞凋亡均有显着的保护作用[16]。Scott等研究发现,人参皂苷Rb1可抑制心肌细胞的收缩,有助于减少心肌的耗氧量[17]。自由基亦可损伤血管内皮细胞,引起动脉粥样硬化、高血压等心脑血管疾病。有实验表明,人参皂苷可降低过氧化物丙二醛的含量,从而减轻血管内皮细胞损伤。而牛磺酸（Taurine, Tau）能清除氧自由基、保护细胞膜、使心肌酶和肝酶释放减少、具有极强抗氧化能力。它也能调节细胞内钙的稳态,减少肢体缺血再灌注时钙离子内流,而且中性粒细胞呼吸爆发产生大量过氧化氢（hydrogen peroxide, H2O2）,与CL结合产生难以清除的强氧化剂-次氯酸,牛磺酸可与次氯酸结合,形成稳定的弱氧化剂-氯胺牛磺酸,从而除次氯酸对细胞的破坏作用。因此显示牛磺酸可纠正肢体缺血再灌注后远隔器官损伤[18]。长疗程应用牛磺酸在降低血压和逆转心肌肥厚的同时,也使高血压大鼠心肌细胞凋亡减少,并能降低大鼠心肌AngⅡ含量和ACE活性。因此,我们认为,长疗程牛磺酸治疗可抑制高血压大鼠心肌细胞凋亡和逆转心肌肥厚,上述作用可能与药物拮抗组织局部AngⅡ的生成有关。牛磺酸还具有抑制心肌细胞凋亡的作用,可能与其调控凋亡相关基因Fas、Bax和Bcl-2的蛋白表达有关。牛磺酸可以有效保护心肌细胞而避免发生心脏畸形,同时有降低血压[19,20]。血液供应和血氧含量是心脏功能正常的先决条件,因此,任何引起血液中氧含量降低或心肌供血不足的有害因素都可能导致心脏功能异常。那么,缺氧环境氰化物中毒对心脏功能将会产生何种影响?由此带来的心脏损伤其机制如何?线粒体caspase依赖性和caspase非依赖性这两条凋亡途径在缺氧环境氰化物中毒诱导大鼠心肌细胞凋亡中有何种作用?缺氧预适应、人参皂苷和牛磺酸等干预措施对大鼠缺氧环境氰化物中毒有无效果?这些问题迄今未见研究报道。本课题基于上述两种情况,在前期工作的基础上,采用实验动物研究和体外细胞培养研究相结合的方法,建立缺氧复合NaCN中毒的动物模型和NaCN染毒的细胞模型,通过观察模拟高原环境缺氧复合NaCN中毒对大鼠心脏的影响、检测SPG等干预措施对缺氧复合NaCN中毒大鼠心脏保护作用、观测心肌细胞NaCN染毒后细胞凋亡情况,以及定量分析上述情况下线粒体caspase依赖性和caspase非依赖性这两条凋亡途径中Cyt C、caspase-3和AIF等因子的表达,来探讨模拟缺氧条件下NaCN中毒后心功能改变的特点和心肌细胞凋亡的特性,为今后缺氧性NaCN中毒的预防救治措施的研究提供重要的理论基4础。最终为制定缺氧条件下复合NaCN中毒的预防和救治方案提供实验和理论依据。方法:1.检测有无干预措施情况下缺氧复合NaCN中毒后对大鼠心脏结构和功能影响,包括血流动力学、心电图、心肌酶谱、心肌病理切片光镜电镜观测等;2.建立体外SD乳鼠心肌细胞NaCN染毒模型,检测急性NaCN染毒后心肌细胞是否存在凋亡情况;3.定量分析有无干预措施情况下心肌细胞缺氧复合NaCN中毒后Cyt C、caspase-3和AIF表达,分析线粒体caspase依赖性和caspase非依赖性这两条凋亡途径在缺氧复合NaCN中毒引起心肌细胞凋亡中的特点;结果:一、人参皂苷等干预措施对缺氧和NaCN中毒大鼠心脏的保护作用1.平原实验组大鼠NaCN中毒后,血流动力学发生改变:HR、mLVSP、+dP/dtmax等指标均较中毒前出现显着下降（P<0.01）,T波振幅则出现显着上升（P<0.01）,30min后逐渐向正常值恢复。2.高原实验组大鼠NaCN中毒后,血流动力学改变比平原实验组更为明显:HR、mLVSP、+dP/dtmax等指标均较中毒前出现显着下降（P<0.01）,T波振幅则出现显着上升（P<0.01）,40min后逐渐向正常值恢复,但恢复程度和效果较平原实验组差。3.平原实验组大鼠NaCN中毒后,Cyt C活性显着降低（P<0.01）。中毒2h后,Cyt C活性有明显的恢复（P<0.01）。4.高原实验组大鼠在NaCN中毒后,Cyt C的活性显着低于平原实验组（P<0.01）;中毒2h后也有一定程度恢复,但与平原实验组比较恢复更慢（P<0.01）。5.平原和高原实验组大鼠NaCN中毒后均出现明显的心肌酶谱（AST、LDH、CK、CK-MB）变化,高原实验组大鼠的心肌酶谱改变比平原实验组大鼠更显着（P<0.01）,并且恢复缓慢。其中,LDH变化最为显着。6.