一、血管内皮生长因子在食管鳞癌组织中的表达（论文文献综述）
张文宇[1]（2021）在《基质金属蛋白酶-2和血管内皮生长因子在食管鳞癌中的表达及其与预后的关系》文中研究表明目的分析基质金属蛋白酶（MMP）-2、血管内皮生长因子（VEGF）在食管鳞癌中的表达及其与预后的关系。方法收集2015年1月至2016年2月在郑州市第九人民医院接受治疗的146例食管鳞癌患者的癌组织及同期在郑州市第九人民医院体检正常的60例健康者的食管组织作为研究对象。使用免疫组化法检测组织中MMP-2、VEGF的表达水平,并以COX多因素回归分析及生存曲线分析其与患者临床病理特征及预后的关系。结果食管鳞癌患者组织中MMP-2阳性率（53.42%）高于正常组织（8.33%）（P<0.05）;VEGF阳性率（78.77%）高于正常组织（18.33%）（P<0.05）。相关性检验显示MMP-2、VEGF在食管鳞癌组织中的表达具有相关性（χ2=7.086,P<0.05）;MMP-2、VEGF的阳性表达与食管鳞癌患者TNM分期、分化程度、浸润程度及淋巴结是否转移有关（P<0.05）,与性别、年龄、肿瘤大小无关（P<0.05）。对146例食管鳞癌患者进行为期5 a的随访,结果显示MMP-2阳性组生存率[19.23%（15/78）]低于阴性组[61.54%（48/78）],差异有统计学意义（P<0.05）;VEGF阳性组生存率[33.04%（38/115）]低于阴性组[80.65%（25/31）],差异有统计学意义（P<0.05）。COX多因素回归分析结果显示,MMP-2、VEGF阳性表达为影响食管鳞癌患者生存期的独立危险因素（P<0.05）。结论食管鳞癌组织中MMP-2、VEGF均呈阳性表达,且具有相关性,其表达水平与TNM分期、分化程度、浸润程度及淋巴结是否转移有关,为影响食管鳞癌患者预后的独立危险因素,有望成为预测食管鳞癌患者预后的有效指标。
唐晟杰[2]（2021）在《VEGFR-3、MCM2的表达及D2-40标记的MLVD与食管鳞癌预后相关性分析》文中进行了进一步梳理目的:检测血管内皮生长因子受体-3（VEGFR-3）及微小染色体维持蛋白2（MCM2）在食管鳞癌和正常食管组织中的表达,研究食管癌和正常食管组织淋巴管内皮细胞标记分子单克隆抗体（D2-40）标记的微淋巴管密度（MLVD）,并探讨三者与食管鳞癌临床病理特征及预后的关系,为临床预测食管鳞癌淋巴转移提供有意义的实验依据。方法:收集遂宁市中心医院2015年50例具有完整临床资料的手术食管鳞癌组织及20例正常食管组织标本,应用免疫组织化学染色技术检测VEGFR-3与MCM2在蛋白水平的表达,同时计算D2-40标记的微淋巴管密度（MLVD）,并结合患者临床资料,运用x2检验、Fisher确切概率法探究三者与临床病理特征相关性,进一步通过Kaplan-Meier法及R语言survival包分析三者与食管鳞癌患者预后相关性,并绘制生存曲线,最后应用Spearman相关分析及log-rank test组间比较探讨了V EGFR-3及MCM2表达与D2-40标记的MLVD的关系。结果:1.VEGFR-3阳性表达率为58%,显着高于癌旁正常组织,其表达与淋巴结转移有关,而与患者年龄、性别、肿瘤部位、临床分期、分化程度、吸烟史、T分期无关;29例VEGFR-3高表达的食管鳞癌患者平均生存时间为26.75个月,相较于低表达组（39.75个月）具有明显统计学意义（P<0.01）,且两组3年、5年的生存率对比差异有统计学意义（P<0.05）。在VEGFR-3高表达组中,D2-40标记的MLVD阳性表达率为93.1%,高于低表达组52.4%,差异有明显统计学意义（P<0.01）,VEGFR-3表达和D2-40标记的MLVD之间存在正相关关系。2.MCM2阳性表达率为74%,显着高于癌旁正常组织,其表达与临床分期、淋巴结转移、N分期有关,与患者年龄、性别、肿瘤部位、分化程度、吸烟史无关;37例MCM2高表达组食管鳞癌患者平均生存时间为28.05个月,相较于低表达组（44.00个月）具有统计学意义（P<0.05）,且两组3年、5年生存率比较差异具有统计学意义（P<0.05）。MCM2高表达组中,MLVD阳性表达率为78.4%,高于低表达组61.5%,差异无统计学意义（P>0.05）,并证实MCM2和MLVD值之间不存在相关关系。3.D2-40标记的MLVD阳性率为76.0%,显着高于癌旁正常组织。其表达与淋巴结转移有关,而与患者年龄、性别、肿瘤部位、临床分期、分化程度、吸烟史、T分期无关。38例MLVD阳性的食管鳞癌患者平均生存时间为28.84个月,相较于阴性组（42.83个月）具有统计学意义（P<0.05）,且两组3年、5年生存率比较差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:本研究发现食管鳞癌中VEGFR-3、MCM2及D2-40标记的MLVD均较癌旁正常食管组织明显上调,且与肿瘤淋巴结转移密切相关,与生存期呈负相关,并证实了VEGFR-3和D2-40标记的MLVD存在正相关关系,提示三者在食管鳞癌发生发展及预后中起重要作用,但本研究仍存在一些潜在的局限性,研究对象数量的限制需要多中心大样本分析证实结果,尽管有上述不足,但本研究为食管鳞癌的早期诊断、进展监测、预后评估以及寻找新的治疗靶点提供新思路。
沈智敏[3]（2021）在《白细胞介素1受体拮抗剂通过调控MMP9和VEGF-C抑制食管鳞癌淋巴结转移的机制研究》文中研究表明背景:中国是食管癌的高发国家之一,中国食管癌患者病理类型有95%为食管鳞癌（Esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）。中国食管鳞癌具有高发病率、高死亡率和低生存率的“两高一低”的流行病学特点。近年来,随着手术治疗、放化疗、靶向治疗和免疫治疗的改进和突破,食管鳞癌的治疗方式日益多样,但仍未能明显提高食管鳞癌患者的生存预后。因此探索更具有诊断和治疗意义的靶标仍是食管鳞癌研究的热点方向。我们前期在食管鳞癌蛋白D-2质谱分析中发现白细胞介素1受体拮抗剂（Interleukin 1 receptor antagonist,IL-1RA）蛋白在食管鳞癌中表达降低,但其在食管鳞癌中的作用及其机制仍未明确。方法:1.通过全转录组高通量测序检测5对食管鳞癌组织及对应的癌旁组织中的差异表达基因,并对筛选出的差异基因进行生物信息组学分析。2.运用RT-qPCR和Western Blotting方法检测IL-1RA在8对食管鳞癌及其相对应的癌旁组织表达情况,利用免疫组化技术检测76对食管鳞癌及癌旁组织中IL-1RA的表达水平并结合临床资料探索IL-1RA表达水平对食管鳞癌患者临床分期、淋巴结转移及预后的影响。3.运用慢病毒过表达技术构建食管鳞癌IL-1RA过表达的稳转细胞株,通过Western Blotting和RT-qPCR验证IL-1RA过表达效果。4.通过CCK8细胞、平板克隆形成实验和裸鼠皮下成瘤实验检测IL-1RA过表达对食管鳞癌细胞增殖能力的影响;通过细胞划痕实验,Trans-well迁移实验和裸鼠尾静脉注射实验研究IL-1RA过表达对食管鳞癌细胞转移能力的影响;通过淋巴管成环、淋巴管迁移实验和动物实验检测IL-1RA对肿瘤淋巴管生成的影响。5.通过全转录组测序结合GO功能分析、KEGG信号通路分析检测IL-1RA表达改变对食管鳞癌基因的转录的影响,并预测其具体机制。6.通过RT-qPCR、Western Blotting方法检测IL-1RA对食管鳞癌细胞PI3K/NF-κB信号通路相关蛋白（PI3K、p-PI3K,NF-κB、p-NF-κB）、基质金属蛋白酶家族（MMP2、MMP9和MMP13）的影响;通过和ELISA实验检测IL-1RA对淋巴管生成调控因子（VEGF-A/B/C/D、HIF-1α和COX-2）表达和分泌的影响;7.通过MMP9回补实验验证IL-1RA通过调控MMP9的表达抑制食管鳞癌EMT进展;8.通过Anakinra给药实验评估Anakinra对食管鳞癌的治疗效应。结果:1.全转录组测序分析及生物数据库数据均提示IL-1RA在食管鳞癌中表达降低。2.临床组织验证结果显示IL-1RA表达降低与食管鳞癌较差的临床分期、阳性淋巴结转移及较差的预后密切相关。3.体外细胞实验和体内裸鼠功能实验发现,与阴性对照组相比,IL-1RA过表达后,食管鳞癌细胞的增殖能力和迁移能力都均受抑制。4.食管鳞癌细胞中过表达IL-1RA能通过抑制MMP9的表达进而抑制食管鳞癌EMT进展。5.食管鳞癌细胞中过表达IL-1RA能通过PI3K/NF-κB通路抑制VEGF-C的基因的转录,进而抑制EVGF-C的表达和分泌,抑制肿瘤诱导的淋巴管生成。6.白细胞介素1受体拮抗剂药物Anakinra能在裸鼠体内抑制食管鳞癌淋巴管生成,进而抑制食管鳞癌的增殖和转移。结论:1.IL-1RA在食管鳞癌中表达降低,且其降低水平与食管鳞癌的临床分期、淋巴结转移及预后密切负相关。2.IL-1RA能通过调控MMP9的介导EMT进程和受PI3K/NF-κB/VEGF-C调控的淋巴管生成抑制食管鳞癌的淋巴结转移。3.Anakinra能抑制食管鳞癌的增殖和转移,可能是食管鳞癌治疗的有效药物。
