一、三七总皂甙对甲基硝基亚硝基胍转化的人胃粘膜上皮细胞GES-1原癌基因表达的影响（论文文献综述）
李思怡[1]（2021）在《健脾化瘀解毒法调节NF-κB活性抑制胃“炎-癌”转化细胞迁移机制研究》文中进行了进一步梳理背景:根据Correa假说,胃癌发生的病理演变过程中由“慢性萎缩性胃炎→肠上皮化生→异型增生”,最终进展为胃腺癌,以上三个阶段癌变风险较高,因而被统称为胃癌前病变（Gastric precancerous lesions,GPL）。基于此,阻断或延缓GPL进展至胃癌,成为预防胃癌的有效措施。“慢性胃炎—萎缩性胃炎—异型增生—胃癌”被称为“炎—癌”链,其中非可控性炎症在GPL“炎—癌”转变中发挥着重要作用,因此在GPL中应用抗炎治疗显得尤为重要。目前现代医学针对GPL的靶向药物仍是空白,虽然临床上常用药维酶素、幽门螺旋杆菌根除法、COX抑制剂等,在一定程度上能延缓慢性萎缩性胃炎进展,具有防治GPL恶变的作用,但存在服用时间较长、疗效不稳定等缺点,中医药对GPL的治疗具有独特优势,而其对GPL精准靶向防治却未得到总结。因此,本论文以胃“炎—癌”转变为切入点,通过探索健脾化瘀解毒法调节NF-κB信号通路介导的胃“炎—癌”转化细胞迁移,深入探讨GPL发病机制及健脾化瘀解毒方干预甚至逆转胃“炎—癌”转变的效应和分子机制。目的:1.采用对致癌因子最为敏感的C57近交系小鼠Balb/c,利用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍（MNNG）溶液自由饮水进行造模。通过观察胃黏膜病理组织结构变化、GPL分子标志物的表达（Ki67、p53）及小鼠体重摄食情况,建立、筛选并鉴定胃“炎—癌”转化小鼠模型;2.以课题组前期大量研究的中药复方健脾化瘀解毒方为代表方,探讨其通过抑制NF-κB信号通路对胃“炎—癌”转化炎症的改善作用及深入机制;3.在前期研究健脾化瘀解毒方调控NF-κB活性改善胃“炎—癌”转化小鼠炎症的基础上,通过体内外观察胃“炎—癌”转化小鼠胃黏膜及细胞发生早期迁移情况,从NF-κB 信号通路下游深入探讨健脾化瘀解毒方干预甚至逆转胃“炎—癌”转变的信号转导调控机制。方法:1.从不同造模时间、浓度等因素探索胃“炎—癌”转化细胞模型造模条件,创新该细胞模型造模方法,同时针对胃“炎—癌”转化上皮间质转化（EMT）机制,构建胃癌细胞EMT模型,探索健脾化瘀解毒方对胃癌阶段EMT的干预作用,主要通过CCK8法检测细胞存活率、qPCR法检测EMT相关基因表达及划痕愈合实验观察细胞迁移,明确健脾化瘀解毒法代表方胃痞消对细胞迁移的干预效应;2.在前期健脾化瘀解毒法代表方胃痞消的基础上,结合GPL“虚毒瘀”病机,优化得出健脾化瘀解毒方,通过高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）分析健脾化瘀解毒方主要活性成分,将化合物标准品的保留持续时间和质谱、参考化合物的保留持续时间和离子色谱图与健脾化瘀解毒方匹配进行比较,以鉴定健脾化瘀解毒方中的主要成分,建立质量控制标准;3.通过化学诱变剂构建胃“炎-癌”转化小鼠模型,使用JPHYJD干预后,观察小鼠胃黏膜组织结构变化、检测癌症标志物、炎症因子产生情况、炎性细胞浸润情况、NF-κB信号通路活化情况;4.通过化学诱变剂MNNG在体内外分别构建胃“炎-癌”转化小鼠模型、细胞模型,使用健脾化瘀解毒方干预后,观察小鼠胃黏膜组织结构变化及细胞存活情况、细胞迁移相关蛋白表达情况。结果:1.MNNG诱导GES-1复制构建胃“炎-癌”转化细胞模型,模型组细胞出现形态学上的改变,形态多为梭形、纺锤形,并伴有伪足形成,同时细胞极性丧失、排列紊乱;在分子生物学层面,模型组细胞出现分子标志物表达变化,如Vimentin表达（上皮、间质表型标志物）、MMP2表达上调。2.通过HPLC-MS/MS分析对JPHYJD中的四种代表性组分进行鉴定并定量,结果显示,其主要成分包括三七总皂苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、黄芪甲苷和腺苷。此外,检测三七总皂苷、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和腺苷,通过在前体离子的全MS光谱中提取具有最大强度的片段离子来进行定量,发现三七总皂苷和腺苷均为最丰富的化合物。3.H&E染色及免疫组化染色（IHC）结果显示,MNNG可诱导Balb/c小鼠胃黏膜组织出现胃黏膜萎缩、肠上皮化生、炎性细胞浸润和细胞异型增生等胃“炎-癌转化”关键病理改变,胃“炎-癌转化”小鼠模型构建成功,健脾化瘀解毒方可缓解MNNG诱导的包括胃黏膜病理组织结构改变、促炎Th1细胞浸润和胃黏膜上皮组织癌症标志物Ki67、p53 表达。4.Western-blot结果显示健脾化瘀解毒方可逆转MNNG所诱导的NF-κB/IκB-α活化、COX-2、NADPH氧化酶家庭成员NOX2和NOX4蛋白表达的增加,qPCR检测结果显示健脾化瘀解毒方可显着改善MNNG诱导的炎症因子产生（IL-6、TNF-α）,此外,与阳性药维生素B12（VitB12）相比,高剂量的健脾化瘀解毒方具有更强的抗炎活性。5.另外,NF-κB活化诱导产生“炎症因子风暴”,进而诱导胃“炎-癌转化”过程中发生早期细胞迁移的蛋白活化,Western-blot结果MNNG可在体内外诱导早期细胞迁移相关蛋白的活化,如E-cad、N-cad等,而健脾化瘀解毒方预处理可明显抑制这些蛋白的活化。结论:1.GPLCs发生EMT,可能参与胃癌早期转移,健脾化瘀解毒中药WPX可在一定程度上下调EMT相关基因表达,而抑制细胞迁移,但疗效不显着,在此基础上,健脾化瘀解毒中药需进一步进行优化;2.三七总皂苷、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、腺苷为健脾化瘀解毒方含量较高的四种有效活性成分,其中三七总皂苷和腺苷均为最丰富的化合物,提示以上化合物可视为健脾化瘀解毒方的化学标记物;3.MNNG可在体内外诱导出现胃“炎-癌转化”,本次动物造模选用对致癌因子敏感的Balb/c小鼠进行造模成功,可稳定模拟胃“炎-癌转化”组织病理变化过程;4.健脾化瘀解毒方可以通过在胃黏膜中介导NF-κB引发的“炎症因子风暴”干预胃“炎-癌转化”进程;同时可能通过抑制其级联反应进而抑制细胞迁移,从而发挥控制甚至逆转胃“炎-癌转化”效应的潜能,进而预防胃癌发生。总之,本研究成功构建胃“炎-癌转化”模型小鼠。健脾化瘀解毒方可能通过调控NF-κB信号通路,抑制其活化导致的“炎症因子风暴”级联反应,调控其下游蛋白。从而在干预胃“炎-癌转化”小鼠胃黏膜萎缩、肠上皮化生、异型增生的基础上,干预胃黏膜上皮细胞受MNNG诱导所发生的早期迁移,进而发挥治疗GPL、预防胃癌的作用。