平原实验组大鼠中毒后心肌组织损伤逐渐加重,至2h后最为严重,间质有腔隙形成,出现纤维退变,横纹不清,弥漫性充血、水肿变性,少数心肌有断裂,横纹消失;中毒6h时有明显的恢复。7.高原实验组大鼠心肌组织中毒前即见充血、水肿变性、局灶性炎症细胞等变化。NaCN中毒后心肌损伤加重,出现严重水肿变性,弥漫性细胞肿胀,胞质模糊,并有水肿囊出现,细胞变性,间质血管充血。中毒6h时,高原实验组大鼠心肌组织损伤并无明显的恢复。8.平原实验组大鼠中毒2h后出现线粒体轻微水肿,灶性溶解,内质网扩张,线粒体部分嵴和膜融合或消失等现象。9.高原对照组大鼠超微结构也出现轻微损伤,心肌间质有轻微水肿,线粒体略有肿胀;高原NaCN中毒组大鼠线粒体则肿胀明显,有小量的嵴和膜融合或消失,心肌间质水肿,肌节排列稍紊乱,核旁水肿处线粒体大部分嵴和膜融合或消失,粗面内质网有脱颗粒现象;损伤程度明显重于平原实验组大鼠。10. HPC和SPG、Tau灌胃干预后,对NaCN中毒和高原缺氧复合NaCN中毒引起的大鼠血流动力学改变有明显的干预作用,HR、mLVSP、+dP/dtmax、T波振幅等指标均较未干预组变化程度小,恢复效果更明显,且有统计学意义。11. HPC干预后的大鼠NaCN中毒后Cyt C活性也出现显着降低（P<0.01）,至2h时有所恢复,效果好于高原缺氧复合NaCN中毒大鼠（P<0.05）。二、NaCN对SD乳鼠原代心肌细胞的凋亡作用1.建立了NaCN染毒SD乳鼠心肌细胞模型;2.测定出SD乳鼠心肌细胞NaCN染毒的IC50值:正常条件下IC50值为87.85μmol·L-1。3.以IC50剂量的NaCN染毒后,SD乳鼠心肌细胞出现凋亡。凋亡细胞的细胞核由于染色质浓集而呈现亮蓝色,呈分叶、碎片状等。三、caspase依赖/非依赖性途径在大鼠心脏损伤中的作用研究1.大鼠缺氧复合/或NaCN中毒30min后,心肌组织胞浆Cyt C、caspase-3蛋白表达和mRNA表达均上调;2.大鼠缺氧复合/或NaCN中毒30min后,心肌组织胞浆AIF蛋白表达上调,而AIF mRNA表达对NaCN染毒诱导却并不敏感;3. Tau、SPG干预对抑制大鼠缺氧复合/或NaCN中毒30min后心肌组织胞浆Cyt C、caspase-3和AIF蛋白表达以及Cyt C、caspase-3 mRNA表达上调有明显作用,对AIF mRNA表达无明显作用。结论:1.缺氧复合NaCN中毒大鼠血流动力学HR、mLVSP、+dP/dtmax等指标均显着下降,T波振幅显着增高。相对于单纯的缺氧和单纯的NaCN中毒,两种因素同时作用所引起的心脏功能损伤,特别是心脏的收缩能力的损伤更加明显;2.缺氧复合NaCN中毒大鼠的血液生化指标,如心肌酶谱（AST、LDH、CK、CK-MB）的变化也更为明显,Cyt C活性下降也更为显着。表明两种因素作用下大鼠的心脏生化代谢变化很大,加重心脏功能的紊乱;3.病理检测结果表明,缺氧复合NaCN中毒后大鼠心肌组织的结构损伤更为严重,超微结构的病理改变更加明显,特别是NaCN中毒的靶细胞器-线粒体的损伤,这可能是引起心肌细胞凋亡的最主要原因;4. HPC、SPG和Tau等干预措施,对缺氧复合NaCN中毒大鼠心脏功能的恢复和维持Cyt C的活性均有一定的效果。可考虑将HPC、SPG和Tau等列入缺氧复合NaCN中毒防护措施的筛选;5.通过建立的体外SD乳鼠心肌细胞NaCN染毒模型,发现经IC50剂量NaCN染毒SD乳鼠原代心肌细胞凋亡。提示细胞凋亡可能在缺氧复合NaCN中毒心脏损伤中发挥作用;6.大鼠缺氧复合/或NaCN中毒30min后心肌组织胞浆Cyt C、caspase-3蛋白表达和mRNA表达上调,线粒体caspase依赖途径导致的心肌细胞凋亡十分明显,寻找阻止线粒体caspase依赖途径心肌细胞凋亡的措施可能会对缺氧复合NaCN中毒的预防和治疗带来一定的效果;7. Tau、SPG干预,对抑制大鼠缺氧和/或NaCN中毒心肌组织胞浆Cyt C、caspase-3和AIF蛋白表达以及Cyt C、caspase-3 mRNA表达上调有明显作用,提示Tau、SPG可作为预防线粒体途径引起心肌细胞凋亡的筛选措施;8.大鼠NaCN中毒30min后,心肌组织胞浆AIF蛋白表达虽然出现上调,但AIF mRNA表达变化却并不明显;AIF mRNA表达对缺氧的敏感程度强于对NaCN中毒,提示NaCN中毒后线粒体非caspase依赖途径引起心肌细胞凋亡的机制并不同于caspase依赖途径,缺氧、NaCN中毒引起心肌细胞凋亡可能存在不同的机制,值得深入研究。