边帅[4]（2021）在《GNL3L在食管鳞癌进展中的作用及机制的研究》文中指出背景:食管癌（Esophageal Cancer,EC）在全球癌症死亡率中排名第六,5年生存率不到20%,中位生存时间不足1年。基于流行病学和病理学研究,将食管癌分为食管鳞状细胞癌（Esophageal Squamous Cell Carcinoma,ESCC）和食管腺癌（Esophageal Adenocarcinoma,EAC）两种不同的类型。其中最常见的类型是食管鳞癌,约占发病总数的90%以上。尽管通过非侵入性筛查和内镜技术可早期发现病变并采取治疗措施,但仍有近半数食管癌患者确诊时已经发生转移或失去手术机会。食管癌对化疗敏感性差,现有分子靶向药物的应用也未能显着延长疾病晚期患者的生存时间。因此,特别有必要深入研究食管癌发生和进展的分子机制,不仅能够开发新的靶点用于药物研究,也能够为食管癌早期预警和预测患者预后提供新的标志物,从而更好地指导治疗和改善患者预后。鸟嘌呤核苷酸结合蛋白样3-样蛋白（Guanine Nucleotide-Binding Protein-Like3-Like,GNL3L）是一种新的、进化上保守的结合GTP的核仁蛋白,属于GTP酶HSR1-MMR1亚家族成员。近年来,GNL3L在细胞增殖和细胞凋亡中扮演的角色逐渐受到重视。现有文献已经在人类乳腺癌、子宫颈癌、肝细胞癌、胃腺癌、结直肠癌和脑胶质瘤细胞中探究了GNL3L在肿瘤发生和进展中扮演的角色。例如,在结直肠癌中,miR-4454的过表达抑制了GNL3L的产生,并通过NF-κB途径改善了肿瘤耐药性问题。然而关于GNL3L在食管鳞癌细胞中的作用和起作用的信号途径,还未见详细研究。因此,本研究旨在探究GNL3L在食管鳞癌组织中的表达,及其在食管鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡中的生物学功能,初步阐明其作用机理,为食管鳞癌的靶向治疗和疾病预测提供新的策略及相应理论依据。方法:（1）GNL3L在食管鳞癌中的差异表达及临床价值1)通过GEPIA数据库（Gene Expression Profiling Interactive Analysis）分析GNL3L在食管鳞癌组织及正常组织中表达水平和对患者预后的影响。2)通过Linked Omics进行相关性分析进一步确认GNL3L的临床价值;应用富集分析相关基因以预测可能的信号通路。（2）GNL3L在食管鳞癌进展中的生物学功能1)分别用GNL3L干扰RNA、GNL3L过表达质粒及阴性对照载体转染Eca-109和KYSE-150细胞,建立GNL3L敲低和过表达食管鳞癌细胞系。2)应用Western Blot实验确认细胞系建立成功后,分别在CCK8、克隆形成、细胞划痕、Transwell实验和流式细胞术中研究敲低和过表达GNL3L对食管鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的作用。采用Western Blot实验检测敲低GNL3L对凋亡途经关键蛋白（Bcl-2,Bax和Caspase3-p17）表达水平的影响。3)采用人源性食管鳞癌裸鼠皮下肿瘤模型,分为阴性对照组（NC）、敲低组（GNL3L-KD）和过表达组（GNL3L-OE）。记录肿瘤大小和重量的变化情况。（3）探究GNL3L影响食管鳞癌进展的相关信号通路1)Western Blot检测RAS通路相关蛋白的表达变化。2)天然RAS信号通路抑制剂抗瘤酮A10处理过表达GNL3L的细胞,CCK8实验研究增殖的改变,流式细胞术研究凋亡的改变。（4）统计学方法本研究所有体外实验均独立重复3次,实验数据用Mean±SD表示,绘图及统计分析应用Graph Pad Prism 7软件,P值小于0.05被认为有统计学意义。结果:（1）GNL3L在人食管鳞癌组织中的差异表达及临床价值GNL3L在人食管鳞癌组织中高表达,较短的总生存期与GNL3L高水平表达有关,GNL3L表达水平还与肿瘤切除率和种族有关。GNL3L相关基因在肿瘤凋亡通路和RAS信号通路有丰富的表达。（2）GNL3L影响食管鳞癌的增殖、迁移、侵袭和凋亡敲低GNL3L对食管鳞癌细胞的增殖、迁移、侵袭有抑制作用;而过表达GNL3L具有促进作用。敲低细胞中的GNL3L促进凋亡,而过表达GNL3L抑制凋亡,这一作用是通过Bcl-2/Bax轴和Caspase级联反应实现的。在人源性食管鳞癌裸鼠皮下移植肿瘤模型中进一步证实,敲低GNL3L抑制肿瘤生长,过表达GNL3L产生促增殖作用。（3）GNL3L通过RAS通路影响食管鳞癌的生物学行为敲低和过表达GNL3L分别减少和增加RAS通路蛋白Ras和Raf的表达。用抗瘤酮A10处理过表达GNL3L的食管鳞癌细胞发现,GNL3L对细胞的促增殖作用和抗凋亡作用均被抑制。结论:本研究表明,GNL3L在食管鳞癌组织中异常高表达且与患者预后相关;GNL3L的表达水平影响食管鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,抵抗凋亡;GNL3L的表达水平影响RAS通路蛋白的表达,天然RAS通路抑制剂抗瘤酮A10可抑制GNL3L的促增殖和抗凋亡作用,GNL3L可能通过RAS信号通路发挥生物学功能;通过人源性食管鳞癌裸鼠皮下移植肿瘤模型,进一步证实GNL3L具有促进肿瘤生长的作用。
王兵[5]（2021）在《MTDH在食管鳞癌组织及血清中的表达及其临床预后相关性的实验研究》文中提出目的:食管癌是全世界恶性肿瘤中发病和死亡排名前十之一的肿瘤,疾病早期诊断不易,患者预后较差。近年来研究发现异粘蛋白（Metadherin,MTDH）在人类多种癌症中上调,被报道与人类多种癌症的发生发展密切相关。然而,MTDH在人食管鳞状细胞癌（Esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）中的功能意义还不明晰。本研究拟探讨MTDH在ESCC组织和血清中的作用和机制。方法:1.通过生物信息学分析GEO等多种数据库筛选出人ESCC中的差异表达基因MTDH及其与人ESCC中的共表达基因。2.公共数据库明确MTDH在食管癌组织中与正常食管黏膜组织的差异表达,并探索MTDH高低表达是否与患者临床特征有关联。3.应用公共数据库分析MTDH的表达水平与食管癌患者生存的关系。4.将前期得到的差异基因应用R软件进行GO和KEGG富集分析,预测MTDH在人体ESCC中的分子生物学机制。5.公共数据库分析绘制蛋白共表达网络图和MicroRNA表达相关的热图。6.分析与信号通路、共表达蛋白网络的基因以及MicroRNA的相关性。7.应用QRT-PCR、免疫组化实验或酶联免疫吸附实验对ESCC患者的组织和血清的MTDH水平进行检测,并分析其与患者临床特征是否有关联。8.应用统计学中的Kaplan-Meier方法来分析MTDH的表达水平与ESCC患者预后生存的关系,并绘制总生存期和疾病无进展生存期的生存曲线。9.使用COX比例风险模型分析ESCC患者预后风险因素。10.分析其作为ESCC血清诊断标志物的诊断效能,并绘制ROC曲线。结果:1.生信分析显示,MTDH是ESCC的差异表达基因,其在ESCC中显着上调,并且与肿瘤分期及预后生存相关,MTDH高表达的食管癌患者比低表达患者的OS和DFS更短,均有统计学差异（P<0.05）。并预测其参与肿瘤发展的多条信号通路及多项生物过程和功能,并与多种蛋白、MicroRNA相互联系,均有统计学差异（P<0.05）。2.ESCC组织中MTDH的mRNA及蛋白水平均高于癌旁组织（P<0.05）。与患者的G分级、T分期、N分期、M分期及p TNM分期显着相关（P<0.05）,与年龄、性别、饮酒史、吸烟史、肿瘤位置以及肿瘤最大直径均无关（P>0.05）。3.MTDH阳性表达患者的OS为16.262±0.855个月,DFS为14.943±0.981个月;而MTDH阴性表达患者的OS为20.533±1.278个月,DFS为19.857±1.436个月;MTDH表达阳性者的OS（P=0.014）和DFS（P=0.029）均显着低于MTDH表达阴性者。单因素分析显示,MTDH表达（P=0.007）、T分期（P=0.013）、N分期（P=0.028）、M分期（P=0.041）和p TNM分期（P=0.016）显着影响了ESCC患者的预后生存;多因素分析显示,MTDH是独立影响ESCC患者预后生存的危险因素（P=0.020）。4.ESCC患者血清中MTDH和SCC浓度高于健康体检者（P<0.05）。血清MTDH与患者的T分期、N分期、M分期及p TNM分期显着相关（P<0.05）;且血清SCC与患者的N分期、M分期及p TNM分期显着相关（P<0.05）;而与其它的因素均无明显相关性。5.ESCC死亡组患者血清中MTDH浓度高于存活组患者（P<0.001）。6.ROC分析显示,MTDH单独检测、SCC单独检测及两者联合检测的AUC值分别为0.850、0.821和0.927,具有统计学差异（P<0.05）。结论:1.ESCC组织和血清中MTDH表达显着增高,表达的高低与ESCC的G分级、T分期、N分期、M分期、pTNM分期及患者预后不良相关,并且MTDH的高表达是影响ESCC患者预后生存的独立危险因素,血清中MTDH表达可能作为辅助诊断ESCC的生物标志物。2.MTDH在人体内可能参与肿瘤发展的多条信号通路及多项生物学过程和功能,并与多种蛋白、MicroRNA相互联系。3.MTDH参与ESCC的发生发展,是ESCC诊断、治疗以及预测预后的潜在生物标志物。