强占荣[2]（2019）在《miR-21/PTEN/Akt通路在姜黄素抗胃癌中的作用以及PD98059的抗胃癌协同效应》文中研究说明研究背景胃癌是严重危害人类健康的恶性肿瘤,其防治任务艰巨。天然植物多酚姜黄素,由于安全、有效、廉价及低毒,且具抗炎、抗肿瘤等功效而备受研究者关注。但其抗肿瘤抗胃癌的机制仍不十分明确,值得探究。miR-21在几乎所有实体肿瘤中都存在高表达,已被公认为致癌因子,可作用多种靶位点调控胃癌的发生和发展。姜黄素是否可通过调控miR-21及其靶通路PTEN/P13K/Akt而预防胃癌的发生及进展值得探究。胃癌的化学防治中存在药物耐药、以及化疗毒副作用大、难以耐受等难题,探索新的抗癌治疗方法具有重要临床意义。姜黄素能否与MAPK通路特异性抑制剂PD98059联合发挥抗胃癌协同作用,未见相关研究,本研究中同时加以探讨。目的1.初步探明姜黄素是否具备有效防治胃癌发生和进展的作用。2.探明miR-21/PTEN/PI3K/Akt通路在姜黄素抗胃癌中的作用,并对该通路进行初步验证。3.探明姜黄素是否与PD98059可发挥协同抗胃癌作用,并探讨相关机制。方法1.体外观察姜黄素及其与PD98059或PTEN特异性抑制剂VO-Ohpic trihydrate联合抗胃癌作用。2.qRT-PCR及western blotting观察姜黄素与PD98059联合作用对miR-21表达及miR-21/PTEN/Akt 通路的影响。3.体外验证miR-21与靶基因PTEN表达关系。4.姜黄素干预MNNG诱导胃上皮细胞GES-1恶性转化作用观察。结果1.（1）姜黄素呈浓度及时间依赖形式诱导胃癌MGC-803细胞增殖抑制,同时能诱导胃癌细胞凋亡。（2）PD98059对姜黄素诱导胃癌细胞凋亡存在明显协同作用。（3）姜黄素能够抑制MGC-803细胞迁移,VO-Ohpic trihydrate有助恢复受姜黄素抑制的MGC-803细胞迁移。2.（1）不同浓度姜黄素作用MGC-803细胞后,随作用浓度增加,miR-21水平逐渐下调,二者之间呈现负相关关系;（2）PD98059联合不同浓度姜黄素作用MGC-803细胞与相应浓度姜黄素单作用组比较miR-21表达呈现增加趋势,提示PD98059联合姜黄素对miR-21水平影响可能有其它机制参与。3.（1）姜黄素随作用浓度（0～40μM）增加能抑制p-Akt的表达,诱导PTE N蛋白表达的上调,PTEN表达与p-Akt的表达呈负相关关系。（2）PD98059与姜黄素联合作用能够使MGC-803细胞p-Akt表达较PD98059或姜黄素单作用组明显减少;在联合作用组,PTEN表达较单作用组减少,提示p-Akt表达调控尚有其它的调控机制参与。4.通过体外细胞实验,利用Real-time PCR、Western blot、双荧光素酶试验验证证明了 miR-21能够靶向调控PTEN基因。5.（1）姜黄素能够抑制MNNG诱导GES-1细胞恶性转化。（2）姜黄素对MNNG诱导GES-1细胞染色体等遗传物质损伤可发挥明显保护性作用。结论1.姜黄素可经miR-21/PTEM/Akt通路诱导胃癌MGC-803细胞凋亡并抑制细胞增殖及迁移。2.姜黄素可抑制MNNG诱导的胃粘膜上皮细胞恶性转化。3.姜黄素与PD98059可发挥协同抗胃癌作用,除miR-21/PTEN/Akt通路参与此协同作用外,可能尚有其它机制。
李思怡,赵自明,潘华峰,刘永强,王奇,郑嘉怡,樊湘珍[3]（2019）在《胃痞消体外抑制胃癌前病变细胞和胃癌SGC7901细胞上皮-间质转化的机制》文中研究指明目的:探讨胃痞消（WPX）抑制胃癌前病变细胞和胃癌细胞SGC7901上皮-间质转化（EMT）机制。方法:取人胃黏膜上皮细胞（GES-1）及胃癌细胞SGC7901,MNNG造模及WPX干预后,检测EMT相关分子标志物及细胞迁移力。结果:与空白组比较,模型组SGC7901迁移速度明显加快（P<0.01）;与模型组比较,WPX高、低剂量组细胞迁移速度减慢（P<0.01）。模型组E-cad基因表达下调（P<0.05）,SGC7901细胞中WPX高、低剂量组VIMENTIN表达较模型组显着降低（P<0.01）。结论:MNNG可诱导SGC7901出现EMT现象,WPX可在一定程度上下调EMT相关基因表达而抑制细胞迁移;同时胃黏膜钙黏分子可与其他分子产生协同机制影响病变细胞持续增殖、炎性反应而延缓进展。
邵明洋[4]（2017）在《Prx4作为早期胃癌新标志物的论证研究》文中认为目的:作为常见并高发癌症,如何做到早发现、早诊断、早治疗从而使胃癌患者的生存率得到提高是临床上亟需解决的问题之一。资料显示,目前临床上所用的肿瘤标志物通过联合检测手段基本可以达到筛查的目的,但是在实际应用中存在着明显的特异性和灵敏度低的问题,尤其是缺乏针对早期胃癌诊断的肿瘤标志物。本研究利用已获得的潜在的新早期胃癌标志物过氧化物酶-4（Prx4）为研究对象,在临床和细胞、分子不同水平上,深入论证其作为早期胃癌标志物的科学性。研究内容及方法:1.不同组织中Prx4表达量差异性研究（1）提取靶蛋白收集正常胃粘膜上皮组织、早期胃癌组织、进展期胃癌组标本,并利用胶原酶Ⅳ消化组织的方法分离出组织细胞。利用适配子、生物素链酶亲和素磁珠的方法分离提取得到靶蛋白,并通过SDS-PAGE实验对各时期组织表达量进行初步鉴定。（2）Prx4蛋白表达量的检测以细胞裂解液获得的组织总蛋白为样本,利用ELISA和western blot的方法,检测Prx4在正常胃粘膜上皮组织、早期胃癌组织、进展期胃癌组织中的表达量。（3）Prx4 mRNA表达量的检测利用RT-PCR法检测Prx4 mRNA表达量。用正常胃粘膜上皮组织、早期胃癌组织、进展期胃癌组织为样本,提取总RNA。设计PCR引物并进行PCR,通过琼脂糖凝胶电泳法检测Prx4 mRNA表达量。2.Prx4与胃细胞转化过程的相关性研究选正常胃黏膜细胞GES-1株,利用MNNG为诱变剂,根据细胞形态变化及划痕实验确定诱变剂的最佳用量。实验分两组:第一组诱变0、4、8、12、16、20、24h后更换不含诱变剂培养基后全部培养24h;第二组诱变16h后更换不含诱变剂培养基,分别培养0、4、8、12、16、20、24h。利用划痕实验、MTT实验、集落形成实验确定GES-1细胞株转化过程中细胞的形态变化、迁移、增殖能力和细胞接触抑制的改变。通过ELISA、western blot和RT-PCR的方法鉴定Prx4蛋白质和mRNA的表达量以确定Prx4与胃癌发生和发展的相关性。结果:1.不同组织中Prx4表达量差异性研究SDS-PAGE实验结果显示早期胃癌组织中用Ap7提取得到的蛋白都是条带单一,并且质量相同均在27KDa左右。早期胃癌组表达量（16.8±2.35ng/μl）显着高于进展期胃癌组表达量（8.4±2.96ng/μl）（P<0.01）;早期胃癌组表达量显着高于正常胃粘膜组织组表达量（4.5±2.36ng/μl）（P<0.01）;进展期胃癌组与正常胃粘膜组相比有显着性差异（P<0.01）。mRNA水平检测结果与蛋白分子水平的检测结果相一致。2.Prx4与胃细胞转化过程的相关性研究（1）根据细胞形态变化、细胞划痕实验结果确定诱变剂的最佳用量为8×10-5mol/l。（2）诱变不同时间,培养24h组结果:诱变16h后,细胞出现重叠堆积生长;细胞增殖率最高;细胞集落形成能力升高,细胞团的面积较大;16h之后的细胞迁移能力明显升高,因此诱变16h是细胞发生转化的时间点。（3）诱变不同时间,培养24h组结果:0-16h阶段Prx4表达量逐渐升高,诱变16h后表达量降低;诱变16h,培养不同时间组结果:细胞转化后,随着培养时间的增加,Prx4的表达量降低。（4）诱变不同时间,培养24h组Prx4 mRNA表达逐渐升高;诱变16h,培养不同时间组Prx4 mRNA表达没有明显变化。结论:临床实验结果提示Prx4可作为早期胃癌的生物标志物。细胞水平上Prx4仅在转化过程中高表达,因此Prx4主要参与细胞转化过程,且促进转化过程。细胞水平结果实验结果与临床实验相一致,证实Prx4可作为早期胃癌标志物。