张晓丹,渠永清,刘琳^[6]（2008）在《牛磺酸对心肌细胞的保护作用研究现状》文中认为

吴艳,万华印^[7]（2006）在《葛根素对培养脑细胞缺氧/再给氧损伤的保护作用》文中研究表明目的研究葛根素对培养脑细胞缺氧/再给氧损伤的保护作用及其可能的机制。方法复制培养脑细胞缺氧/再给氧损伤模型,缺氧60min,再给氧30min。观察葛根素对脑细胞超微结构的影响。以ACAS570进行细胞内游离钙的定性及半定量检测;以荧光染料Fura-2-AM定量测定细胞内游离Ca2+浓度;以荧光偏振法测定细胞膜脂质流动性。结果葛根素能减轻脑细胞线粒体超微结构的损伤;可剂量依赖性地降低[Ca2+]i,提高细胞膜脂质流动性;可明显减少Ca2+伪彩色三维色彩值。结论葛根素对培养脑细胞缺氧/再给氧损伤有明显保护作用,可能与其降低[Ca2+]i和提高细胞膜脂质流动性有关。

郭明^[8]（2005）在《活血益气中药对血管紧张素Ⅱ诱导培养乳鼠心肌细胞凋亡的影响》文中研究指明细胞凋亡是指细胞由基因控制的主动性死亡过程。某些致病因子可以使细胞凋亡的基因调控失常,致使细胞凋亡减弱或增强,从而破坏了机体细胞的自稳态,最终表现为疾病的发生。心肌细胞凋亡是引起心血管系统疾病的重要原因之一。高血压病长期慢性压力超负荷会引起心脏结构和功能的适应性改变（心脏重塑）,心脏结构的改变主要为左室肥厚（LVH）,越来越多的研究显示高血压病 LVH 存在心肌细胞凋亡和相关基因表达异常,且不同类型的 LVH 的不同发展阶段其基因表达和细胞凋亡的方式均有所不同。 近年来,人们在药物对细胞凋亡影响领域一直在进行各种探索,并取得了一定成绩。中药是传统医学重要组成部分,有关其对细胞凋亡的影响引起国内外学者的广泛关注,进行了大量研究工作。中医理论认为,人体内的阴阳平衡是以阴阳依存互根为基础的,高血压左室肥厚的形成是高血压患者机体内阴阳气血不断寻求平衡过程中的适应性反应,表现为心脏的增生性损伤,类似于中医之“积”,也伴随着心肌细胞的凋亡,其病理基础在于血瘀,气虚和肝肾阴虚,尤以血瘀为主。川芎活血行气,散风止痛;丹参活血祛瘀,清热凉血,两者均为临床常用活血药。黄芪补气固表,利尿脱毒,排脓,敛疮生肌,为历代临床常用的益气药。临床上大量证据表明这三种药物对 LVH 有明确的治疗作用,实验研究表明它们对缺血再灌注等原因诱导的心肌细胞凋亡有抑制作用,而关于其对血管紧张素 II（AngⅡ）诱导的体外培养乳鼠心肌细胞凋亡的影响研究较少。中医传统传统理论有“上工治未病”的思想,强调了疾病预防和早期治疗的重要性。高血压左室肥厚是患者血压长时间保持在一个较高水平形成的不良后果,故在治疗上预防尤为重要。 实验选用出生 1-3 天的 Wistar 大鼠进行心肌细胞培养。在其中加入 AngⅡ,提取 DNA 进行琼脂糖凝胶电泳（DNA ladder）,以 AnnexinV-PI 双染流式细胞仪检测细胞凋亡率,建立了 AngⅡ诱导心肌细胞凋亡的模型。在此基础上,选用活血益气中药观察其对 AngⅡ诱导培养乳鼠心肌凋亡的影响。选用药物中,活血药川芎采用其有效成分盐酸川芎嗪（标准品,中国医学科学院药物研究所）,丹参采用静脉注射剂型丹参粉针剂（哈药集团中药二厂）;益气药黄芪采用静脉注射剂型黄芪注射液（黑龙江圣泰制药有限公司）。