谢波[6]（2020）在《HGF通过激活PI3K/AKT信号通路促进食管鳞癌发生和发展机制的研究》文中认为背景食管癌是全球第八大最常见的恶性肿瘤,死亡率在所有类型的肿瘤中排在第六位,且发生率因地域而异。食管癌主要分为鳞状细胞癌（Esophagus Squamous Cell Carcinoma,ESCC）和腺癌。中国是食管癌的高发地区,90%以上的食管癌是ESCC。由于食管癌早期症状不明显,大多数患者在确诊时都已经是中晚期,已经发生淋巴转移和组织浸润,这也是食管癌患者预后不佳的主要原因。尽管在食管癌综合治疗方面取得了一定的进展,但总体存活率仍然很低,五年存活率仅为15-34%。到目前为止,影响食管癌的发展及预后的因素仍然不清楚。因此,寻找食管癌发病和进展的关键分子,完善食管癌发生和发展的分子机理,为食管癌的诊断和治疗提供新的靶点和方向,寻找出食管癌诊断、治疗以及预后的的生物标志物仍然是迫切需要的,对于临床诊断、提供治疗策略具有重大意义。肝细胞生长因子/c-间叶-上皮转化受体酪氨酸激酶（Hepatocyte Growth Factor/c-mesenchymal-epithelial transition receptor tyrosine kinase,HGF/c-MET RTK）信号通路在正常组织中处于失活状态,而在多种类型的恶性肿瘤中则异常激活。相关研究证实抑制HGF/c-MET信号通路可以作为治疗多种癌症类型的有效策略,如非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）肝癌、胃癌、结直肠癌、卵巢癌、膀胱癌、头颈癌、子宫内膜癌等。但是HGF在食管鳞癌中的作用少见报道,我们在前期的工作中发现HGF作为一种多功能的细胞因子,在ESCC中与cyclin E协同高表达,且与ESCC的分化程度、TNM分期密切有关,影响着患者的预后。因此为了研究HGF对ESCC发生和发展的影响及其参与的具体分子机理,从而为临床诊断、治疗ESCC提供新的靶点。本研究主要通过分子信息学研究和体内外实验来探讨HGF对ESCC的影响及其分子机理。第一部分HGF在食管癌中的表达及意义目的:本部分研究主要分析ESCC中的基因表达图谱以及影响其发生和发展的信号通路方法:首先利用RNA-seq方法分析ESCC患者食管癌组织及癌旁组织中的基因表达差异,筛选与ESCC相关基因并分析HGF在食管癌中表达情况,KEGG信号通路分析预测了所筛选基因在与癌症相关信号通路中的富集情况,并利用Real-Time PCR对测序结果进行进一步的验证。进一步利用TCGA数据库分析食管癌中HGF与cyclin E的表达是否存在协同性以及HGF表达高低与患者肿瘤分期和预后的关系。最后利用Real-Time PCR、Western blotting和免疫组化等分子生物学手段分析HGF在ESCC组织及癌旁组织的表达情况。结果:我们发现29个基因在食管癌组织中呈高表达,4个基因在食管癌组织中呈低表达,其中HGF和cyclin E在食管癌组织中均呈高表达。通过KEGG信号通路分析发现PI3K/AKT信号通路在食管癌组织中是激活最明显的信号通路。Real-Time PCR进一步验证了通过RNA-seq分析出的差异表达基因,HGF、cyclin E基因在食管癌组织中均表达上调（p<0.05）。通过TCGA数据库分析发现与对应的癌旁组织相比,食管癌组织中HGF和cyclin E呈高表达并且存在协同性（p<0.01）。TCGA数据库分析结果发现:HGF低表达的食管癌患者的无进展生存期和总体生存时间显着优于对照组,食管癌组织中的HGF表达水平越高,肿瘤的病理分期越晚（p<0.05）。Real-Time PCR、Western blotting和免疫组化等分子生物学分析结果发现,与对应的癌旁组织相比,ESCC组织中的HGF无论是mRNA水平还是蛋白水平呈高表达（p<0.05）。结论:HGF广泛存在食管癌肿瘤细胞中,并且可能通过参与PI3K/AKT信号通路影响食管癌的发生发展,并随着肿瘤的进展HGF的表达也逐渐增加,与患者的无病生存期及总生存时间呈负相关。第二部分 HGF对食管鳞癌细胞生物学功能的影响目的:本部分研究主要探究HGF对ESCC细胞生物学功能的影响,从而为临床将HGF作为ESCC治疗靶点提供新的理论基础。方法:本部分从ESCC细胞水平探究HGF对细胞存活、增殖、侵袭、凋亡以及肿瘤形成的影响。首先,选取2个ESCC细胞系,Real-Time PCR分析HGF基因表达情况,将细胞系分为HGF低表达和高表达,并利用Real-Time PCR、Western blotting和免疫荧光分别从mRNA水平和蛋白水平分析了两个细胞系中HGF的表达和定位。Western blotting 方法检测了 EC9706 和 KYSE-2 中 E-cadherin、N-cadherin和vimentin的表达情况。然后在HGF高表达的细胞系中利用shRNA敲低HGF的表达,在HGF低表达的细胞系中利用cDNA过表达HGF。利用CCK-8试验检测HGF表达变化对ESCC细胞活性的影响;利用克隆形成试验检测HGF表达变化对ESCC细胞增殖的影响;流式细胞仪检测两组细胞系细胞周期;Western blotting检测了 HGF表达变化对ESCC细胞周期相关蛋白表达的影响;Annexin V试验检测两组细胞系细胞凋亡;利用Western blotting检测了 HGF表达变化对ESCC细胞凋亡相关蛋白表达的影响;Real-Time PCR、Western blotting方法检测了过表达和敲低HGF后细胞系中E-cadherin、N-cadherin和vimentin的表达情况;Transwell试验检测过表达和敲低HGF后细胞系中ESCC细胞迁移和侵袭情况;小鼠皮下移植瘤模型探究过表达和敲低HGF后细胞系ESCC细胞肿瘤形成的情况;HE染色和Tunel试验观察小鼠肿瘤组织细胞的凋亡情况。分析HGF表达的改变对细胞存活、增殖、侵袭、凋亡以及肿瘤形成的影响。结果:Real-Time PCR和实验结果发现,HGF在KYSE-2细胞系中呈低表达,在EC9706细胞系中呈高表达（p<0.01）。Western blotting检测发现EC9706中HGF的蛋白表达水平显着高于KYSE-2（p<0.05）。鉴定HGF高表达与低表达细胞系后,我们利用免疫荧光对两个细胞系中HGF的表达定位进行了分析,结果发现在HGF高表达的EC9706中,HGF主要定位在核里;在HGF低表达的KYSE-2中,HGF主要定位在胞质中。Western blotting检测结果显示与HGF低表达的KYSE-2相比,HGF高表达的EC9706中E-cadherin表达较低,而N-cadherin和vimentin表达较高（p<0.05）,提示HGF高表达的ESCC细胞系更容易发生EMT。利用CCK-8试验检测HGF表达变化对ESCC细胞活性的影响,结果发现HGF的过表达能够显着提高细胞的活性（p<0.05）;与之相反,HGF的敲低能够显着抑制细胞的活性（p<0.05）。克隆形成试验检测结果发现,HGF的过表达能够显着促进细胞的增殖（p<0.01）;HGF的敲低能够显着抑制细胞的增殖（p<0.01）。流式细胞仪检测结果发现,HGF过表达后细胞处在S期的比例显着增多,G1期比例显着减少（p<0.01）;在EC9706中敲低HGF的表达,结果发现HGF的敲低细胞处在S期的比例显着减少,G1期比例显着增多（p<0.05）。Western blotting方法检测HGF表达变化对ESCC细胞周期相关蛋白表达的影响,结果发现HGF过表达能够显着促进KYSE-2中PCNA和Cyclin D1的表达（p<0.05）;HGF的敲低能够显着抑制EC9706中PCNA和Cyclin D1的表达（p<0.05）。利用Annexin V试验检测HGF表达变化对ESCC细胞凋亡的影响,结果发现HGF过表达后细胞凋亡的比例显着减少（p<0.05）;HGF的敲低细胞凋亡比例显着增多（p<0.05）。随后,我们利用Western blotting检测了 HGF表达变化对ESCC细胞凋亡相关蛋白表达的影响,结果发现HGF过表达能够显着抑制KYSE-2中Caspase-7和Caspase-9的表达（p<0.05）;HGF的敲低能够显着促进 EC9706 中 Caspase-7和Caspase-9 的表达（p<0.05）。利用 Real-Time PCR、Western blotting和免疫荧光等分子生物学手段检测HGF表达变化对ESCC细胞EMT相关蛋白表达的影响,结果发现与HGF的过表达后HGF主要聚集在KYSE-2细胞核内,并且能够抑制E-cadherin的表达,促进N-cadherin和vimentin的表达（p<0.05）;HGF的敲低后HGF主要分布在EC9706细胞胞质中,并且能够促进 E-cadherin 的表达,抑制 N-cadherin和vimentin 的表达（p<0.05）。Transwell试验检测两组细胞系中ESCC细胞侵袭情况结果发现,HGF的过表达能够显着促进细胞的侵袭（p<0.05）;HGF的敲低能够显着抑制细胞的侵袭（p<0.05）。我们通过小鼠皮下移植瘤模型探究HGF表达变化对ESCC细胞肿瘤形成的影响。结果发现HGF的过表达能够显着促进肿瘤的形成和生长（p<0.01）;HE染色和Tunel试验显示HGF的过表达能够显着促进肿瘤组织内细胞的增殖,抑制细胞的凋亡（p<0.01）。