李方园[5]（2016）在《青蒿素及衍生物预防H.pylori诱导的胃癌的作用及机制》文中进行了进一步梳理目的:胃癌是常见的恶性肿瘤之一,发病率全球排列第五,仅次于肺癌,乳腺癌,结肠癌和前列腺癌,死亡率全球排列第三,仅次于肺癌和肝癌。超过70%的胃癌患者发生在发展中国家,其中以东亚国家为主,中国和日本是胃癌高发病区。胃癌的发生由胃部损伤和慢性炎症等胃部疾病进展而来。导致胃部疾病的病因主要有幽门螺旋杆菌（Helicobactor pylori,HP）感染,酒精和非甾体类抗炎药的损伤,饮食习惯不良等。其中HP的感染最受瞩目。1994年,世界卫生组织国际癌症研究机构（IARC）将HP列为Ⅰ类致癌因子,HP导致胃部慢性炎症,炎症反复发作导致胃上皮细胞原癌基因被激活,细胞逐渐发生癌变。青蒿素（Artemisinin,ART）及其衍生物作为抗疟疾的特效药受到医药界各个领域的关注,因而其药效也得到了广泛的扩展。研究发现,ART及其衍生物能导致乳腺癌、宫颈癌、肝癌、胃癌、结直肠癌等多种癌细胞发生凋亡。除此之外,其在微生物领域也得到广泛的研究,ART对炭蛆杆菌、表皮葡萄球菌、卡他球菌等有较强的抑制作用,对结核杆菌、绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌等也有一定的抑制作用。尽管ART及其衍生物对胃癌的防治作用已经得到了深入的研究,但是其对HP相关胃癌的作用尚未被报道。因此,我们开展了一系列的实验来阐述ART及其衍生物双氢青蒿素（Dihydroartemisninin,DHA）和青嵩琥酯（Artesunate,ARTS）对 HP 导致的胃癌的化学预防作用,并将从抗炎的角度考察其作用机理。方法:1.ART,DHA和ARTS对HP和胃癌上皮细胞的体外抑制作用采用微量二倍稀释法检测ART（浓度为0,5,10,20,40,80 μM）,DHA（浓度为 0,1.25,2.5,5,10,20 μM）,ARTS（浓度为 0,1.25,2.5,5,10,20 μM）作用24 h后对HP菌株ATCC 43504的体外抑制作用;采用MTT的方法检测ART（浓度为 0,12.5,25,50,100,200 μM）,DHA（浓度为 0,6.25,12.5,25,50,100 μM）,ARTS（浓度为 0,6.25,12.5,25,50,100μM）作用 24h后对胃癌上皮细胞 SGC-7901的体外抑制作用。2.ART,DHA和ARTS对HP诱导的炎症反应和氧化反应的抑制作用三种药物预处理SGC-7901细胞24 h后,用HP诱导细胞24 h（MOI = 100）,采用Western Blotting和ELISA的方法考察三种药物（浓度均为0,5,10,20 μM）对HP诱导胃上皮细胞NF-κB通路中蛋白以及下游炎症因子的表达影响。三种药物预处理SGC-7901细胞24h后,用HP诱导细胞6h（MOI = 100）,采用流式细胞术的方法考察三种药物（浓度均为0,5,10,2μM）对HP导致的胃癌上皮细胞中ROS升高的影响,采用Western Blotting来考察三种药物对HO-1和NQO1抗氧化蛋白的作用。3.ART,DHA和ARTS对胃癌上皮细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用采用200万SGC-7901细胞系接种BALB/c/nu/nu小鼠左腋皮下,建立胃腺癌移植瘤模型,考察三种药物在给药浓度均为25 mg/kg和50 mg/kg,给药24 d后对裸鼠体内胃癌细胞的生长抑制作用;4.ART,DHA和ARTS对HP联合甲基亚硝基脲（Methylnitrosourea,MNU）诱导的胃癌的预防作用采用HP联合MNU诱导胃癌模型来考察ART（60 mg/kg）,DHA（60 mg/kg）和ARTS（60 mg/kg）对胃癌发生和发展的预防作用。采用HE染色方法检测小鼠胃部的组织学性质;采用免疫组织化学的方法检测小鼠胃组织中IκB-α,p-IκB-α,COX2的表达情况;采用ELISA的方法检测小鼠血清中IL-1β,IL-6和TNF-α的表达水平。5.统计学分析采用SPSS 13.0统计软件进行数据分析;采用GraphPad 5.0数据分析软件,数据结果以Mean ± SD表示;多组间均数比较采用One way-ANOVA,p<0.05表示具有显着学差异。结果:1.ART,DHA和ARTS对HP和胃癌上皮细胞的体外抑制作用MTT实验结果说明,三种药物对HP生长的抑制强度为DHA>ARTS>ART,其中DHA和ARTS在20 μM的时候几乎能完全抑制菌株的生长;三种药物分别作用于正常的胃上皮细胞GES-1和胃癌上皮细胞SGC-7901 24h后,发现药物对肿瘤细胞的生长抑制作用比正常细胞更明显;2.ART,DHA和ARTS对HP诱导的炎症反应和氧化反应的抑制作用HP感染胃癌上皮细胞SGC-7901后,能够激活NF-κB通路,使IκB-α的表达量降低,使其对p65的抑制作用减弱,从而使p65能更好的发挥其转录因子的作用,诱导下游炎症因子表达,研究结果表明ART,DHA和ARTS都能逆转这一过程;HP感染胃癌上皮细胞SGC-7901后,能够显着的诱导ROS的生成,ART,DHA和ARTS都能浓度依赖降低ROS的生成;3.ART,DHA和ARTS对胃癌上皮细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用25 mg/kg和50mg/kg ART对裸鼠胃癌细胞移植瘤的抑制率分别为29.9%和33.9%,DHA为19.5%和45.4%,ARTS为30.9%和40.7%,阳性药物环磷酰胺在25 mg/kg时对体内胃癌细胞生长的抑制率为53.5%;4.ART,DHA和ARTS对HP联合MNU诱导的胃癌的预防作用HP联合MNU诱导的胃癌模型中,模型组的成癌率为78.6%,ART给药组的成癌率为73.3%,DHA给药组的成癌率为43.8%,ARTS组的成癌率为60%;免疫组织化学结果显示,在该胃癌诱导模型上,ART,DHA和ARTS均能有效的降低COX-2的蛋白表达水平,升高IκB-α蛋白水平;血清ELISA实验结果显示,在该模型中,ART,DHA和ARTS均能显着地降低炎症因子IL-1β,IL-6和TNF-α的蛋白表达水平。结论:ART,DHA和ARTS都能够抑制HP的生长,其中DHA的作用最明显;ART,DHA和ARTS能抑制体内外肿瘤细胞的生长;在HP感染的胃癌细胞模型中,ART,DHA和ARTS能够通过减少炎症因子的产生而抑制炎症反应;在HP联合MNU诱导的胃癌模型中,ART,DHA和ARTS都能有效的预防肿瘤的发生,其中DHA的作用最明显。