将三种药物分别与AngⅡ同时、或在 AngⅡ作用 2 日后加入细胞,共同培养 4 日,以 AngⅡ受体 1拮抗剂氯沙坦（Losartan）作为阳性对照药,AnnexinV-PI 双染流式细胞仪检测细胞凋亡率。 结果发现 AngⅡ组电泳可见凋亡特异性的云梯状（ladder）电泳带,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率 AngⅡ组较对照组从（8.98±1.49）%增加至（23.96±4.16）%,有显着性差异（p<0.01）。盐酸川芎嗪早期用药组可将凋亡率恢复至（9.83±2.27）%,晚期用药组恢复至（14.06±1.28）%;丹参粉针剂

郝然^[9]（2004）在《参麦注射液对心肌细胞急性缺血再灌注损伤保护作用及机制的研究》文中指出当冠状动脉发生堵塞后,及时的恢复血流供应对心肌是一种十分有效的保护措施。临床上针对一些急性心肌梗死和冠脉狭窄的病人,已广泛开展药物溶栓法和冠脉成形术等的应用。然而近年发现,再灌注同样会对心脏产生损伤。其不仅可能抵消血流恢复的有益作用,而且还有可能造成更严重的后果。这种现象被称为“缺血再灌注损伤”。 缺血再灌注损伤包括再灌注心率失常、微血管损伤、可逆性的心功能障碍以及由坏死和凋亡导致的细胞死亡。导致再灌注损伤的机制是多方面的,氧化应激、细胞内 Ca2+超载、中性粒细胞活化都参与了心肌结构与功能的改变。 如何解决再灌注造成的损伤,已经成为当前心血管疾病研究领域的热点问题。在寻求安全有效药物的过程中,人们越来越将目光集中到中医中药上。大量基础研究与临床实践证实,采用中药制剂或中药有效成分提取物治疗心肌缺血再灌注损伤,其治疗效果明确,且有效药物种类多、单一药物作用靶点广泛。 参麦注射液是由传统补气养阴方剂生脉散衍变而来,功能益气固托,养阴生津,生脉。药理研究表明,其具有抗休克、抗心率失常、抗炎、强心和调节血压的作用。既往研究发现,参麦注射液能减轻脂质过氧化,改善血流变,促进心功能的恢复,从而保护缺血再灌注心脏。本实验将利用先进的技术手段,进一步观察参麦注射液对急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其可能机制。 实验选用出生 3-4 天的 Wister 大鼠进行心肌细胞培养。通过加入含氧清除剂Na2S2O4 的 D-Hank’s 液造成细胞缺糖、缺氧、缺钙,再换成正常培养液恢复糖、氧、钙的供应,以模拟整体条件下的心肌急性缺血再灌注损伤,建立培养心肌细胞的缺血再灌注损伤模型。治疗组于再灌同时加入参麦注射液。首先经 MTT 法检测不同药物浓度、不同再灌时间下细胞的存活率,以确定用参麦注射液治疗的最佳药物剂量和最佳再灌时间。然后再针对再灌注心肌细胞心率（律）、细胞形态、细胞凋亡百分率以及细胞内 Ca2+浓度等几方面进行观察分析。 结果发现:参麦注射液能显着改善受到缺血再灌注损伤的心肌细胞心率的增快,减少心律失常的发生;从形态学上观察,可有效减轻细胞肿胀变形、胞膜破裂、胞浆空泡化、及 DNA 凝集等损伤变化;参麦注射液治疗组再灌注后细胞凋亡百分率明显降低;同时,心肌细胞内再灌注钙超载的现象也受到抑制。 以上结果说明,参麦注射液能够显着减轻缺血再灌注造成的心肌细胞损伤,使细胞结构和功能趋于恢复正常。这种保护作用的机制之一是通过减轻细胞内Ca2+超负荷进而抑制细胞凋亡实现的。