HGF的敲低能够显着抑制肿瘤的形成和生长（p<0.01）;HE染色和Tunel试验显示HGF的敲低能够显着抑制肿瘤组织内细胞的增殖,促进细胞的凋亡（p<0.01）。结论:本部分研究我们通过体外细胞实验和体内移植瘤模型证明HGF能够促进ESCC细胞的增殖、存活、侵袭,抑制细胞的凋亡,促进ESCC肿瘤的形成。第三部分HGF影响食管鳞癌细胞生物学性的分子机制目的:本部分研究主要探究HGF影响ESCC细胞生物学性的分子机制。方法:我们首先Western blotting和免疫组化方法检测了 ESCC组织、癌旁组织中HGF及PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达情况;再用Western blotting方法检测了 ESCC细胞系中HGF及PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达情况。随后,我们在两个细胞系中改变HGF的表达,检测PI3K/AKT信号通路的激活情况;Western blotting方法检测了过表达或者敲低HGF的ESCC细胞系中HGF及PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达情况;免疫组化方法检测小鼠皮下移植瘤中HGF及PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达情况。我们在HGF低表达的细胞系中过表达HGF,再利用PI3K抑制剂处理细胞,在HGF高表达的细胞系中敲低HGF的表达,再利用PI3K激动剂处理细胞。利用克隆形成试验检测HGF表达变化对ESCC细胞增殖的影响;Transwell试验检测两组细胞系中ESCC细胞迁移和侵袭情况;小鼠皮下移植瘤模型探究上述细胞系ESCC细胞肿瘤形成的情况。以此观察细胞增殖、侵袭以及肿瘤形成的能力。结果:Western blotting和免疫组化实验结果显示与对应的癌旁组织相比,ESCC组织中HGF呈高表达,PI3K/AKT信号通路中的AKT、mTOR的磷酸化水平显着增高（p<0.05）,且PI3K/AKT信号通路中上游负调控蛋白PTEN的表达显着降低（p<0.05）。Western blotting实验结果显示与KYSE-2细胞系相比,EC9706细胞系中AKT、mTOR的磷酸化水平显着增高,PTEN的表达显着降低（p<0.05）;此外,我们还发现HGF高表达的EC9706细胞系中cycin E的表达也会异常增高（p<0.05）。Western blotting实验结果显示HGF的过表达会显着促进AKT和mTOR的磷酸化水平,显着抑制PTEN的表达,同时会促进cyclin E的表达（p<0.05）;敲低HGF的表达,我们发现AKT和mTOR的磷酸化水平显着降低,PTEN的表达水平显着增高,同时会抑制cyclin E的表达（p<0.05）。小鼠皮下移植瘤免疫组化实验结果显示HGF过表达能够促进肿瘤中AKT的磷酸化,抑制PTEN的表达（p<0.05）;HGF的敲低能够抑制肿瘤中AKT的磷酸化水平,促进PTEN的表达（p<0.05）。克隆形成实验结果发现PI3K抑制剂则会显着抑制细胞克隆的形成（p<0.01）;而PI3K激动剂剂则会显着促进细胞克隆的形成（p<0.01）。Transwell试验结果发现,HGF过表达能够显着促进细胞的侵袭,而HGF过表达+PI3K抑制剂则会显着抑制细胞的侵袭（p<0.05）;HGF敲低能够显着抑制细胞的侵袭,而HGF敲低+PI3K激动剂剂则会显着促进细胞的侵袭（p<0.05）。小鼠皮下移植瘤模型实验结果显示HGF过表达能够显着促进细胞肿瘤的形成,而HGF过表达+PI3K抑制剂则会显着抑制细胞肿瘤的形成（p<0.01）。HGF敲低能够显着抑制细胞肿瘤的形成,而HGF敲低+PI3K激动剂剂则会显着促进细胞肿瘤的形成（p<0.01）。结论:通过本部分研究,我们证明了 HGF主要作用于PI3K/AKT信号通路的上游,抑制PTEN的表达、促进AKT和mTOR的磷酸化,激活PI3K/AKT信号通路,进而促进ESCC细胞的增殖、侵袭和肿瘤的形成。因此,HGF及其调控的PI3K/AKT信号通路可以作为临床ESCC治疗的潜在靶点。
向辉[7]（2020）在《miR-664b-5p对食管癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响》文中认为目的:本课题组前期通过基因芯片技术发现miR-664b-5p在哈萨克族食管鳞癌中表达显着升高,提示miR-664b-5p可能在哈萨克族食管鳞癌发生发展过程中起着重要作用。首先本研究在哈萨克族食管鳞癌组织中验证miR-664b-5p的表达,进一步在细胞水平探讨miR-664b-5p对食管癌细胞EC9706和TE-1生物学行为的影响。方法:（1）通过qRT-PCR检测miR-664b-5p在23例新疆哈萨克族食管鳞癌及30例哈萨克族食管炎福尔马林固定石蜡包埋组织中的表达,分析miR-664b-5p表达与哈萨克族食管鳞癌患者临床病理特征之间的关系。（2）在食管鳞癌细胞株EC9706和TE-1中转染miR-664b-5p模拟物与抑制剂以及其相应的阴性对照,qRT-PCR检测转染效率。通过CCK-8法和平板克隆形成实验检测miR-664b-5p对细胞增殖的影响;Transwell迁移和侵袭实验检测miR-664b-5p对细胞迁移和侵袭的影响;Western Blot检测miR-664b-5p对细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达的影响;流式细胞仪检测过表达miR-664b-5p对细胞细胞周期的影响。（3）通过Targetscan和miRDB数据库预测miR-664b-5p的靶基因,David网站在线分析预测靶基因的GO功能和KEGG通路,STRING网站与Metascape网站构建靶蛋白互作网络,利用Cytoscape的Cyto Hubba插件分析靶蛋白互作网络的核心分子。（4）分析哈萨克族基因芯片中预测靶基因m RNA与miR-664b-5p表达的相关性,通过qRT-PCR检测过表达miR-664b-5p后预测靶基因的表达。结果:（1）与哈萨克族食管炎组织相比,miR-664b-5p在哈萨克族食管鳞癌组织中表达升高（P<0.05）,miR-664b-5p的表达与肿瘤分化程度相关（P<0.05）。（2）miR-664b-5p的过表达抑制了食管鳞癌细胞EC9706和TE-1细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭,促进细胞的凋亡,诱导细胞发生G1期阻滞,而抑制miR-664b-5p的表达则促进了EC9706和TE-1细胞的增殖、迁移和侵袭,抑制细胞的凋亡（P<0.05）。（3）GO分析结果显示miR-664b-5p靶基因的分子功能主要富集在蛋白质结合,生物学过程富集在基因表达的调控,KEGG通路分析显示靶基因主要富集在癌症通路,蛋白互作网络分析显示PIK3R1、KDR、RAC1、FLT1、CRK位于靶蛋白互作网络的核心节点（P<0.05）。（4）基因芯片结果显示哈萨克族食管鳞癌中miR-664b-5p与CCNE2、CDK6表达呈正相关（P<0.05）,qRT-PCR结果显示,在EC9706和TE-1细胞中过表达miR-664b-5p后,CCNE2 m RNA表达显着降低（P<0.05）。结论:（1）miR-664b-5p在哈萨克族食管鳞癌组织中的表达高于哈萨克族食管炎组织,其表达与肿瘤分化程度相关。（2）miR-664b-5p抑制食管鳞癌细胞EC9706和TE-1的增殖,迁移和侵袭,诱导细胞凋亡,CCNE2可能是miR-664b-5p的靶基因。
张显娥[8]（2020）在《KIRREL3在食管鳞癌中的作用及其调控》文中指出目的在全球范围内,食管癌对人类的健康造成了极大的危害,它是第九大常见的癌症及第六大癌症相关死亡原因,主要的病理类型有两种:食管腺癌（EAC,esophageal adenocarcinoma）和食管鳞癌（ESCC,esophageal squamous cell carcinoma）。食管癌的发病具有一定的地域差异,发病的危险因素可能有饮食模式、环境因素及个体遗传倾向等。在发展中国家ESCC是主要的病理类型,在中国ESCC约占食管癌病例的90%,其特点有浸润性、复发性和转移性等。目前,尽管在诊断和治疗方面有所进步,但ESCC患者的生存率仍不令人满意,5年生存率较低,因此,对食管鳞癌发病机制的研究显的尤为重要。本课题组在前期国家自然基金资助下（项目批准号:U1304813）,发现JAK-STAT信号通路的持续激活在炎症诱导的食管鳞癌发生过程中起着关键作用。因此,本课题组使用高磷酸化与低磷酸化STAT3的移植性食管磷癌模型组织进行RNA测序、生物信息学软件分析,筛选出STAT3磷酸化可能调控的KIRREL3 基因。KIRREL3（Kin of Irre-like 3）,又称 NEPH2,是一种免疫球蛋白超家族粘附分子,与突触形成、突触传递和超微结构有关。该基因位于人染色体11q24.2上,具有三个转录本。最初KIRREL3被认为是肾小球狭缝隔膜的一个连接成分,后期研究发现KIRREL3在大脑中也有很强的表达。