张寅[6]（2015）在《慢性萎缩性胃炎证候分布特点与基于细胞动力学表型的调气活血解毒法治疗慢性萎缩性胃炎机制研究》文中指出第一部分临床研究慢性萎缩性胃炎证候分布特点的无监督数据挖掘研究目的慢性萎缩性胃炎被明确定义为胃癌前病变,是我国的常见多发疑难病。积极治疗慢性萎缩性胃炎以阻断其恶性转化,具有重要的临床与社会意义,对胃癌的早期预防非常关键。对慢性萎缩性胃炎证候要素及其分布规律的研判、对类证组合及其分布规律的归纳、对证候要素及四诊信息间关联规律的解析、对核心四诊信息组合的发现,可以明确病机关键、确立临床治疗的核心靶点,从而为治则治法的确立奠定临床理论基础,并为重要效验治法的临床应用合理性、优越性提供证候学研究证据。方法基于横断面调查收集慢性萎缩性胃炎患者四诊信息,建立四诊信息数据库。鉴于不同数据分析策略的方法学优势,联合应用包括因子分析、系统聚类分析、简单对应分析、多重对应分析、关联规则算法分析、基于关联规则的复杂系统熵聚类在内的无监督数据挖掘方法,对慢性萎缩性胃炎证候学信息进行系统剖析。具体包括:1、基于因子分析与系统聚类分析进行证候要素及类证提取;2、应用简单对应分析与最优尺度算法多重对应分析阐释证候要素的分布特征及内部相关性;3、基于关联规则Apriori算法分析核心四诊信息群的构成;4、基于熵的关联系数法模型进行证候要素提取及分布特征研究。结果1、基于因子分析的证候要素提取与分布规律研究显示:慢性萎缩性胃炎的证候要素包括气虚、气滞、血瘀、痰浊、热、阳虚,就分布趋势而言,气虚、气滞、血瘀、痰浊、热相对多见,阳虚相对少见;2、基于对应分析的证候要素关联性研究显示:在全部6个证候要素中,气滞、气虚、热、痰浊、血瘀5个证候要素聚集构成了内部关系相对最为紧密的核心证候要素集群;3、基于关联规则Apriori算法的四诊信息群研究结果显示:在普通筛选建立条件下,相对核心四诊信息群可以涵盖全部6个证候要素的特征;在苛严筛选建立条件下,纳入核心四诊信息群的仅有12项四诊信息,涵盖气虚、气滞、血瘀、痰浊、热5个证候要素的特征;4、基于熵的关联系数法模型的证候要素研究显示:提取的证候要素包括气虚、气滞、血瘀、痰浊、热、阳虚、阴虚。结论慢性萎缩性胃炎核心病机由气虚、气滞、血瘀、痰浊、热、阳虚、阴虚共同构建,"虚、滞、瘀、毒"四端作为重要共同基本病机贯穿全病程。气虚、气滞、血瘀、痰浊、热为临床治疗核心靶点,调气（理气、益气）、活血化瘀、化痰、清热解毒为临床最为关键的四项治则。基于对证候要素、核心证候要素群、核心四诊信息群的系统全面无监督数据挖掘获得的以上结论,凸显了上述治则临床联合应用的重要性。调气活血解毒法临床应用取得优异效验的证候学基础,正是其调气（理气、益气）、活血化瘀、清热解毒联用的治则对慢性萎缩性胃炎病机要点与关键证候要素靶点的全面涵盖。第二部分实验研究基于细胞动力学表型的调气活血解毒法治疗慢性萎缩性胃炎机制研究目的慢性萎缩性胃炎的病情进展是一个具备多时相、多阶段特点的典型恶性转化病程序列,胃上皮细胞动力学紊乱是慢性萎缩性胃炎恶性转化的重要细胞学机制。Ezrin蛋白是细胞骨架与细胞膜之间的连接蛋白,其567位苏氨酸磷酸化介导蛋白分子构象改变实现Ezrin的活化,在细胞迁移、增殖、侵袭、凋亡、极化维持、胞内运输等一系列细胞动力学行为中承担关键功能。Ezrin是慢性萎缩性恶性转化进程的重要参与者,其表达水平与病理进展及预后密切相关,Ezrin也是调控胃壁细胞泌酸过程的关键节点蛋白,其对胃酸分泌的调控影响胃内微环境的稳态。调气活血解毒法是慢性萎缩性胃炎的重要临证遣方策略,临床研究部分已证实其临证应用优异效验的证候学基础,消痞灵是以此立法治疗慢性萎缩性胃炎的经典代表方剂,对于慢性萎缩性胃炎恶性转化进程具有确切阻断作用。以消痞灵为载体开展基于细胞动力学表型的调气活血解毒法治疗慢性萎缩性胃炎机制研究,有助于阐明调气活血解毒法对胃上皮细胞动力学紊乱可能的干预作用、明确其临床效验的细胞动力学调控机制,具有重要意义。方法分别制备消痞灵中药生药粗提物与含药血清、对照血清,以原代极化培养兔胃壁细胞、人永生化胃上皮GES-1细胞、MNNG诱导恶性转化后人永生化胃上皮MC细胞、人胃腺癌AGS细胞为胃上皮细胞模式体系开展以下工作:1、基于免疫荧光实验评估其对原代培养兔胃壁细胞酸分泌能力与泌酸相关重要节点蛋白Ezrin、Thr567位磷酸化Ezrin、H,K-ATPase亚细胞定位的调控;2、基于活细胞迁移实验与划痕实验综合评估其对GES-1、MC、AGS细胞迁移能力的调控;3、基于MTS实验、三维培养实验评估其对GES-1、MC、AGS细胞活力的调控;4、基于Transwell实验评估其对AGS细胞侵袭能力的调控;5、基于Western-blotting实验评估其对MC细胞、AGS细胞Ezrin蛋白表达及EzrinThr567位磷酸化的调控规律。结果1、生药粗提物及含药血清对原代极化培养兔胃壁细胞泌酸动力学表型及Ezrin、H,K-ATPase亚细胞精确定位无显着调控作用;2、生药粗提物可减低GES-1细胞迁移的路程、速率,增加GES-1细胞迁移的位移、速度;生药粗提物可抑制MC细胞迁移能力;生药粗提物及含药血清均可抑制AGS细胞迁移能力;3、生药粗提物可提升GES-1细胞活力,含药血清对GES-1细胞活力无调控作用;生药粗提物及含药血清可抑制MC、AGS细胞活力;4、生药粗提物与含药血清可抑制AGS细胞侵袭能力;5、伴随上述动力学表型的调控,生药粗提物与含药血清均可下调MC细胞、AGS细胞Ezrin蛋白表达水平与EzrinThr567位磷酸化水平。结论调气活血解毒法治疗慢性慢性萎缩性胃炎取得良好效验的机制,可能与其对伴随慢性萎缩性胃炎全病程的胃上皮细胞动力学紊乱的调控作用有关。在体外研究中,以消痞灵为载体的调气活血解毒中药抑制了恶性潜能及癌变后胃上皮细胞高迁移、高侵袭、高增殖和（或）低调亡特征的动力学表型,并且对于模拟正常胃上皮细胞迁移、增殖动力学表型及胃壁细胞泌酸动力学表型无显着调控作用。上述调控作用是通过下调恶性潜能及癌变后胃上皮细胞Ezrin蛋白表达水平、抑制Ezrin Thr567位点磷酸化修饰水平直接介导的。