杜先华,杨芳炬^[10]（2002）在《中药对心肌细胞凋亡的保护作用》文中研究说明心肌缺血再灌注损伤、心脏超负荷、心肌缺氧复氧、异丙肾上腺素、病毒感染等多种因素均可引起心肌细胞凋亡。中药可通过抗氧自由基、抗脂质过氧化、减轻钙超载、上调凋亡抑制基因的蛋白表达、下调凋亡刺激基因的蛋白表达而对心肌细胞凋亡起保护作用。

二、牛磺酸对培养的心肌细胞缺氧再给氧损伤的保护作用（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、牛磺酸对培养的心肌细胞缺氧再给氧损伤的保护作用（论文提纲范文）

（1）制备牛磺酸镁的改进方法及牛磺酸镁对大鼠心室肌细胞钠离子通道影响的研究（论文提纲范文）

（2）牛磺酸在水产动物生产中的应用（论文提纲范文）

（3）牛磺酸在水产养殖中的研究与应用（论文提纲范文）

（4）中药对心肌细胞损伤的保护分析（论文提纲范文）

（5）NaCN中毒对缺氧大鼠心脏损伤作用及干预措施研究（论文提纲范文）

（6）牛磺酸对心肌细胞的保护作用研究现状（论文提纲范文）

（8）活血益气中药对血管紧张素Ⅱ诱导培养乳鼠心肌细胞凋亡的影响（论文提纲范文）

（9）参麦注射液对心肌细胞急性缺血再灌注损伤保护作用及机制的研究（论文提纲范文）

四、牛磺酸对培养的心肌细胞缺氧再给氧损伤的保护作用（论文参考文献）

• [1]制备牛磺酸镁的改进方法及牛磺酸镁对大鼠心室肌细胞钠离子通道影响的研究[D]. 杨晓旭. 天津医科大学, 2018(02)
• [2]牛磺酸在水产动物生产中的应用[J]. 冯幼,许合金,刘定,陈子腾,许进奉,黎相广,张百赟,郭发祥. 饲料博览, 2014(08)
• [3]牛磺酸在水产养殖中的研究与应用[J]. 杨艳梅,史红宁. 饲料博览, 2009(03)
• [4]中药对心肌细胞损伤的保护分析[J]. 魏丽娜,刘志新. 中小企业管理与科技(上旬刊), 2008(12)
• [5]NaCN中毒对缺氧大鼠心脏损伤作用及干预措施研究[D]. 唐禾. 第三军医大学, 2008(05)
• [6]牛磺酸对心肌细胞的保护作用研究现状[J]. 张晓丹,渠永清,刘琳. 上海医药, 2008(07)
• [7]葛根素对培养脑细胞缺氧/再给氧损伤的保护作用[J]. 吴艳,万华印. 中国药理学通报, 2006(09)
• [8]活血益气中药对血管紧张素Ⅱ诱导培养乳鼠心肌细胞凋亡的影响[D]. 郭明. 北京中医药大学, 2005(04)
• [9]参麦注射液对心肌细胞急性缺血再灌注损伤保护作用及机制的研究[D]. 郝然. 北京中医药大学, 2004(01)
• [10]中药对心肌细胞凋亡的保护作用[J]. 杜先华,杨芳炬. 中药新药与临床药理, 2002(06)

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