截止到目前,KIRREL3在肿瘤组织中的表达、调控的信号转导机制以及是否参与调节肿瘤细胞恶性生物学特性的发展,尚不清楚。那么KIRREL3的表达变化是否调控食管鳞癌的分化、侵袭以及发展?STAT3的表达以及磷酸化如何影响KIRREL3的表达?目前关于以上问题未有相关文献报道。为了阐明上述问题,本课题组通过体外和体内实验进行了初步的探讨。体外实验:在食管鳞癌组织芯片中检测KIRREL3的表达;在食管鳞癌细胞中检测KIRREL3、STAT3、p-STAT3 表达,在 KIRREL3、p-STAT3 高表达的细胞中通过加入Stattic抑制剂和姜黄素来抑制p-STAT3的活性,探讨两者的关系;在KIRREL3高表达的细胞中运用siRNA干扰实验和慢病毒感染实验敲低KIRREL3,研究下调KIRREL3对食管鳞癌细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭、周期及凋亡的影响;在KIRREL3低表达的细胞中运用慢病毒感染实验过表达KIRREL3,研究过表达KIRREL3对食管鳞癌细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭的影响。体内实验:通过裸鼠成瘤实验检测KIRREL3的表达对食管鳞癌生长的影响以及与p-STAT3的关系。本课题组将进一步阐明KIRREL3在食管鳞癌中的作用机制,为食管磷癌的早期诊断和治疗提供新的候选靶点,为食管磷癌的发病机制研究奠定理论基础。方法1.运用免疫组织化学方法检测KIRREL3在74例食管鳞癌组织及69例癌旁组织中的表达。2.在食管鳞癌细胞系和正常食管上皮细胞中利用Western blotting检测KIRREL3、STAT3 和 p-STAT3 表达情况。3.探讨下调KIRREL3对食管鳞癌细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭、周期及凋亡的影响。（1）在Eca109和KYSE150细胞中运用siRNA干扰实验和慢病毒感染实验敲低KIRREL3的表达。（2）Western blotting检测siRNA干扰和稳定敲低KIRREL3的效率。（3）CCK-8法检测下调KIRREL3对细胞增殖能力的影响,检测时间点分别为 0h、24 h、48h、72 h、96 h。（4）平板克隆实验检测下调KIRREL3对细胞克隆形成能力的影响。（5）Transwell实验检测下调KIRREL3对细胞侵袭和迁移的影响。（6）流式细胞术检测下调KIRREL3对细胞周期和凋亡的影响。4.探讨过表达KIRREL3对食管鳞癌细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭的影响。（1）在KIRREL3表达相对较低的KYSE30细胞中,用慢病毒感染实验构建KIRREL3过表达细胞株。（2）Western blotting 检测过表达 KIRREL3 的效率。（3）CCK8法检测过表达KIRREL3对细胞增殖的影响,检测时间点分别为0 h、24h、48h、72h、96h。（4）平板克隆实验检测过表达KIRREL3对细胞克隆形成能力的影响。（5）Transwell实验检测过表达KIRREL3对细胞侵袭和迁移的影响。5.探讨 KIRREL3 和 p-STAT3 的关系:在 KIRREL3 和 p-STAT3 高表达的 Eca109、KYSE150细胞中加入不同浓度的Stattic（0、5、10、20μM）和不同浓度的姜黄素（0、4、8、16 μM）,运用Western blotting检测药物处理后KIRREL3和p-STAT3的表达情况。6.裸鼠成瘤实验检测KIRREL3的表达对食管鳞癌生长的影响以及KIRREL3和p-STAT3的关系。（1）选用 KYSE150-shControl、KYSE150-shKIRREL3、Eca109、Eca109-shControl和Eca109-shKIRREL3细胞构建裸鼠移植瘤模型,观察下调KIRREL3对食管鳞癌生长的影响。（2）在Eca109细胞构建的成瘤裸鼠体内腹腔注射siNC（0.5 mg/kg）、siKIRREL3（0.5 mg/kg）,观察下调KIRREL3后对食管鳞癌生长的影响。（3）在Eca109细胞构建的成瘤裸鼠体内腹腔注射Stattic（5 mg/kg）,观察对食管鳞癌生长的影响。结果1.组织芯片的结果表明,KIRREL3在食管鳞癌组织中的表达高于癌旁组织,并且它的表达与分化程度有关。2.Western blotting结果表明,KIRREL3在正常食管上皮细胞中的表达低于食管鳞癌细胞中的表达;KIRREL3在食管鳞癌细胞中的表达水平不一致,在KYSE150、Eca109、KYSE450、KYSE510 细胞中表达相对高,在 KYSE30细胞中表达相对低。STAT3、p-STAT3在食管鳞癌细胞中均有不同程度的高表达。3.食管鳞癌细胞中下调KIRREL3对细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭、周期及凋亡的影响。（1）Western blotting鉴定敲低效率:在Eca109和KYSE150细胞中siRNA干扰实验和慢病毒感染的方法均成功敲低了 KIRREL3的表达。（2）CCK8检测细胞增殖结果:与对照组相比,下调KIRREL3后细胞的增殖能力受到抑制。（3）平板克隆实验结果:与对照组相比,下调KIRREL3后细胞的克隆形成能力受到抑制。（4）Transwell实验结果:与对照组相比,下调KIRREL3后细胞的侵袭、迁移能力受到抑制。（5）流式细胞术检测细胞周期及凋亡实验结果:与对照组相比,下调KIRREL3后细胞的周期受到阻滞,同时细胞凋亡数量增多。4.食管鳞癌细胞中上调KIRREL3对细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭的影响。（1）Western blotting鉴定过表达效率:与对照组相比,过表达组KIRREL3表达明显增加。（2）CCK8法检测细胞增殖结果:与对照组相比,过表达KIRREL3后细胞的增殖能力增强。（3）平板克隆实验结果:与对照组相比,过表达KIRREL3后细胞的克隆形成能力增强。（4）Transwell检测结果:与对照组相比,过表达KIRREL3后细胞的侵袭、迁移能力增强。5.KIRREL3和p-STAT3之间的关系。（1）Stattic 作用于 Eca109、KYSE150 细胞后,p-STAT3 表达随着 Stattic 浓度的增加逐渐下降,KIRREL3表达变化不明显,而是在Stattic作用的最大浓度受到抑制。（2）姜黄素作用于Eca109、KYSE150细胞后,p-STAT3、KIRREL3的表达随着姜黄素浓度的增加逐渐下降。6.裸鼠成瘤实验检测KIRREL3的表达对食管鳞癌生长的影响以及KIRREL3和p-STAT3的关系。（1）KYSE150-shControl 组、KYSE150-shKIRREL3 组和 Eca109-shControl 组、Eca109-shKIRREL3组的肿瘤生长结果:shKIRREL3敲低组与各自的shControl对照组相比,shKIRREL3敲低组肿瘤的体积和重量明显小于shControl 对照组。（2）siKIRREL3组与siNC对照组相比,siKIRREL3组肿瘤的体积和重量明显小于siNC对照组。（3）Stattic组与Eca109-shControl和siNC组相比,Stattic组肿瘤的体积和重量明显小于对照组。结论1.KIRREL3在食管鳞癌组织及大多数食管鳞癌细胞中都有较高的表达,同时在食管鳞癌组织中的表达与分化程度有关。2.KIRREL3的表达促进食管鳞癌细胞的增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力,并且对细胞周期和凋亡也有一定的影响。
乔冠恩[9]（2019）在《miR-106b-3p靶向ZNRF3调控食管鳞癌恶性生物学行为及分子机制研究》文中研究说明目的:本实验主要研究食管鳞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）组织中miR-106b-3p的表达情况,通过体外细胞实验和体内动物实验确认miR-106b-3p的差异表达能够影响ESCC细胞的增殖、迁移、侵袭、黏附和上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）进程。通过Target Scan以及双荧光素酶报告实验预测及验证miR-106b-3p在ESCC调控中的靶基因。最后,深入探讨miR-106b-3p调控ESCC恶性生物学功能的机制。