支小飞[7]（2015）在《慢性应激在胃癌发生发展过程中的作用及机制研究》文中提出目的:胃癌是世界第四大常见肿瘤,其死亡率在肿瘤相关死亡中位居第二。流行病学研究表明,压力、慢性抑郁症和缺乏社会关心可作为癌症发生和进展的风险因素,但其机制并不清楚。心理干预和免疫治疗已成为肿瘤综合治疗的重要内容,但由于缺乏有效的治疗靶点,临床心理干预的疗效尚未达成共识。因此,深入研究心理应激引起胃癌发生发展的启动环节和调控途径,为应激相关胃癌的预防和治疗提供新的靶点,是急待解决的关键问题之一。本研究探讨了慢性应激在胃癌发生发展过程中的作用及机制,并进一步探讨阻断肾上腺素受体在胃癌治疗中的潜在价值,为应激相关胃癌的预防和治疗提供新的思路。方法:在N-甲基-N-亚硝脲（MNU）诱导小鼠自然形成胃癌模型的基础上,采用束缚小鼠行动来模拟慢性应激刺激,建立慢性应激参与胃癌发生的小鼠模型。将小鼠胃癌标本进行基因表达谱测序,初步筛查慢性应激促进胃癌发生的作用机制,并用定量PCR进行验证。检测DNA氧化损伤程度及DNA双链损伤（DSBs）程度,以及碱基切除修复途径的活性,来明确慢性应激对DNA损伤修复的影响;采用CCK-8法及平板克隆实验检测细胞增殖能力;通过流式细胞术及软琼脂失巢凋亡实验检测细胞抗凋亡能力;采用Transwell法检测胃癌细胞的迁移侵袭能力;采用小管形成实验检测去甲肾上腺素对胃癌细胞VEGF分泌的影响;Western Blot及免疫共沉淀检测参与作用的通路蛋白;应用裸鼠皮下及胃原位成瘤模型、肺转移模型,体内验证慢性应激的促增殖、转移作用;免疫组化法验证裸鼠移植瘤中相关信号分子的相互作用关系;TUNEL法检测裸鼠移植瘤凋亡水平。结果:在致癌剂MNU的诱导下,慢性应激明显增加小鼠胃癌的发生率。对小鼠胃癌样本进行基因表达谱测序分析发现,DNA损伤修复通路异常参与了慢性应激导致胃癌发生的过程。DHE流式检测发现慢性应激显着升高肿瘤细胞内的活性氧簇水平（ROS）,进一步检测DNA损伤标志物8-OHdG和γ-H2AX显示,慢性应激显着引起胃癌细胞DNA损伤。在机制研究中发现,β2肾上腺素受体（ADRB2）激活后,通过PKA-STAT3途径,抑制了碱基切除修复途径（BER）的关键基因XRCC1的表达水平。同时,还通过激活MDM2,增加了p53的泛素化,使p53降解,避免细胞因DNA损伤而发生凋亡。118例胃癌组织芯片结果证实,ADRB2与pSTAT3表达正相关,而与XRCC1表达负相关。采用裸鼠皮下移植瘤模型及胃原位移植瘤模型研究发现,慢性应激及介导应激反应的神经递质去甲肾上腺素能明显促进胃癌移植瘤的生长、转移、血管形成。进一步通过免疫共沉淀及免疫荧光检测发现,去甲肾上腺素通过激活Src,进而使E-cadherin/β-catenin复合体分离,导致β-catenin游离并入核启动下游基因的转录。通过CCK-8法发现,Carvedilol、Propranolol及Butoxamine对胃癌细胞的半数抑制浓度IC50在他们的生理治疗浓度范围内（1-100μM）。三种阻滞剂能明显增加胃癌细胞对多西他赛Docetaxel、长春新碱Vincristine及表阿霉素Epirubicin的敏感性。蛋白芯片检测凋亡相关因子发现,联合处理组细胞内HSP70、Survivin、XIAP及Bcl-w表达受到抑制。结论:慢性应激能明显促进胃癌的发生及发展,阻断应激过程的关键信号通路可能成为治疗胃癌的新靶点。
孟鹏鹏[8]（2011）在《低浓度MNNG诱导GES-1细胞过程中Shh信号通路的动态观察》文中认为目的:探讨低浓度MNNG（N–甲基–N’–硝基–N–亚硝基胍）诱导GES-1细胞（人永生化胃黏膜上皮细胞）转化为MC细胞（转化细胞）过程中Shh信号通路的表达。方法:取预先冻存的GES-1细胞,复苏,传代,待细胞达80%融合时,细胞计数后,放入6mm培养皿中。取配制好的0.01mol/L的MNNG储存液,加入生长旺盛的GES-1细胞中,终浓度为2×10-5mol/L,避光培养24h后,更换不含MNNG的培养液。分别收集GES-1细胞（对照组,未加MNNG）,0天（刚更换不含MNNG的培养基）,3天,7天的MC细胞（标记为MC0、MC3、MC7）。RT-PCR分别检测ShhmRNA与Gli-1mRNA在GES-1、MC0、MC3、MC7的表达,RT-PCR产物行琼脂糖凝胶电泳,数字成像系统拍照分析,不同组比较采用Shh、Gli-1/GAPDH相对强度比值,试验重复3次。免疫细胞化学法分别检测Shh与Gli-1蛋白在GES-1、MC0、MC3、MC7的表达,用Image-proplus5.0图像分析系统对结果进行灰度分析。结果:RT-PCR结果显示ShhmRNA在GES-1细胞中阴性表达,在MC0、MC3、MC7细胞中表达阳性,并呈现逐渐增强的趋势,Gli-1mRNA在GES-1细胞中呈阴性表达,在MC0、MC3、MC7细胞中表达阳性,表达也逐渐增强;免疫细胞化学结果显示Shh蛋白在GES-1细胞中不着色（阴性表达）,在MC0、MC3、MC7细胞中着色逐渐加深;Gli-1蛋白在GES-1细胞中也不着色（阴性表达）,在MC0、MC3、MC7细胞中着色逐渐加深。结论:Shh信号通路参与了低浓度MNNG诱导GES-1细胞转化为MC细胞的过程,并随时间表达逐渐增强。
孟鹏鹏,闫慧明,冯广跃[9]（2011）在《Shh、Gli-1在经低浓度MNNG转化的GES-1细胞中的表达及意义》文中研究说明目的研究经低浓度MNNG转化的GES-1细胞（MC细胞）中Shh、Gli-1mRNA及蛋白的表达,以探讨Shh信号通路与胃癌前病变的关系。方法低浓度MNNG（N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍）诱导GES-1（人永生化胃黏膜上皮细胞）转化为MC细胞,对照组为GES-1细胞。用RT-PCR检测ShhmRNA与Gli-1mRNA的表达,免疫细胞化学法检测Shh与Gli-1蛋白的表达。结果 Shh、Gli-1mRNA及蛋白在GES-1细胞中无表达,在MC细胞中表达阳性。结论 Shh信号通路可能参与了胃癌前病变过程。