方法:1、收集苏州大学附属第一医院和邯郸市第一医院的ESCC组织和癌旁样本3对,应用Agilent miRNAs表达谱芯片技术筛选出差异表达的miRNAs;2、RT-qPCR检测差异比较大的miR-106b-3p的表达水平;3、RT-qPCR检测miR-106b-3p在ESCC细胞株（KYSE150、ECA109和EC9706）和人正常食管上皮细胞（HET-1A）中的表达;MTT-8和克隆形成实验检测ESCC细胞株（KYSE150、ECA109和EC9706）和人正常食管上皮细胞（HET-1A）的增殖能力;4、将合成的miR-106b-3p mimics NC、miR-106b-3p mimics、miR-106b-3p inhibitors NC及miR-106b-3p inhibitors转染至ESCC细胞株（ECA109和KYSE150）中,RT-qPCR检测转染效率;MTT和克隆形成实验检测miR-106b-3p对ESCC细胞株（ECA109和KYSE150）增殖能力的影响,流式周期实验观察对周期分布的影响,Western blot实验观察对细胞周期、迁移、侵袭及EMT相关蛋白表达的影响,划痕实验观察对细胞非定向迁移能力的影响,Transwell迁移实验观察对细胞定向迁移能力的影响,Transwell侵袭移实验观察对细胞侵袭能力的影响,光镜观察细胞形态的变化,细胞黏附实验观察对细胞黏附能力的影响;5、构建ESCC细胞株（ECA109）裸鼠移植瘤模型,观察miR-106b-3p对ESCC细胞株移植瘤生长的作用;6、免疫荧光和Western blot实验检测ZNRF3在ESCC细胞株（KYSE150、ECA109和EC9706）和人正常食管上皮细胞（HET-1A）中的表达;RT-qPCR、Western blot和免疫荧光实验检测ESCC细胞株（ECA109和KYSE150）转染miR-106b-3p mimics NC、miR-106b-3p mimics、miR-106b-3p inhibitors NC及miR-106b-3p inhibitors后ZNRF3 m RNA和蛋白的表达;Target Scan预测miR-106b-3p的靶基因,双荧光素酶报告实验验证miR-106b-3p的靶基因;7、RT-qPCR和Western blot检测miR-106b-3p对ESCC细胞株（ECA109和KYSE150）中Wnt/β-catenin信号通路的影响。结果:1、利用Agilent miRNAs表达谱芯片筛选出62个ESCC差异表达的miRNAs,其中ESCC表达上调的miRNAs 41个,下调的miRNAs 21个;2、RT-qPCR实验结果显示miR-106b-3p在ESCC临床组织样本的表达水平要显着高于其在癌旁中的表达;3、RT-qPCR结果显示miR-106b-3p在ESCC细胞株（KYSE150、ECA109和EC9706）中的表达要显着高于其在人正常食管上皮细胞（HET-1A）的表达;MTT和克隆形成实验结果显示ESCC细胞株（KYSE150、ECA109和EC9706）的增殖能力要显着高于人正常食管上皮细胞（HET-1A）;4、转染miR-106b-3p inhibitors后,ESCC细胞株（ECA109和KYSE150）中miR-106b-3p的表达水平显着降低,转染miR-106b-3p mimics后,ESCC细胞株（ECA109和KYSE150）中miR-106b-3p的表达水平显着升高;MTT实验表明转染miR-106b-3p inhibitors后ESCC细胞株（ECA109和KYSE150）的增殖能力显着降低,而转染miR-106b-3p mimics后的增殖能力显着增强;克隆形成实验验表明转染miR-106b-3p inhibitors后ESCC细胞株的克隆形成能力显着降低,而转染miR-106b-3p mimics后的克隆能力显着增强;流式周期实验表明转染miR-106b-3p inhibitors后ESCC细胞株细胞阻滞在G1期,而转染miR-106b-3p mimics后的G1比例显着下调,且miR-106b-3p inhibitors能够显着抑制Cyclin D1蛋白的表达,促进p21和p27的表达,而miR-106b-3p mimics能够显着促进Cyclin D1蛋白的表达,抑制p21和p27的表达;划痕实验和Transwell迁移表明转染miR-106b-3p inhibitors后ESCC细胞株的迁移能力显着降低,而转染miR-106b-3p mimics后的迁移显着增强;Transwell侵袭实验表明转染miR-106b-3p inhibitors后ESCC细胞株的侵袭能力显着降低,而转染miR-106b-3p mimics后的侵袭显着增强;Western blot实验表明,miR-106b-3p inhibitors能够显着抑制MMP-2和MMP-9蛋白的表达,而miR-106b-3p mimics能够显着促进MMP-2和MMP-9蛋白的表达;细胞形态和黏附实验表明,miR-106b-3p inhibitors能够抑制ESCC细胞株对collagen I、collagen IV和fibronectin的黏附,而miR-106b-3p mimics能够增强对collagen I、collagen IV和fibronectin的黏附;Western blot实验表明,miR-106b-3p inhibitors能够显着抑制Snail、N-cadherin和Vimentin蛋白的表达,促进E-cadherin蛋白的表达,而miR-106b-3p mimics能够显着促进Snail、N-cadherin和Vimentin蛋白的表达,抑制E-cadherin蛋白的表达;5、裸鼠移植瘤实验表明,抑制miR-106b-3p的表达能够显着抑制移植瘤的生长,而促进miR-106b-3p的表达则显着促进移植瘤的生长;6、免疫荧光和Western blot实验表明ZNRF3在ESCC细胞株（KYSE150、ECA109和EC9706）的表达要显着低于其在人正常食管上皮细胞（HET-1A）中的表达;RT-qPCR、Western blot和免疫荧光实验结果表明,ESCC细胞株（ECA109和KYSE150）转染miR-106b-3p mimics后,ZNRF3 m RNA和蛋白的表达显着降低,转染miR-106b-3p inhibitors后,ZNRF3 m RNA和蛋白的表达显着升高;Target Scan预测ZNRF3是miR-106b-3p的潜在靶基因,且双荧光素酶报告实验验证ZNRF3是miR-106b-3p的靶基因;7、RT-qPCR结果显示抑制miR-106b-3p的表达可以显着抑制Wnt和β-catenin m RNA的表达,促进GSK3βm RNA的表达;促进miR-106b-3p的表达可以显着促进Wnt和β-catenin m RNA的表达,降低GSK3βm RNA的表达。Western blot实验示抑制miR-106b-3p的表达可以显着抑制Wnt和β-catenin蛋白的表达,上调p-GSK3β蛋白的表达;促进miR-106b-3p的表达可以显着促进Wnt和β-catenin蛋白的表达,降低p-GSK3β蛋白的表达。结论:1、miR-106b-3p在食管鳞癌临床样本中显着高表达;2、miR-106b-3p可以显着促进食管鳞癌细胞株的增殖、周期、迁移、侵袭、黏附及EMT进程;能够显着促进食管鳞癌细胞移植瘤的生长;3、miR-106b-3p能够靶向作用于ZNRF3;4、miR-106b-3p可以显着促进Wnt/β-catenin信号通路的表达。
彭维[10]（2019）在《SOX2、VEGF-C在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义》文中研究说明目的:通过检测性别决定区Y框蛋白2（SRY related HMG box2,SOX2）和血管内皮生长因子-C（Vascular endothelial growth factor C,VEGF-C）在上皮内瘤变、正常组织及食管鳞癌中的表达,探讨SOX2和VEGF-C两种蛋白在食管鳞癌发生发展的相关性,从而为食管癌的早期诊断和推测预后提供理论依据。方法:采用免疫组织化学染色技术检测食管正常黏膜组织、上皮内瘤变及食管鳞癌中SOX2、VEGF-C的表达情况。采用SPSS17.0统计学软件进行数据分析。结果:1.SOX2、VEGF-C在食管鳞癌、食管上皮内瘤变中的阳性表达率均高于正常食管组织,差异有统计学意义（P<0.05）。SOX2、VEGF-C在食管鳞癌中的阳性表达率均高于食管上皮内瘤变中的表达率,差异无统计学意义（P>0.05）。2.在食管鳞癌组中,SOX2的阳性表达率与TNM分期、有淋巴结转移、浸润深度呈正相关,分期越高、有淋巴结转移、浸润越深,SOX2的阳性表达率越高,差异有统计学意义（P<0.05）。VEGF-C的阳性表达率与有淋巴结转移、浸润深度呈正相关,有淋巴结转移、浸润越深,VEGF-C的阳性表达率越高,差异有统计学意义（P<0.05）。3.在食管鳞癌中SOX2与VEGF-C蛋白在食管鳞癌中的表达呈正相关（r=0.435,P<0.01）。结论:SOX2、VEGF-C高表达于食管鳞癌、食管上皮内瘤变组织中,可能是食管癌发生进展的重要分子之一;SOX2、VEGF-C在上皮内瘤变中的表达率高于食管正常黏膜,两者联合用于筛查食管黏膜癌前病变可能具有一定的应用价值;SOX2和VEGF-C的高表达与食管鳞癌的浸润深度、淋巴结转移呈正相关,提示与肿瘤的浸润、转移有关,对判断食管鳞癌预后有潜在的临床价值;食管鳞癌组织中SOX2、VEGF-C的表达呈正相关关系。
二、血管内皮生长因子在食管鳞癌组织中的表达（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、血管内皮生长因子在食管鳞癌组织中的表达（论文提纲范文）
（1）基质金属蛋白酶-2和血管内皮生长因子在食管鳞癌中的表达及其与预后的关系（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验方法 |
| 1.4 判定结果 |
| 1.5 观察指标 |
| 1.6 随访 |
| 1.7 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 MMP-2、VEGF在食管鳞癌组织中的表达 |
| 2.2 MMP-2、VEGF阳性表达与食管鳞癌临床病理因素的关系 |
| 2.3 MMP-2、VEGF在食管鳞癌组织中表达的相关性 |
| 2.4 MMP-2、VEGF表达与生存期的关系 |
| 2.5 影响食管鳞癌患者生存期的多因素分析 |
| 3 讨论 |
（2）VEGFR-3、MCM2的表达及D2-40标记的MLVD与食管鳞癌预后相关性分析（论文提纲范文）
| 中英缩略词对照表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 MicroRNAs在食管癌发病机制和治疗中的意义 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（3）白细胞介素1受体拮抗剂通过调控MMP9和VEGF-C抑制食管鳞癌淋巴结转移的机制研究（论文提纲范文）
| 附录一 英文缩略词表 |
| 附录二 主要仪器设备 |
| 附录三 主要试剂配方 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一章 食管鳞癌组织差异基因鉴定和生物信息学分析 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 材料与方法 |
| 1.3 结果 |
| 1.4 讨论 |
| 1.5 小结 |
| 第二章 IL-1RA在食管鳞癌中表达水平及预后的影响 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料和方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 IL-1RA通过阻断IL-1α抑制食管鳞癌的增殖和迁移 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料与方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 IL-1RA在肿瘤诱导的淋巴结转移中的作用及其机制 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料与方法 |
| 4.3 结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 Anakinra对食管鳞癌治疗效应的探索 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验材料与方法 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.4 结果 |
| 5.5 讨论 |
| 5.6 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 炎症与肿瘤 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间获得的学术成果 |
（4）GNL3L在食管鳞癌进展中的作用及机制的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略词对照表 |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 食管癌概述 |
| 1.1.1 概述 |
| 1.1.2 食管癌的分子靶向治疗 |
| 1.2 核仁的功能 |
| 1.2.1 核仁的结构及主要功能 |
| 1.2.2 核仁内蛋白的定位 |
| 1.2.3 核仁的其他功能 |
| 1.3 核干细胞因子家族 |
| 1.3.1 核干细胞因子家族概述 |
| 1.3.2 核干细胞因子功能概述 |
| 1.3.3 结合核干细胞因子的蛋白及相关作用机制 |
| 1.3.4 GNL3L与核干细胞因子的联系及区别 |
| 1.4 RAS信号通路与食管癌 |
| 1.4.1 RAS信号通路概述 |
| 1.4.2 RAS信号通路与肿瘤 |
| 1.4.3 RAS信号通路与食管癌 |
| 1.5 抗瘤酮与肿瘤治疗 |
| 1.5.1 抗瘤酮概述 |
| 1.5.2 抗瘤酮作用于RAS通路 |
| 1.5.3 抗瘤酮对多种肿瘤有效 |
| 1.6 小结 |
| 第2章 综述 GNL3L的研究进展 |
| 2.1 GNL3L的发现及基本结构 |
| 2.2 GNL3L的空间构型与细胞内定位 |
| 2.3 GNL3L在调节细胞周期中的作用 |
| 2.4 GNL3L影响核糖体合成 |
| 2.5 GNL3L在肿瘤中的作用 |
| 2.5.1 结合雌激素相关受体γ |
| 2.5.2 结合小鼠双微体2 |
| 2.5.3 结合核因子κB |
| 2.5.4 影响肿瘤起始细胞 |
| 2.6 小结 |
| 第3章 材料与方法 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 实验细胞系及动物 |
| 3.1.2 抗体、siRNA及质粒 |
| 3.1.3 主要实验试剂及仪器 |
| 3.1.4 主要实验溶液配制 |
| 3.2 实验方法与步骤 |
| 3.2.1 细胞培养 |
| 3.2.2 细胞转染 |
| 3.2.3 CCK8 实验 |
| 3.2.4 Transwell迁移/侵袭实验 |
| 3.2.5 克隆形成实验 |
| 3.2.6 细胞划痕实验 |
| 3.2.7 流式细胞术检测细胞凋亡 |
| 3.2.8 Western Blot实验 |
| 3.2.9 人源性食管鳞癌裸鼠皮下移植瘤模型 |
| 3.2.10 统计学分析 |
| 第4章 结果 |
| 4.1 GNL3L在食管鳞癌组织中的表达及临床价值 |
| 4.2 GNL3L敲低和过表达的食管鳞癌细胞系的建立 |
| 4.3 GNL3L影响食管鳞癌细胞的增殖 |
| 4.4 GNL3L影响食管鳞癌细胞的迁移和侵袭 |
| 4.5 GNL3L影响食管鳞癌细胞的凋亡 |
| 4.6 GNL3L影响RAS通路相关蛋白的表达 |
| 4.7 阻断RAS信号通路抑制GNL3L的促增殖作用 |
| 4.8 阻断RAS信号通路抑制GNL3L的抗凋亡作用 |
| 4.9 GNL3L对人源性食管鳞癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用 |
| 第5章 讨论 |
| 5.1 GNL3L在食管鳞癌组织中的差异表达及临床价值 |
| 5.2 GNL3L影响食管鳞癌细胞的增殖 |
| 5.3 GNL3L影响食管鳞癌细胞的迁移和侵袭 |
| 5.4 GNL3L影响食管鳞癌细胞的凋亡 |
| 5.5 GNL3L通过RAS通路影响食管鳞癌的生物学行为 |
| 第6章 结论 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在学期间取得的科研成果 |
| 致谢 |
（5）MTDH在食管鳞癌组织及血清中的表达及其临床预后相关性的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第1章 材料与方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.2.1 食管鳞状细胞癌确诊标准 |
| 1.2.2 食管鳞癌位置分类标准(见表 1) |
| 1.2.3 食管癌TNM分期标准(见表 2) |
| 1.2.4 食管鳞癌的组织学分级(见表 3) |
| 1.2.5 食管鳞癌的病理TNM分期(pTNM)预后分组(见表 4) |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 实验试剂耗材及相关仪器 |
| 1.5.1 实验主要试剂和耗材(见表 5) |
| 1.5.2 实验主要仪器(见表 6) |
| 1.6 实验方法 |
| 1.6.1 资料的统计与收集 |
| 1.6.2 实时荧光定量聚合酶链式反应(Quantitative Real-time PCR, QRT-PCR) |
| 1.6.3 免疫组化(Immunohistochemistry,IHC) |
| 1.6.4 酶联免疫吸附实验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay, ELISA) |
| 1.6.5 生物信息学分析 |
| 1.7 统计学分析及处理 |
| 1.8 技术路线图 |
| 第2章 研究结果 |
| 2.1 基于公共数据库探索 MTDH 在食管癌组织和食管正常黏膜组织中的表达水平、临床意义及相关机制 |
| 2.1.1 聚类分析筛选食管鳞癌样本的差异表达基因 |
| 2.1.2 MTDH 在不同肿瘤组织中的表达 |
| 2.1.3 食管癌中 MTDH 的表达差异水平 |