孙惠丽[10]（2010）在《益气活血清热法治疗慢性萎缩性胃炎癌前病变的疗效评价及分子机理研究》文中指出目的：进一步评价以益气活血清热法为原则研制的仁术健胃颗粒治疗CAG癌前病变的临床疗效,探讨仁术健胃颗粒干预MNNG致GES-1恶性转化的作用机理。文献研究：从古今两方面探讨了中医对CAG癌前病变病名、病因病机、治则治法的认识,回顾了现代医学对CAG癌前病变在分子生物学、与幽门螺旋杆菌（Hp）感染的关系及治疗方面的研究进展。临床研究：72例CAG癌前病变患者随机分为两组,分别予仁术健胃颗粒与胃复春片口服,治疗2个疗程,观察治疗前后患者临床症状、胃镜征象、病理表现的改善情况。结果显示：治疗组综合疗效及愈显率（临床治愈显效率）分别为90.5%,52.4%,明显高于对照组（63.3%,26.7%）,有显着性差异（P<0.05）；治疗组临床症状有效率为95.2%,与对照组（83.3%）比较有显着性差异（P<0.05）；两组胃镜征象均有好转,治疗组对粘膜水肿、糜烂的改善明显优于对照组（P<0.05）；两组病理表现均有好转,治疗组对萎缩的改善明显优于对照组（P<0.05）；治疗组对Hp感染有一定根除作用（P<0.05）。实验研究：采用MNNG致GES-1恶性转化的细胞（MC细胞）为胃癌前病变的体外研究模型,观察仁术健胃颗粒兔含药血清对MC细胞的抑制作用及对Fas、Bcl-2、CDK4、P16表达的影响。结果显示：仁术健胃颗粒兔含药血清能明显抑制MC细胞的生长。MNNG致GES-1细胞恶性转化后,细胞凋亡下降,Bcl-2、CDK4表达增加,Fas表达无显着性差异,P16表达下降,仁术健胃颗粒能促进MC细胞的凋亡,降低Bcl-2、CDK4表达,升高Fas、P16的表达。结论：仁术健胃颗粒能明显缓解慢性萎缩性胃炎患者临床症状,改善胃粘膜病变情况,减轻腺体萎缩及炎症,对Hp感染有一定抑制作用。其治疗胃癌前病变的作用机制可能与促进胃癌前细胞的凋亡,调控其细胞周期有关。
二、三七总皂甙对甲基硝基亚硝基胍转化的人胃粘膜上皮细胞GES-1原癌基因表达的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、三七总皂甙对甲基硝基亚硝基胍转化的人胃粘膜上皮细胞GES-1原癌基因表达的影响（论文提纲范文）
（1）健脾化瘀解毒法调节NF-κB活性抑制胃“炎-癌”转化细胞迁移机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 第一节 胃“炎—癌”转化的机制及研究现状 |
| 一、胃“炎—癌”转化在胃癌进展中发挥重要作用 |
| 二、胃“炎—癌”转化中西医治疗现状 |
| 第二节 NF-κB信号通路与胃“炎—癌”转化及细胞增殖迁移 |
| 一、NF-κB家族及其信号通路 |
| 二、NF-κB信号通路与炎症发生的关系 |
| 三、NF-κB信号通路与肿瘤的发生的关系 |
| 第三节 肿瘤转移与上皮—间质转化 |
| 一、TGF-β/Smads信号通路介导的上皮-间质转化 |
| 二、EMT基因与分子标志物 |
| 第四节 基于胃“炎-癌”转化病理组织学进程的中医精准防治规律研究 |
| 一、中医药以健脾益胃法为主靶向胃黏膜萎缩阶段 |
| 二、中医药以健脾益胃化瘀法为主靶向胃黏膜萎缩伴IM阶段 |
| 三、中医药以健脾化瘀解毒法为主靶向胃黏膜萎缩伴LGIN阶段 |
| 第五节 健脾化瘀解毒法靶向胃“炎—癌”转化关键关节发挥作用 |
| 一、健脾化瘀解毒法靶向“炎-癌”转化环节改善GPL病理组织结构 |
| 二、健脾化瘀解毒法通过有氧糖酵解及自噬凋亡等途径逆转胃“炎-癌”转化 |
| 三、健脾化瘀解毒法通过抑制NF-κB信号通路控制甚至逆转胃“炎-癌”转化 |
| 四、健脾化瘀解毒方是临床治疗胃癌前病变的有效方剂 |
| 第二章 实验研究 |
| 第一节 胃痞消体外抑制GPL模型细胞和胃癌SGC7901上皮-间质转化研究 |
| 一、实验材料与试剂 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 第二节 健脾化瘀解毒方中有效活性成分的分析 |
| 一、实验材料与试剂 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 第三节 健脾化瘀解毒方对胃“炎—癌”转化小鼠病理模型的的干预效应 |
| 一、实验材料与试剂 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 第四节 健脾化瘀解毒方通过抑制NF-κB信号通路逆转胃“炎—癌”转化 |
| 一、实验材料与试剂 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 第五节 健脾化瘀解毒方通过NF-κB信号通路抑制胃癌前病变细胞的早期迁移 |
| 一、实验材料与试剂 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间发表论文情况、参与课题与获奖情况 |
| 致谢 |
| 附件 |
（2）miR-21/PTEN/Akt通路在姜黄素抗胃癌中的作用以及PD98059的抗胃癌协同效应（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 参考文献 |
| 第一章 PD98059协同姜黄素抗人胃癌MGC-803细胞增殖、诱导细胞凋亡以及PTEN抑制剂对姜黄素抑制MGC-803细胞迁移能力的影响观察 |
| 一 材料与方法 |
| 二 结果 |
| 三 讨论 |
| 四 小结 |
| 参考文献 |
| 第二章 姜黄素与PD98059联合作用对MGC-803细胞miR-21表达的影响 |
| 一 材料与方法 |
| 二 结果 |
| 三 讨论 |
| 四 小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 姜黄素诱导MGC-803细胞凋亡过程中PTEN、p-Akt变化及姜黄素与PD98059联合作用对上述蛋白表达的影响 |
| 一 材料与方法 |
| 二 结果 |
| 三 讨论 |
| 四 小结 |
| 参考文献 |
| 第四章 miR-21与靶基因PTEN关系的初步验证 |
| 一 材料与方法 |
| 二 结果 |
| 三 讨论 |
| 四 小结 |
| 参考文献 |
| 第五章 姜黄素对MNNG诱导胃粘膜上皮细胞GES-1恶性转化的影响 |
| 一 材料与方法 |
| 二 结果 |
| 三 讨论 |
| 四 小结 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 缩写词简表 |
| 致谢 |
| 成果 |
（3）胃痞消体外抑制胃癌前病变细胞和胃癌SGC7901细胞上皮-间质转化的机制（论文提纲范文）
| 材料 |
| 1.细胞 |
| 2.药品与试剂 |
| 3.仪器 |
| 方法 |
| 1.SGC7901细胞和GES-1细胞的传代培养 |
| 2.胃痞消冻干粉制备 |
| 3.MNNG诱导GES-1细胞GPLCs模型的复制与鉴定方法 |
| 4.MNNG对SGC7901细胞生长的影响 |
| 5.GPLCs的胃痞消最大无毒浓度测定 |
| 6.SGC7901细胞的胃痞消最大无毒浓度测定 |
| 7.促炎细胞因子（CCL2）及TGF-β与MNNG协同对GES-1细胞存活率的影响 |
| 8.胃痞消对GPLCs和SGC7901细胞迁移的影响 |
| 9.胃痞消对GPLCs细胞增殖及EMT分子标志物mR NA表达的影响 |
| 10.统计学方法 |
| 结果 |
| 1.MNNG及胃痞消对细胞增殖的影响 |
| 2.急性高浓度MNNG诱导GES-1细胞癌前病变结果 |
| 3.不同浓度MNNG对GES-1细胞EMT的影响 |
| 4.TGF-β及CCL2与MNNG协同诱导GES-1细胞的影响 |
| 5.不同浓度MNNG对SGC7901胃癌细胞EMT的影响 |
| 6.胃痞消对SGC7901细胞迁移力的影响 |
| 7.各组细胞MMP2、VIMENTIN、Snail基因表达情况 |
| 8.各组细胞E-cad、N-cad、TGF-β2基因表达情况 |
| 9.胃痞消对SGC7901细胞EMT关键分子表达调控的影响 |
| 讨论 |
（4）Prx4作为早期胃癌新标志物的论证研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 方法原理介绍 |
| 1.2.1 适配子-生物素-链霉亲和素磁珠技术提取靶蛋白方法的原理 |
| 1.2.2 细胞诱变技术原理 |
| 第二章 实验材料和方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验细胞 |
| 2.1.2 实验仪器和设备 |
| 2.1.3 实验试剂 |
| 2.1.4 主要试剂盒 |
| 2.1.5 主要试剂配制方法 |
| 2.1.6 引物的设计与合成 |
| 2.2 实验方法 |
| 第一部分 临床试验 |
| 2.2.1 分组 |
| 2.2.2 标准曲线的制作 |
| 2.2.3 临床样本Prx4 表达量检测(ELISA) |
| 2.2.4 临床样本Prx4 表达量检测(western blot) |
| 2.2.5 临床样本Prx4 mRNA表达量检测 |
| 第二部分 Prx4 与胃癌发生、发展相关性的研究 |
| 2.2.6 实验分组 |
| 2.2.7 细胞培养 |
| 2.2.8 细胞学水平观察与分析 |
| 2.2.9 分子水平上Prx4、mRNA各时相上表达量检测 |
| 第三章 实验结果 |
| 3.1 临床试验 |
| 3.1.1 蛋白标志物的提取 |
| 3.1.2 临床样本Prx4 表达量趋势分析结果(western blot) |
| 3.1.3 Prx4 ELISA法检测 |
| 3.1.4 临床样本Prx4 mRNA表达量检测 |
| 3.2 Prx4 与胃癌发生、发展相关性的研究 |
| 3.2.1 细胞培养 |
| 3.2.2 诱变试剂浓度的确定 |
| 3.2.3 细胞诱变过程中形态学观察结果 |
| 3.2.4 细胞诱变各时期相对增殖率检测结果 |
| 3.2.5 细胞学行为观察 |
| 3.2.6 细胞诱变各时期Prx4 表达量检测结果(western blot) |
| 3.2.7 细胞诱变各时期Prx4 表达量检测结果(ELISA) |
| 3.2.8 细胞诱变各时期Prx4 mRNA表达量检测结果 |
| 第四章 讨论与展望 |
| 4.1 讨论 |
| 4.2 展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 在校期间研究成果 |
| 缩略词表 |
| 致谢 |
（5）青蒿素及衍生物预防H.pylori诱导的胃癌的作用及机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 一、流行病学 |
| 二、HP促进胃癌发生发展的机制研究 |
| 三、ART类化合物对HP感染和胃癌治疗的研究进展 |
| 四、研究内容及意义 |
| 第二章 实验研究 |
| 第一节 ART,DHA和ARTS对HP和胃癌细胞生长的抑制实验 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、数据处理 |
| 四、实验结果 |
| 五、小结与讨论 |
| 第二节 ART,DHA和ARTS对HP诱导的炎症反应的抑制作用 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、数据处理 |
| 四、实验结果 |
| 五、小结与讨论 |
| 第三节 ART,DHA和ARTS在体内的抗肿瘤作用 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、数据处理 |
| 四、实验结果 |
| 五、小结与讨论 |
| 第四节 ART,DHA和ARTS在体内对胃癌的预防作用 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、数据处理 |
| 四、实验结果 |
| 五、小结与讨论 |
| 结论与展望 |
| 一、结论 |
| 二、展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间发表论文 |
| 致谢 |
| 统计学审核证明 |
（6）慢性萎缩性胃炎证候分布特点与基于细胞动力学表型的调气活血解毒法治疗慢性萎缩性胃炎机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一、慢性萎缩性胃炎证候研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二、Ezrin在上皮细胞动力学调控中的功能与临床意义 |
| 参考文献 |
| 综述三、Ezrin在胃壁细胞泌酸动力学调控中的功能与临床意义 |
| 参考文献 |
| 第二部分 临床研究 慢性萎缩性胃炎证候分布特点的无监督数据挖掘研究 |
| 研究背景 |
| 研究概述 |
| 研究一、慢性萎缩性胃炎证候要素及类证提取的因子分析与系统聚类分析研究 |
| 研究二、慢性萎缩性胃炎证候要素分布特征的简单对应分析研究 |
| 研究三、慢性萎缩性胃炎证候要素分布特征的最优尺度算法多重对应分析研究 |
| 研究四、慢性萎缩性胃炎核心四诊信息群的关联规则Apriori算法分析研究 |
| 研究五、慢性萎缩性胃炎证候要素提取及分布特征的基于熵的关联系数法模型分析研究 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 实验研究基于细胞动力学表型的调气活血解毒法治疗慢性萎缩性胃炎机制研究 |
| 研究背景 |
| 研究方案概述 |
| 研究一、调气活血解毒法对原代极化培养胃壁细胞酸分泌的调控 |
| 研究二、调气活血解毒法对人永生化胃上皮GES-1细胞、恶性转化人永生化胃上皮MC细胞、人胃腺癌AGS细胞迁移能力的调控 |
| 研究三、调气活血解毒法对人永生化胃上皮GES-1细胞、恶性转化人永生化胃上皮MC细胞、人胃腺癌AGS细胞活力的调控 |
| 研究四、调气活血解毒法对人胃腺癌AGS细胞侵袭能力的调控 |
| 研究五、调气活血解毒法对恶性转化人永生化胃上皮MC细胞、人胃腺癌AGS细胞Ezrin表达水平、Ezrin Thr567磷酸化水平的调控 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 附录一 |