| 2.1.4 MTDH与食管癌患者临床病理资料的关系 |
| 2.1.5 基于公共数据库对 MTDH 预后生存分析结果 |
| 2.1.6 食管鳞癌差异基因的富集分析结果 |
| 2.1.7 蛋白互作分析结果 |
| 2.1.8 MTDH 与富集通路和蛋白互作网络中基因的相关性分析结果 |
| 2.1.9 MTDH与MicroRNA相关性分析结果 |
| 2.2 MTDH在食管鳞癌组织中的表达情况 |
| 2.2.1 食管鳞癌组织中MTDH在 m RNA水平上的表达情况 |
| 2.2.2 食管鳞癌组织中MTDH在蛋白水平上的表达情况 |
| 2.2.2.1 免疫组化的结果 |
| 2.2.2.2 MTDH在食管鳞癌的表达情况与临床病理特征的关系 |
| 2.2.2.3 食管鳞癌组织中MTDH表达与患者生存之间的关系 |
| 2.2.2.4 影响食管鳞癌患者术后生存时间的COX回归分析 |
| 2.3 MTDH在食管鳞癌患者及正常人血清中的表达情况 |
| 2.3.1 食管鳞癌组和健康体检组的一般资料 |
| 2.3.2 食管鳞癌组和健康体检组中血清MTDH和 SCC水平的比较 |
| 2.3.3 食管鳞癌患者血清MTDH和 SCC表达与临床病理特征的关系 |
| 2.3.4 食管鳞癌患者死亡组和存活组的血清MTDH、SCC水平的比较 |
| 2.3.5 食管鳞癌患者血清 MTDH、SCC 的诊断价值分析结果 |
| 第3章 讨论 |
| 第4章 结论 |
| 参考文献 |
| 附录Ⅰ知情同意书 |
| 综述 RNA结合蛋白MTDH在消化系肿瘤的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（6）HGF通过激活PI3K/AKT信号通路促进食管鳞癌发生和发展机制的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 HGF在食管癌中的表达及意义 |
| 引言 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 第二部分 HGF对食管鳞癌细胞生物学功能的影响 |
| 引言 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 第三部分 HGF影响食管鳞癌细胞生物学性的分子机制 |
| 引言 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述: 消化道恶性肿瘤治疗新靶点HGF/c-MET的研究进展 |
| 参考文献 |
| 英文缩写词表 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
（7）miR-664b-5p对食管癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 病例和样本收集 |
| 1.2 食管癌细胞系 |
| 1.3 主要仪器设备与实验试剂 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 福尔马林固定石蜡包埋组织样本总RNA提取 |
| 2.2 细胞总RNA提取 |
| 2.3 逆转录反应 |
| 2.4 实时荧光定量PCR |
| 2.5 食管癌细胞的培养与转染 |
| 2.6 实时荧光定量PCR检测miR-664b-5p的转染效率 |
| 2.7 细胞增殖实验 |
| 2.8 细胞迁移和侵袭实验 |
| 2.9 Western blot实验 |
| 2.10 细胞周期实验 |
| 2.11 miRNA靶基因预测与富集分析 |
| 2.12 统计学方法 |
| 实验结果 |
| 1.哈萨克族食管鳞癌组织中miR-664b-5p的表达 |
| 2.miR-664b-5p在哈萨克族食管鳞癌患者不同临床病理特征中的表达 |
| 3.qRT-PCR检测miR-664b-5p的转染效率 |
| 4.miR-664b-5p对食管癌细胞增殖的影响 |
| 5.miR-664b-5p对食管癌细胞迁移和侵袭的影响 |
| 6.miR-664b-5p对食管癌细胞凋亡相关蛋白的影响 |
| 7.过表达miR-664b-5p对食管癌细胞周期的影响 |
| 8.miR-664b-5p的靶基因预测和生物信息学分析 |
| 9.miR-664b-5p靶基因的筛选 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 |
（8）KIRREL3在食管鳞癌中的作用及其调控（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英汉缩略词表 |
| 引言 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 食管鳞状细胞癌侵袭转移机制的研究现状 |
| 参考文献 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
（9）miR-106b-3p靶向ZNRF3调控食管鳞癌恶性生物学行为及分子机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 参考文献 |
| 第一章 食管鳞癌组织中microRNAs差异表达谱的筛选及研究 |
| 1.1 差异表达谱的筛选 |
| 1.1.1 材料 |
| 1.1.2 方法 |
| 1.1.3 结果 |
| 1.1.4 讨论 |
| 1.1.5 结论 |
| 1.2 食管鳞癌组织miR-106b-3p的研究 |
| 1.2.1 材料 |
| 1.2.2 方法 |
| 1.2.3 结果 |
| 1.2.4 讨论 |
| 1.2.5 结论 |
| 参考文献 |
| 第二章 miR-106b-3p对食管鳞癌细胞生物学功能的影响 |
| 2.1 对体外细胞生物学功能的影响 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.2 方法 |
| 2.1.3 结果 |
| 2.1.4 讨论 |
| 2.1.5 结论 |
| 2.2 对裸鼠移植瘤的影响 |
| 2.2.1 材料 |
| 2.2.2 方法 |
| 2.2.3 结果 |
| 2.2.4 讨论 |
| 2.2.5 结论 |
| 参考文献 |
| 第三章 miR-106b-3p调控食管鳞癌分子机制研究 |
| 3.1 miR-106b-3p的靶基因验证及二者关系 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 方法 |
| 3.1.3 结果 |
| 3.1.4 讨论 |
| 3.1.5 结论 |
| 3.2 miR-106b-3p对 Wnt/β-catenin信号通路的影响 |
| 3.2.1 材料 |
| 3.2.2 方法 |
| 3.2.3 结果 |
| 3.2.4 讨论 |
| 3.2.5 结论 |
| 参考文献 |
| 全文小结 |
| 综述:食管癌相关研究进展 |
| 参考文献 |
| 缩略词表 |
| 攻读学位期间公开发表的文章 |
| 致谢 |
（10）SOX2、VEGF-C在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述:SOX2 在消化道恶性肿瘤中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
四、血管内皮生长因子在食管鳞癌组织中的表达（论文参考文献）
- [1]基质金属蛋白酶-2和血管内皮生长因子在食管鳞癌中的表达及其与预后的关系[J]. 张文宇. 河南医学研究, 2021(25)
- [2]VEGFR-3、MCM2的表达及D2-40标记的MLVD与食管鳞癌预后相关性分析[D]. 唐晟杰. 遵义医科大学, 2021(01)
- [3]白细胞介素1受体拮抗剂通过调控MMP9和VEGF-C抑制食管鳞癌淋巴结转移的机制研究[D]. 沈智敏. 福建医科大学, 2021(02)
- [4]GNL3L在食管鳞癌进展中的作用及机制的研究[D]. 边帅. 吉林大学, 2021(01)
- [5]MTDH在食管鳞癌组织及血清中的表达及其临床预后相关性的实验研究[D]. 王兵. 甘肃中医药大学, 2021(01)
- [6]HGF通过激活PI3K/AKT信号通路促进食管鳞癌发生和发展机制的研究[D]. 谢波. 苏州大学, 2020(06)
- [7]miR-664b-5p对食管癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响[D]. 向辉. 石河子大学, 2020(08)
- [8]KIRREL3在食管鳞癌中的作用及其调控[D]. 张显娥. 郑州大学, 2020(02)
- [9]miR-106b-3p靶向ZNRF3调控食管鳞癌恶性生物学行为及分子机制研究[D]. 乔冠恩. 苏州大学, 2019(06)
- [10]SOX2、VEGF-C在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义[D]. 彭维. 川北医学院, 2019(03)
标签：食管癌论文; 细胞系论文; 血管内皮生长因子论文; 转化生长因子-β论文; 细胞增殖论文;