| 附录二 |
| 附录三 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（7）慢性应激在胃癌发生发展过程中的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中英文对照及缩略词表(Abbreviations) |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 慢性应激促进胃癌发生的作用及机制研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分 慢性应激促进胃癌发展的作用及机制研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第三部分 肾上腺素受体阻滞剂在胃癌治疗中的作用研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 全文小结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 致谢 |
（8）低浓度MNNG诱导GES-1细胞过程中Shh信号通路的动态观察（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略语 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
（9）Shh、Gli-1在经低浓度MNNG转化的GES-1细胞中的表达及意义（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 细胞培养 |
| 1.2.2 细胞分组及处理方法 |
| 1.2.3 Shh、Gli-1mRNA的RT-PCR的检测 |
| 1.2.4 Shh、Gli-1蛋白表达的免疫细胞化学检测 |
| 1.2.5 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 GES-1和MC细胞中Shh、Gli-1mRNA的检测 |
| 2.2 GES-1和MC细胞中Shh、Gli-1蛋白的ICC检测 |
| 3 讨论 |
（10）益气活血清热法治疗慢性萎缩性胃炎癌前病变的疗效评价及分子机理研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语表 |
| 前言 |
| 第一部分 文献研究 |
| 1. 历代医家对CAG癌前病变的认识 |
| 1.1 病名病位 |
| 1.2 病因病机 |
| 1.3 治法治则 |
| 2. 现代中医对CAG癌前病变的研究 |
| 2.1 病因病机 |
| 2.2 治疗方法 |
| 3. 现代医学对CAG癌前病变的研究 |
| 3.1 CAG癌前病变的分子生物学研究 |
| 3.2 CAG癌前病变与Hp感染的关系 |
| 3.3 治疗进展 |
| 第二部分 临床研究 |
| 1. 病例选择 |
| 1.1 诊断标准 |
| 1.2 纳入标准 |
| 1.3 排除标准 |
| 1.4 退出试验病例标准 |
| 2. 治疗方法 |
| 3. 观察项目 |
| 3.1 临床症状 |
| 3.2 胃镜检查 |
| 3.3 病理表现 |
| 4. 疗效标准 |
| 5. 数据分析及统计处理 |
| 6. 病例资料 |
| 6.1 两组患者治疗前一般情况 |
| 6.2 两组患者主要临床症状分布情况 |
| 6.3 两组患者胃镜征象情况 |
| 6.4 两组患者病理表现情况 |
| 7. 结果 |
| 7.1 综合疗效比较 |
| 7.2 临床疗效比较 |
| 7.3 胃镜疗效比较 |
| 7.4 病理疗效比较 |
| 第三部分 实验研究 |
| 1. 实验材料 |
| 2. 兔含药血清的制备 |
| 3. GES-1细胞的培养及传代 |
| 4. MNNG致GES-1恶性转化细胞模型的建立(MC细胞的获得) |
| 5. MTT法检测仁术健胃颗粒兔含药血清对MC细胞生长的影响 |
| 6. Hoechst33258荧光染料检测仁术健胃颗粒兔含药血清对MC细胞凋亡的影响 |
| 7. 仁术健胃颗粒兔含药血清对MC细胞Fas、Bcl-2表达的影响 |
| 8. 仁术健胃颗粒兔含药血清对MC细胞CDK4、P16表达的影响 |
| 9. 结果 |
| 第四部分 讨论 |
| 1. 仁术健胃颗粒组方依据 |
| 2. 临证体会 |
| 2.1 病证结合,注重舌苔脉象 |
| 2.2 扶正固本,当以健脾为先 |
| 2.3 祛邪治标,慎用攻逐之品 |
| 2.4 调摄生活,不忘随访监测 |
| 3. 胃癌前病变细胞(MC细胞)模型建立的体会 |
| 4. 仁术健胃颗粒兔含药血清干预MC细胞作用机制的探讨 |
| 4.1 促进胃癌前病变细胞的凋亡 |
| 4.2 调控胃癌前病变细胞的周期 |
| 5. 不足及展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
四、三七总皂甙对甲基硝基亚硝基胍转化的人胃粘膜上皮细胞GES-1原癌基因表达的影响（论文参考文献）
- [1]健脾化瘀解毒法调节NF-κB活性抑制胃“炎-癌”转化细胞迁移机制研究[D]. 李思怡. 广州中医药大学, 2021
- [2]miR-21/PTEN/Akt通路在姜黄素抗胃癌中的作用以及PD98059的抗胃癌协同效应[D]. 强占荣. 南方医科大学, 2019
- [3]胃痞消体外抑制胃癌前病变细胞和胃癌SGC7901细胞上皮-间质转化的机制[J]. 李思怡,赵自明,潘华峰,刘永强,王奇,郑嘉怡,樊湘珍. 中华中医药杂志, 2019(08)
- [4]Prx4作为早期胃癌新标志物的论证研究[D]. 邵明洋. 兰州大学, 2017(12)
- [5]青蒿素及衍生物预防H.pylori诱导的胃癌的作用及机制[D]. 李方园. 广州中医药大学, 2016(05)
- [6]慢性萎缩性胃炎证候分布特点与基于细胞动力学表型的调气活血解毒法治疗慢性萎缩性胃炎机制研究[D]. 张寅. 北京中医药大学, 2015(08)
- [7]慢性应激在胃癌发生发展过程中的作用及机制研究[D]. 支小飞. 南京医科大学, 2015(05)
- [8]低浓度MNNG诱导GES-1细胞过程中Shh信号通路的动态观察[D]. 孟鹏鹏. 山西医科大学, 2011(08)
- [9]Shh、Gli-1在经低浓度MNNG转化的GES-1细胞中的表达及意义[J]. 孟鹏鹏,闫慧明,冯广跃. 中国医疗前沿, 2011(02)
- [10]益气活血清热法治疗慢性萎缩性胃炎癌前病变的疗效评价及分子机理研究[D]. 孙惠丽. 南京中医药大学, 2010(04)
标签：原癌基因论文; 上皮细胞论文; 萎缩性胃炎的治疗论文; 姜黄素论文; 胃癌论文;